Похідні сечовини, спосіб їх одержання, лікарський засіб

1 ПОХІДНІ сечовини загальної формули І О CF: в якій R1 означає водень або нижчий алкіл, R2 означає водень або галоген і R3 означає водень або нижчий алкокси, а також їх фізіологічно сумісні кислотно-адитивні солі 2 ПОХІДНІ сечовини загальної формули І за п 1, які являють собою (2R)-1-[3,5біс(трифторметил)бензоіл]-2-(1Н-шдол-3-ілметил)4{2-[N-(2метоксибензил)аміноетил]амшокарбоніл}піперазин і його фізіологічно сумісні кислотно-адитивні солі 3 Лікарський засіб, що містить фармакологічно ефективну КІЛЬКІСТЬ сполуки за п 1 і звичайні фармацевтичні ДОПОМІЖНІ речовини і/або носи 4 Спосіб отримання похідних сечовини загальної формули І піддають взаємодії з реакцшноздатною бонільною сполукою загальної формули III кар О ш в якій Y означає ту летку групу, яка витісняється внаслідок нуклеофільної атаки первинного або вторинного аміну, з утворенням карбамоільної сполуки загальної формули IV CF, IV в якій Y має вищевказане значення, при необхідності, до отриманої сполуки формули IV додають ненуклеофільну органічну основу, оскільки внаслідок відщеплення леткої групи Y з отриманої спо О О со о (О 60300 луки формули IV може утворитися кислота, і потім піддають сполуку формули IV взаємодії із сполукою загальної формули V VI OCN HjN у в якій R означає нижчий алкіл або амінозахисну 2 3 групу, a R2 і R3 мають вищевказані значення, і потім знову відщеплюють можливу захисну групу 101 R , або б) сполуку формули II піддають взаємодії із сполукою загальної формули VI Даний винахід стосується нових похідних карбаміду, у яких один атом азоту є складовою частиною піперазинового кільця, а інший заміщений бензиламшоетильним залишком Ці нові ПОХІДНІ сечовини відрізняються антагоністичними властивостями по відношенню до рецепторів нейрокіншу і мають профіль дії, сприятливий для лікування функціональних і запальних розладів шлунковокишкового тракту вищих ссавців, зокрема людини Далі, винахід стосується лікарських засобів, що містять ці нові сполуки, а також способу одержання цих сполук В основу винаходу була покладена задача розробити нові активні речовини для лікування функціональних і запальних розладів шлунковокишкового тракту З заявки на Європейський патент, публікація №655442, уже ВІДОМІ ПОХІДНІ піперазину з антагоністичними властивостями по відношенню до рецепторів нейрокіншу Було знайдено, що група нових похідних піперазину, заміщених у 2-положенні індолілметильним залишком, у яких азот у 4-положенні піперазинового кільця є частиною несучого бензиламіноетильного замісника сечовинного кістяка, мають профіль дії, який робить їх придатними для лікування функціональних і запальних розладів шлунково-кишкового тракту Ця запропонована згідно з винаходом група речовин відрізняється, далі, добрим перенесенням та доброю оральною бюдоступністю Предметом винаходу є тому нові ПОХІДНІ сечовини формули І в якій R , R і R мають вищевказані значення, і потім знову відщеплюють можливу захисну групу 101 R , і, при необхідності, алкілують отриману спо1 луку формули І, в якій R означає водень, до утво1 рення сполуки формули І, у якій R означає нижчий алкіл, і отриману сполуку формули І, при бажанні, переводять в и кислотно-адитивну сіль або переводять кислотно-адитивну сіль у вільну сполуку формули І R позначає водень або нижчий алкокси, і їх фізіологічно сумісні кислотно-адитивні солі, а також одержувані з цих сполук лікарські засоби Оскільки В сполуках формули І замісники позначають або містять нижчий алкіл, останній може бути ЛІНІЙНИМ або розгалуженим і містити від 1 до 4, переважно від 1 до 2, атомів вуглецю Якщо R1 позначає нижчий алкіл, кращим є метил Якщо R2 позначає галоген, кращим є фтор Якщо R3 позначає нижчий алкокси, кращим є мето кс и Кращі сполуки формули І, у яких R2 позначає водень, a R3 метокси, або сполуки формули І, в яких R2 позначає фтор, a R3 - водень 1Н-шдол-3-іл-метильний залишок переважно розташований у 2R-пoлoжeннl піперазинового кільця Ці сполуки можуть бути отримані відомим способом Оптимальний спосіб одержання сполук формули І полягає втому, що а) сполуки формули II О NH піддають взаємодії з реакцшноздатними карбонільними сполуками загальної формули III О CF; в якій R1 позначає водень або нижчий алкіл, R2 позначає водень або галоген і в якій Y позначає летку групу, що витискається в результаті нуклеофільної атаки первинного або вторинного аміну, з утворенням карбамоільної сполуки загальної формули IV 60300 може утворитися кислота, доцільно додавати до сполуки формули IV перед и взаємодією із сполукою формули V не нуклеофільну органічну основу Оскільки Y позначає, наприклад, хлор, то хлористоводнева кислота, що утворюється при відщепленні Y, може бути зв'язана додаванням вищезгаданої основи В якості не нуклеофільних основ ПІДХОЖІ розчинні в реакційній суміші органічної основи, такі як третинні азотні основи, наприклад, Nалкіловані гетероцикли, що містять азот, такі як Nнижчий алкіл-морфолін або N-нижчий алкілв якій Y має вищевказане значення, до отрипіперидин або третинні нижчі алкіламіни і піридиманої сполуки формули IV додають не нуклеофіни, такі як, наприклад триетиламш, трипропіламш, льну органічну основу, оскільки в результаті віддмзопропілетиламін, піридин, 4щеплення леткої групи Y з отриманої сполуки диметиламшопіридин, 4-діетиламшопіридин або 4формули IV може утворитися кислота, і потім підпіролідинопіридин Застосовувані в надмірі основи дають сполуки формули IV взаємодії сполукою також можуть використовуватися в якості розчинзагальної формули V ників Серія реакцій може здійснюватися як одноапаратна реакція в полярному апротонному розчиннику, такому як частково галогенований нижчий вуглеводень, наприклад дихлорметан, при температурах від -20°С до кімнатної температури, переважно при кімнатній температурі Взаємодія сполуки формули II із ізоціанатом формули VI згідно з варіантом б) способу може відбуватися сама по собі відомим чином Сполуки в якій R позначає нижчий алкіл або амінозаформули VI можуть бути отримані, наприклад, з хисну групу, a R2 і R3 мають вищевказані значення, амінів формули V шляхом взаємодії з ВІДПОВІДНИі потім знову відщеплюють можливу захисну групу МИ реакційноздатними карбонільними сполуками R101, або В якості реакційноздатних карбонільних сполук б) сполуки формули II піддають взаємодії із ПІДХОЖІ, наприклад, сполуки формули III 3 аміну сполукою загальної формули VI формули V спочатку доцільно одержують ізоціанат формули VI, який потім безпосередньо in situ піддають взаємодії із сполукою формули II Серія реакцій може здійснюватися при умовах, зазначеVI них вище для одержання сполук формули І згідно з варіантом а) способу, як одноапаратна реакція У реакційну суміш доцільно може бути доданий кислотозв'язуючий реагент В якості кислотозв'язуюв якій R , R і R мають вищевказані значенчих реагентів ПІДХОЖІ вищевказані не нуклеофільні ня, і потім знову відщеплюють можливу захисну основи 101 групу R , і, при бажанні, отримані сполуки фор1П1 1 мули І, в якій R позначають водень, алкілують до В якості амінозахисних груп R прийнятні ВІ1 утворення сполуки формули І, в якій R позначає ДОМІ, наприклад, із хімії пептидів, амінозахисні нижчий алкіл, і отримані сполуки формули І, при групи, які можна вводити і знову відщеплювати бажанні, переводять в їх кислотно-адитивні солі відомими методами ВІДПОВІДНІ захисні групи ВІДОабо переводять кислотно-адитивні солі у ВІЛЬНІ МІ, наприклад, із публікацій J AW McOmie сполуки формули І «Protective Groups in Organic Chemistry», Plenum ВІДПОВІДНО ДО варіанту а) способу, сполуки Press, 1973, або TW Green and P G M Wuts формули II доцільно піддавати взаємодії з реак«Protective Groups in Organic Chemistry», Wiley and ційноздатною»карбонільною сполукою формули III Sons 1991 до утворення карбамоільної сполуки формули IV, Придатні, наприклад, в якості амінозахисних яка безпосередньо in situ, при необхідності при груп R101 дуже СТІЙКІ в кислому і лужному середододаванні не нуклеофільної органічної основи, вищі групи, які можуть бути відщиплені при пдроможе бути'піддана взаємодії з аміном формули V генолітичних умовах До них відносяться, наприВ якості летких груп Y у сполученнях формули III клад, феніл нижчий алкілокси карбонільні групи, придатні, наприклад галогени, переважно хлор, такі як бензилоксикарбонільна група (що позначатригалометоксигрупи, переважно трихлорметоксиються нижче як СЬО) Переважно, в якості аміногрупи, або ж імідазолільні групи Переважно в якозахисної групи R101 може бути використана бензисті реакційних карбонільних сполук формули III локсикарбонільна група, яка може бути можуть бути використаний фосген бісвідщиплена відомим чином, наприклад, шляхом (трихлорметил)-карбонат(трифосген), трихлормекаталітичного гідрування, для одержання сполук тиловий ефір хлормурашиної кислоти (дифосген) формули І, в якій R1 позначає водень Відщепленабо карбонілдммідазол При взаємодії аміну форня захисної групи може відбуватися в інертному в мули V із карбамоільними сполуками формули IV умовах реакції органічному розчиннику, такому як летка група Y витискається із сполуки формули IV нижчий аліфатичний ефір, наприклад, тетрапдроОскільки З групи Y, що визволилася при цьому, фуран (що позначається нижче як THF) або дієти ПА N W^ I V ловий ефір, нижчі спирти, наприклад, метанол або етанол, або органічні кислоти, наприклад, нижчі аліфатичні карбонові кислоти, такі як оцтова кислота, або в сумішах цих розчинників і в присутності каталізатора гідрування В якості каталізаторів гідрування придатні, наприклад, каталізатори на основі благородного металу, такого як платина, на активованому вугіллі Реакцію доцільно здійснювати при кімнатній температурі Необхідний для гідрування тиск водню складає від 2 до 7 бар, переважно від 3 до 5 бар 1 Сполуки формули І, в якій R позначає водень, можуть бути при необхідності переведені відомими методами, застосовуваними для алкілування 1 амінів, у сполуки формули І, в якій R позначає нижчий алкіл 3 цією метою сполуки формули І можуть бути алкіловані відновлено, наприклад, шляхом взаємодії з нижчими аліфатичними альдегідами, такими як формальдегід Взаємодія може здійснюватися в звичайних для відбудовного алкілування амінів умовах, наприклад в умовах каталітичного гідрування В якості ВІДПОВІДНИХ каталізаторів гідрування можуть розглядатися металеві каталізатори, такі як нікель Ренея В якості розчинників переважно можуть бути використані нижчі спирти Каталітичне гідрування може здійснюватися в умовах, описаних вище для пдрогенолітичного відщеплення амінозахисних груп R101 Інша можливість алкілування складається з взаємодії сполук формули І, в якій R1 позначає водень, із нижчими аліфатичними алкіл галогенідами, такими як алкілброміди або алкілйодиди, переважно метил йодид, алкілсульфатами або ефірами алкілсульфонових кислот, при звичайних для реакцій нуклеофільного заміщення умовах Реакція може здійснюватися в полярному апротонному розчиннику, такому як диметилформамід (що позначається нижче як DMF), диметилсульфоксид (що позначається нижче як DMSO) або ацетонітрил при температурах від -20°С до 100°С, переважновід від 60°С до 90°С, і з застосуванням кислотозв'язуючого реагенту В якості кислотозв'язуючих реагентів прийнятні, наприклад, органічні основи, зазначені вище для взаємодії сполук формули IV із сполуками формули V В якості фізіологічне прийнятних солей сполук формули І можуть розглядатися їх солі з неорганічними кислотами, наприклад, сірчаною кислотою, фосфорною кислотою або галогенводневими кислотами, переважно хлористоводневою кислотою, або з органічними кислотами, наприклад, нижчими аліфатичними моно-, ди- або трикарбоновими кислотами, такими як малеїнова, фумарова, винна, лимонна кислоти або з сульфоновими кислотами, такими як метасульфонова кислота, або в разі необхідності заміщеними в бензольному КІЛЬЦІ галогеном або нижчим алкілом бензол сульфоновими кислотами, такими як п-толуол-сульфонова кислота Сполуки формули І можуть бути виділені й очищені відомим чином із реакційної суміші Кислотно-адитивні солі можуть бути переведені звичайним способом у ВІЛЬНІ основи, а останні відомим чином можуть бути переведені у фармакологічно прийнятні кислотно-адитивні солі Сполуки формули І містять хіральний атом ву 60300 8 глецю, а саме несучий ІН-індол-3-іл-метильний залишок атом вуглецю в 2-положенні піперазинового основного кістяка Тим самим сполуки формули І можуть існувати в декількох стереоізомерних формах Даний винахід охоплює як суміші оптичних ізомерів, так і ізомерно-чисті сполуки формули І Переважні сполуки формули І, в якій індолілметильний залишок розташований у 2Rположенні піперазинового кільця Утому випадку, якщо при синтезі сполук формули І застосовуються суміші оптичних ізомерів вихідної сполуки формули II, то і сполуки формули І утворюються у вигляді сумішей оптичних ізомерів Виходячи зі стереохімічно єдиних форм вихідної сполуки, можуть бути отримані також стереохімічно єдині сполуки формули І Стереохімічні єдині сполуки формули І можуть бути одержані із сумішей оптичних ізомерів відомим чином, наприклад, шляхом хроматографічного розподілення на хіральних розподільних матеріалах або шляхом взаємодії з підхожими оптично активними кислотами, наприклад, с винною кислотою або камфорно-10сульфоновою кислотою, з подальшим розподіленням на оптично активні антиподи шляхом фракціонованої кристалізації одержаних діастереомірних солей Обидва можливих енантюмера сполуки формули II ВІДОМІ з ЕР-А 655422 і можуть бути отримані описаними в цій патентній заявці способом або аналогічно цьому способу Аміни формули V можуть бути отримані з ДВІЧІ амінозахищених діаміносполук загальної формули VII VII в якій R , R і R мають вищевказані значення і R401 позначає амінозахисну групу, шляхом селективного відщеплення відомим чином від сполук формули VII амінозахисної групи R401 В якості амшсзахисних груп R401 прийнятні загальновідомі, наприклад, із хімії пептидів, амінозахисні групи, описані у вищевказаних літературних джерелах Наприклад, придатні в якості аміноза4 хисних груп R \ у щонайменше помірковано кислому середовищі, що селективно відщеплюються шляхом додавання п -толуол сул ьфо но во і кислоти, трифтороцтової кислоти або газоподібної або розчиненої в розчинниках соляної кислоти групи, практично СТІЙКІ в пдрогенолітичних і лужних умовах До них відносяться, наприклад, розгалужені нижчі алкілоксикарбонільні групи, такі як третбутилоксикарбонільна група (що позначається нижче як ВОС) Переважно R4 1 може позначати трет-бутилоксикарбонільну групу Сполуки формули VII можуть бути отримані відомим чином, наприклад, шляхом відновлення амідів загальної формули VIII 60300 10 люють, застосовують самі кислоти формули IX, взаємодія амінів формули Х с кислотами формули IX може доцільно здійснюватися також у присутності відомого з хімії пептидів в якості ВІДПОВІДНОГО для амідоутворення відомого реагенту зв'язування Як приклад реагентів зв'язування, що сприяють утворенню аміду з вільними кислотами тим, що реагують із кислотою in situ з утворенням реакційв якій R , R , R і R мають вищевказані зна1 ноздатної похідної кислоти, можуть бути, зокрема, чення, і, оскільки R позначає водень, шляхом на1 ПІ названі алкілкарбодмміди, наприклад, циклоалкілступного введення захисної групи R Відновленкарбодмміди, такі як дициклогексилкарбодимід або ня може здійснюватися за допомогою комплексних 1-етил-3-[(диметиламшо)-пропіл]-карбодимід, дмгідридів лужних металів, таких як літійалюмшійпдзопропілкарбодммід або карбонілдимідазол Взаєрид, в якості ВІДНОВНИКІВ В якості розчинників примодія в присутності реагенту зв'язування може йнятні інертні в умовах реакції органічні розчинниздійснюватися доцільно при температурах від ки, такі як нижчі аліфатичні ефіри, наприклад, 30°С до +50°С у розчинниках, таких як галогенодіоксан, THF або діетиловий ефір або суміші цих вані вуглеводні і/або ароматичні вуглеводні, такі розчинників ВІДПОВІДНИМ температурним інтерваяк, у разі потреби, заміщені бензоли, і при необлом є інтервал від -20°С до температури кипіння хідності в присутності кислотозв'язуючої органічної реакційної суміші Відновлення переважно можна сполуки, наприклад вищеописаної не нуклеофільздійснювати при кімнатній температурі ноі азотної основи Кислоти формули IX являють Аміди формули VIII можуть бути отримані собою амінозахищені ПОХІДНІ ПОХІДНИХ 2шляхом взаємодії амінозахищених (соамінооцтової кислоти, яка відома в незахищеній амінокарбонових кислот загальної формули IX формі і яка відомими методами може бути переведена в амінозахищені ПОХІДНІ соон IX в якій R має вищевказане значення, з амінами загальної формули X ні X в якій R1, R2 і R3 мають вищевказані значення, методами, звичайними для утворення амід них угруповань шляхом аміноацилювання В якості засобу, що ацилює, можуть бути використані кислоти формули IX або їх реакційноздатні ПОХІДНІ В якості реакційноздатних похідних можуть розглядатися, зокрема, змішані ангідриди і хлорангідриди або броманпдриди кислот формули IX або змішані складні ефіри кислот формули IX із хлормурашиною кислотою або з органічними сульфоновими кислотами, наприклад, ароматичними сульфоновими кислотами, такими як заміщені нижчим алкілом або галогеном бензолсульфонові кислоти, наприклад, п-толуолсульфонова кислота Ацилювання може відбуватися в інертному в умовах реакції органічному розчиннику при температурах від -20°С до кімнатної температури, переважно при кімнатній температурі ВІДПОВІДНИМИ розчинниками є ароматичні вуглеводні, такі як бензол або толуол, аліфатичні ефіри, такі як діетиловий ефір, THF або діоксан або суміші цих розчинників Ацилювання може здійснюватися доцільно, особливо якщо в якості агента, що ацилює, застосовують галогенанпдрид кислот формули IX, у присутності кислотозв'язуючого реагенту В якості кислотозв'язуючого реагенту придатні не нуклеофільні органічні основи, зазначені вище для взаємодії карбамоільних сполук формули IV із сполуками формули V Утому випадку, якщо в якості агентів, що аци Сполуки формули X ВІДОМІ або можуть бути отримані відомим чином із відомих сполук Сполуки формули І і їх кислотно-адитивні солі мають антагоністичні властивості по відношенню до рецепторів нейрокіншу (=NK) і придатні для лікування хворобливих станів, при яких нейрокініни беруть участь в якості речовин-переносників Запропонована згідно з винаходом група сполук відрізняється при цьому особливо сприятливим вибірковим профілем дії, що характеризується високою спорідненістю до NK-1 рецепторів при меншій в порівнянні з ним спорідненості до NK-2 рецепторів Далі, сполуки виявляють високу оральну бюдоступність Запропонована згідно з винаходом група речовин на основі її профілю дії придатна, зокрема, для лікування процесів, в яких нейрокінши, що зв'язуються з NK-1 рецепторами, беруть участь як речовина Р Тим самим речовини згідно з винаходом вибірково придатні для лікування хворобливих станів, в яких бере участь речовина Р Речовина Р, наприклад, відіграє роль у переносі болі, при блювоті, нейрогенних запаленнях, запаленнях сечового міхура, запальних захворюваннях суглобів і астматичних скарг Завдяки оптимальній спрямованості їх профілю дії на шлунковокишковий тракт речовини згідно з винаходом придатні для лікування функціональних і запальних розладів шлунково-кишкового тракту Далі стосовно сполук, що мають поряд із високою спорідненістю до NK-1 рецепторів також і деяку спорідненість до NK-2 рецепторів, в загалі передбачається, що обидві ці складові дії роблять сприятливий синергічний вплив на механізми, що приймають участь у формуванні самої картини хвороби До функціональних розладів, які можна лікувати за допомогою сполук згідно з винаходом, відносяться, зокрема, так називаний «синдром подразненої товстої кишки» (IBS=irntable bowel syndrome) або ВІДОМІ як синдром подразненої товстої кишки розладу нижніх частин кишечника Основними симп 12 11 60300 томами синдрому подразненої товстої кишки є вин, що тестуються, із NK-1 рецепторами in vitro болі в нижній області живота, що, як видно, виклиВимірюється спорідненість речовин, що тескаються підвищеною чутливістю вісцеральної туються, до людських NK-2 рецепторів in vitro Виеферентної нервової системи, і аномалії випорожзначається гальмування зв'язування сполуки SRнення, зокрема аномально прискорене прохо48968 із NK-2 рецепторами SR-48968 являє содження калу в товстій кишці Підвищена вісцерабою синтетично одержувану сполуку, відому як льна болюча чутливість до механічних або специфічний NK-2-антагоніст ХІМІЧНИХ подразнень у кишковому тракті приводить Випробування по вивченню зв'язування з редо того, що пацієнти із синдромом подразненої цептором здійснюються з застосуванням сполуки товстої кишки вже при фізіологічних, обумовлених SR-48968 в якості ліганду Методика проведення переварюванням їжі, невеликих розтяганнях товсвипробування відповідає методиці, що застосовутої кишки, наприклад уже при невеликому газоутвалася при фармакологічному дослідженні з меворенні і легких спучуваннях, які здорові люди натою визначення здатності випробуваних речовин вряд чи помічають, відчувають сильні вісцеральні до зв'язування з NK-1 рецепторами in vitro Однак болі До запальних розладів шлунково-кишкового на відміну від неї, у даному випробуванні беруть тракту, на які можна сприятливо впливати за дорізні проби мембранного препарату СНО-кліток, помогою сполук, запропонованих згідно з винахощо експресують людський NK-2 рецептор У ниждом, відносяться охоплювані поняттям IBD ченаведеній таблиці 1 приводяться значення ве(=inflaromatory bowel disease) запальні розлади в личини Кі для спорідненості до людських NK-2 області тонкої і товстої кишок, зокрема неспецифірецепторів, показані в цій тест-моделі випробувачний виразковий коліт і хвороба Крона Профіль дії ними речовинами прикладів 1-3 речовин, завдяки доброї оральної бюдоступності, відрізняється сприятливою виборністю антагонісТаблиця 1 тичних дій по відношенню до рецепторів нейрокініну в сенсі небажаних побічних дій Так, у випроСпорідненість випробуваних речовин до людсьбуваннях по вивченню фармакологічних ких NK-2 рецепторів властивостей не було встановлено, у межах доз, що блокують NK-1 рецептор, ніякої кардюваскуляПриклад № Кі [мкмоль/л] рної кальційантагоністичної дії 1 0,06 Зазначені номера прикладш відносяться до 2 0,05 прикладів одержання, що описуються нижче 3 0,30 ОПИС ФАРМАКОЛОГІЧНИХ ТЕСТ-МЕТОДІВ 1 Визначення здатності речовин, що тестуЗ Визначення функціонального NK-1 антагоніються, до зв'язування з NK-1 рецепторами in vitro зму речовин, що тестуються, на ізольованій тканиВимірюється спорідненість речовин, що тесні морської свинки in vitro туються, до людських NK-1 рецепторів in vitro ВиВимірюється NK-1 рецептор-антогонізуюча дія значається гальмування зв'язування фізіологічного речовин, що тестуються, in vitro на ізольованих нейрокіншу (речовина Р) із рецепторами нейрокікільцевих аортних препаратах морських свинок ніну-1 породи Pirbnght-White, що витримуються в збагаВипробування по вивченню зв'язування з реченому киснем живильному розчині Визначається цептором здійснюються з застосуванням [ Н]гальмування речовинами, що тестуються, релакречовини Р в якості ліганду Для дослідження зв'ясації тонусу аортних препаратів, що викликається зування беруть різні проби мембранного препарапісля стимулювання NK-1 агоністом речовиною Р ту СНО-кліток (Chinese hamster oocytes = овоцити Для виміру скорочення судинної мускулатури китайського хом'ячка), що експресують людський препарати закріплюють на гачку, з'єднують ниткою NK-1 рецептор, шкубують у розчині міченого ліганэ динамометром і реєструють скорочення на саду, причому інкубаційні розчини не містять випромописному приладі Аортні препарати тонізують за буваної речовини або добавок різних концентрацій допомогою фенілефрину Потім стимулюють NK-1 випробуваної речовини Потім роблять поділ зв'ярецептори препаратів до і після введення'випрозаного і вільного ліганду в пробах за допомогою буваної речовини за допомогою 0,01 мкмоля речофільтрації на скловолокнистому фільтрі Фракцію, вини Р, викликаючи релаксацію тонусу КІЛЬКІСНО що залишається на фільтрі, декілька разів промирелаксацію визначають у відсотках до і після ввевають буферним розчином і потім вимірюють радення речовини, що тестується В якості характедіоактивність фракції, що залишилася у фільтрі, ристичної величини розраховують концентрацію бета-сцинтиляційним лічильником За розмір ICso 50%-ого (= =halbmaximale «напівмаксимальне») випробуваної речовини приймають ту концентрагальмування (=ICso), яка визначає ту концентрацію, що викликає 50%-ве (=haibmaximale «напівмацію, при якій наступає 50%-ве гальмування релакксимальне») витиснення зв'язаного ліганду Із неї сації тонусу розраховують відповідну константу інгібування У нижченаведеній таблиці 2 доводяться зна(величина Кі випробуваної речовини У цій тестчення розміру ІС50 для 50%-ого гальмування, помоделі речовина прикладу 1 показала значення казані в цій тест-моделі речовинами, що тестуютьвеличини Кі для спорідненості до людських NK-1 ся, прикладів 1-3 рецепторів, рівне 2,1нмоль/л 2 Визначення здатності до зв'язування речо 13 60300 Таблиця 2 Спорідненість випробуваних речовин до людських NK-2-рецепторів Приклад № 1 2 3 ІС50 [мкмоль/л] 0,001 0,0012 0,0015 4 Визначення антагоністичної дії речовин, що тестуються, по відношенню до речовини Р in vivo Для доказу антагоністичної дії речовин, що тестуються, по відношенню до речовини Р застосовували в якості стандартної тест-моделі для індуційованих речовиною Р фармакологічних ефектів гипотензію у морських свинок, що викликається введенням речовини Р Визначали гальмуючу дію речовин, що тестуються, по відношенню до зниження кров'яного тиску, що викликається речовиною Р, після внутрішньовенного (=і v) і штрадуоденального (=і d «усередину дванадцятипалої кишки») уведення випробуваних речовин Самцям морських свинок під наркозом (кетамін 67мг/кг, ксилазин 13мг/кг) вживляють катетер у загальну сонну артерію (Arteria Carotis Coromums) і в яремну вену (Vena Jugu-lans) Артеріальний катетер служить для виміру кров'яного тиску Вимір роблять за допомогою датчика тиску Statham 23d/B По венозному каналу вводять речовину Р, а при внутрішньовенному введенні, також і випробувану речовину Після фази зрівноважування протягом 20хв уводять внутрішньовенне (і V ) речовину Р В КІЛЬКОСТІ 50пмоль на тварину у вигляді кульки Потім уводять речовину, що тестується При дослідженні з внутрішньовенним (і V ) уведенням речовини, що тистується, уводять внутрішньовенне групі з 4-6 тварин у дозуваннях ВІДПОВІДНО 0,1, 0,46 і 1,0мкмоль/кг Контрольна група одержує відповідну КІЛЬКІСТЬ фізіологічного розчину повареної солі Через одну, 15, ЗО, 45 і 60 хвилин після введення речовини, що тестується, уводять внутрішньовенне речовину Р ВІДПОВІДНО в КІЛЬКОСТІ 50пмоль На відміну від вищеописаної процедури, у випробуваннях із штрадуоденальним (і d ) уведенням речовини ПІДДОСЛІДНИМ тваринам додатково вживлюють катетер у дванадцятипалу кишку Через цей катетер 3-6 тваринам уводять речовини, що тестуються, в дозуваннях ВІДПОВІДНО 0,046, 0,1, 0,46, 1,0, 4,6 і 10,0мкмоль/кг Лікарською основою в цих випробуваннях служить тилоза Вимірюють середній артеріальний кров'яний тиск до і приблизно через одну хвилину після першого введення речовини Р (до уведення випробуваної речовини) і з цього визначають максимальне зниження кров'яного тиску, що викликається речовиною Р Через 60 хвилин порівнюють середні значення артеріального кров'яного тиску контрольних тварин, яким давали тільки речовину Р, і тварин, яким давали речовину Р і речовину, що тестується, і по різниці результатів розраховують обумовлене ВІДПОВІДНОЮ дозою речовини, що тестується, гальмування зниження кров'яного тиску, що викликається речовиною Р, у відсотках, у перерахуванні на максимальне зниження кров'яного тиску За 14 величину ED50 приймають дозу, при якій має місце 50%-ве гальмування викликаного речовиною Р зниження кров'яного тиску У цій тест-моделі речовина з прикладу 1 після внутрішньовенного (і V ) введення показало значення ED50, рівне 0,2мкмоль/кг, і після введення в дванадцятипалу кишку (і d) значення EDso, що дорівнює 0,08мкмоль/кг Відношення ефективностей при внутрішньовенному введенні і при введенні в дванадцятипалу кишку (і v) може бути використане як показник того, що речовина добре підходить для орального застосування і що його дія переважно починається в шлунково-кишковому тракті У такій тест-моделі випробувані речовини досліджуються також на їх дію по зниженню кров'яного тиску, засновану на кальцій-антагоністичних властивостях 3 цією метою групам контрольних тварин уводять лише випробувані речовини без речовини Р Речовина з прикладу 1 у досліджуваному інтервалі доз (iv дози до 1мкмоль/кг і i d дози до 10мкмоль/кг) не показала значного зниження кров'яного тиску Це є вказівкою на те, що в цьому інтервалі доз не спостерігається кальційантагоністичних побічних дій Несподівано невеликі кальцій-антагоністичні побічні дії запропонованих згідно з винаходом сполук можуть бути доведені також на стандартних m-vitro-моделях, наприклад, на ізольованій аортовій тканині морських свинок Речовини можуть уводитися пацієнту у вигляді звичайних фармацевтичних препаратів Застосовувані дози можуть бути індивідуально різні і, природно, варіюють у залежності від виду захворювання і застосовуваної речовини У принципі, однак, для введення людині і вищим ссавцем придатні лікарські форми з утримуванням діючої речовини від 0,1 до 80мг, зокрема від 1 до Юмг на разову дозу Речовини згідно з винаходом можуть міститися разом із звичайними фармацевтичними допоміжними речовинами і/або носіями у твердих або рідких фармацевтичних препаратах В якості прикладів твердих препаратів варто назвати препарати, що приймаються орально, такі як таблетки, драже, капсули, порошки або грануляти, або також супозиторії Ці препарати можуть містити звичайні у фармацевтиці неорганічні і/або органічні речовини-носм, такі як, наприклад, тальк, молочний цукор або крохмаль, поряд із звичайними допоміжними речовинами, наприклад, пом'якшувачами або вибуховими речовинами для таблеток РІДКІ препарати, такі як суспензії або емульсії діючих речовин, можуть містити звичайні розріджувачі, такі як вода, масла і/або агенти, що суспендують, наприклад, поліетиленгліколі тощо Крім того, також можуть бути додані й ІНШІ ДОПОМІЖНІ речовини, наприклад консерванти, смакові добавки тощо ДІЮЧІ речовини можуть бути відомим способом змішані згідно з рецептурою з фармацевтичними допоміжними речовинами і/або речовинаминосіями Для одержання твердих лікарських форм ДІЮЧІ речовини можуть бути звичайним способом змішані, наприклад, із допоміжними речовинами і/або речовинами-носіями і піддані мокрій або сухій 16 15 60300 грануляції Гранулят або порошок може бути безефіру, відокремлюють водяну фазу і послідовно посередньо розфасований у капсули або спресопромивають органічну фазу ДВІЧІ ВОДОЮ, беручи її ваний звичайним способом у таблеткові ядра щораз у КІЛЬКОСТІ 50мл, однократно 15%-им водяОстанні можуть бути відомим способом переведеним розчином винної кислоти в КІЛЬКОСТІ 50мл і ні в драже знову ДВІЧІ водою (також по 50мл) Органічну фазу сушать потім над сульфатом натрію, упарюють Нижче винахід докладніше пояснюється на при зниженому тиску і сушать у високому вакуумі прикладах його здійснення, не обмежуючи його Одержують 4,9г г\І-ВОС-М'-(2-метокси)-бензил-г\Гоб'єму СЬ0-1,2-діамшоетану, який без обчищення викориПриклад 1 стовують у подальших реакціях (2R)-1 -[3,5-біс(трифторметил)бензоіл]-2-(1 Ніндол-3-ілметил)-4-{2-[ІЧ-(2Г) 4,8г отриманого вище продукту розчиняють метоксибензил)аміноетил]амшокарбоніл}піперазин у 50мл дихлорметану В отриманий розчин добавляють 4,4гтолуол-сульфоновоі кислоти і реакційну A) 101,5г трет-бутилоксикарбонілгліцину розсуміш залишають на ніч перемішуватися Потім чиняють в атмосфері азоту в 800мл дихлорметану добавляють розчин 7,5г NaOH у 75мл води Оргаі змішують із 96,5мл триетиламшу Охолоджуючи нічну фазу відокремлюють, однократно промивальодом, повільно по краплях добавляють 58мл ють у 75мл води і сушать над сульфатом натрію етилового ефіру хлормурашиної кислоти, переміРозчинник випаровують при зниженому тиску і шують отриману суміш ще протягом двох годин продукт сушать у високому вакуумі Одержують при кімнатній температурі і потім по краплях доба3,5г маслянистого г\І-(2-метокси)-бензил-І\І-СЬ0вляють розчин 79,8г 2-метоксибензиламшу в 1,2-діамшоетану, який без обчищення використо400мл дихлорметані Залишають на ніч перемішувують у подальших реакціях ватися, потім добавляють 1400мл 15%-ого водяного розчину винної кислоти і знову перемішують Д) 2,0г ^)-1-[3,5-біс(трифторметил)бензоіл]протягом ЗО хвилин Потім органічну фазу відо2-(1н-шдол-3-ілметил)-піперазину розчиняють у кремлюють, сушать над сульфатом натрію й упаЮОмл дихлорметану В отриманий розчин послірюють під зниженим тиском Залишок після розпадовно добавляють 0,6 г трифосгену, розчиненого в рювання кристалізують із суміші діетиловий 20мл дихлорметану, і 12,0мл дмзопропілетиламіну, ефір/дихлорметан і сушать у високому вакуумі розчиненого в 20мл дихлорметану Одержану реаОдержують 88,9г ІЧ-ВОС-С-(2-метокси)кційну суміш перемішують протягом однієї години бензиламшогліцину у вигляді білого порошку Т пл при кімнатній температурі і потім по краплях доба=97°С-97,7°С вляють 2,8г отриманої вище аміносполуки, розчиненої в 20мл дихлорметану Реакційну суміш пеБ) 40,0г отриманого вище продукту розчиняремішують ще протягом 18 годин і після цього ють в атмосфері азоту в 600мл суміші з толуолу і послідовно промивають 10%-им водяним розчиTHF (1 1) і по краплях вводять у ємність, що охоном гідросульфату калію, водою і потім насиченим лоджується льодом і що містить 21,0г L1AIN4 у розчином гідрокарбонату натрію Після цього дих500мл THF Суміш залишають на ніч перемішувалорметанову фазу сушать над сульфатом натрію тися при кімнатній температурі, після чого послій упарюють при зниженому тиску Залишок хромадовно добавляють по краплях суміш із 20мл води і тографують на силікагелі (розчинник дихлорме150мл THF при охолодженні льодом і потім при тан/метанол 3 1) і одержують 2,5г маслянистого кімнатній температурі спочатку 20мл 15%-ого во(2R)-1 -[3,5-біс(трифторметил)бензоіл]-2-(1 Н-індолдяного розчину їдкого натрі і, нарешті, 60мл води 3-ілметил)-4-{2-[І\І-(2-метоксибензил)-І\І-СЬ0Осад, що утворився, відфільтровують під вакууамшоетил]амшокарбоніл} піперазину, який без мом від розчину, а фільтрат упарюють при знижеобчищення застосовують у подальших реакціях ному тиску Залишок розчиняють у 240мл 7,5%-ого водяного розчину винної кислоти і водяну фазу Е) 2,5г отриманого вище продукту розчиняють екстрагують дихлорметаном Потім рН водяної у 400мл етанолу і змішують із 0,5г 10%-ого паладіфази доводять до значення 10, додаванням 200мл євого каталізатора на активованому вугіллі, Потім 10%-ого водяного розчину їдкого натру і ще три протягом 6 годин гідрують при тиску водню 4бар рази екстрагують дихлорметаном Об'єднані дихКаталізатор відфільтровують і розчинник упарююлорметанові фази сушать над сульфатом натрію, ють при зниженому тиску Хроматографують на упарюють при зниженому тиску і сушать у високосилікагелі (розчинник дихлорметан/метанол 9 1) і му вакуумі Одержують 28,0г маслянистого Nодержують 1,0г зазначеної в заголовку неочищеної ВОС-г\Г-(2-метокси)-бензил-1,2-діамшоетану, який сполуки, яка шляхом обробки НСІ-насиченим діебез обчищення використовують у подальших реатиловим ефіром переводять у прохлорид, кціях Тпл=138оС-140°С B) 5,0 г отриманого вище продукту розчиняють Вищеописані методи дозволяють одержувати в атмосфері азоту в 50мл THF В отриманий розтакож приведені в наступній таблиці 3 сполуки чин добавляють 20мл 1н водяного розчину їдкого формули І натру Охолоджуючи льодом, до отриманої реакційної суміші одночасно по краплях додають бенТаблиця З зиловий ефір хлормуршиної кислоти і 1н водяного розчину їдкого натру (усього 3,05г) так, щоб рН не Приклад № R1 R^ R^ знижувався нижче значення 10 По закінченні до2 Н СНз ОСНз давання зазначених реагентів суміш перемішують ИЗ Н F Н протягом ночі при кімнатній температурі Після цього добавляють 150мл метил-трет-бутилового 17 60300 18 Приклад 1 Желатин (у вигляді 10%-ого розчину) бмг Одержання таблеток, що містять (2R)-1-[3,5Діюча речовина, кукурудзяний крохмаль і мобіс(трифторметил)бензоіл]-2-(1Н-шдол-3-ілметил)лочний цукор згущають за допомогою 10%-ого 4-{2-[І\І-(2-метоксибензил)аміно розчину желатину Пасту подрібнюють і отриманий етил}амшокарбоніл)піперазин гранулят поміщають на відповідне металеве сито і Одержують таблетки такого складу на одну сушать при 45°С Висушений гранулят направлятаблетку ють у машину, що подрібнює, і змішують у змішувачі з зазначеними нижче допоміжними речовинабіс(трифторметил)бензоіл]-2-(1Нми індол-3-ілметил)-4-{2-[І\І-(2метоксибензил)-амшоетил]Тальк 5мг амінокарбоСтеарат магнію 5мг ніл}піперазинпдрохлорид Кукурудзяний крохмаль 9мг 20мг Кукурудзяний крохмаль і потім пресують у таблетки вагою 240мг 60мг Молочний цукор 135мг Комп'ютерна верстка О Воробей Підписне Тираж39 прим Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, Львівська площа, 8, м Київ, МСП, 04655, Україна ДП "Український інститут промислової власності", вул Сім'ї Хохлових, 15, м Київ, 04119