4-(2-бутиламіно)-2,7-диметил-8-(2-метил-6-метоксипірид-3-ил) піразоло-[1,5-a]-1,3,5-триазин, його енантіомери і фармацевтично придатні солі як ліганди рецепторів рилізинг-фактора кортикотропіну

1. Сполука формули (І): 2 (19) 1 3 74634 4 чена міткою, що виявляється, і потенційного ліганконтакту сполуки за п.1 з розчином, що включає ду; і клітини, які експресують рецептор CRF1, причому b) визначення здатності вказаного потенційного сполука присутня в розчині в концентрації, достатліганду замістити вказану мічену сполуку. ній для інгібування зв'язування CRF з рецептором 15. Спосіб виявлення рецепторів CRF в тканині, CRF-1. при якому здійснюють: 17. Виріб, що містить: a) забезпечення контакту сполуки за п.1, яка мічеa) пакувальний матеріал; на міткою, що виявляється, з тканиною при умоb) сполуку за п. 1;і вах, які забезпечують можливість зв'язування споc) етикетку або вкладиш упаковки, що міститься луки з тканиною; і всередині вказаного пакувального матеріалу і вкаb) виявлення міченої сполуки, зв'язаної з тканизує, що дана сполука ефективна для лікування ною. тривоги або депресії. 16. Спосіб інгібування зв'язування CRF з рецептором CRF-1, при якому здійснюють забезпечення Даний винахід відноситься до лікування психіатричних розладів і неврологічних захворювань, включаючи велику депресію, розлади, пов'язані з тривогою, посттравматичний стресовий розлад, супрануклеарний параліч і розлади харчування, а також до лікування імунологічних, серцевосудинних або пов'язаних з серцем захворювань і гіперчутливості товстої кишки, пов'язаної з психопатологічними порушеннями і стресом, шляхом введення 4-(2-бутиламіно)-2,7-диметил-8-(2метил-6-метоксипірид-3-іл)піразоло-[1,5-а]-1,3,5триазину, його енантіомерів і фармацевтично прийнятних солей як ліганду рецепторів рилізінгфактора кортикотропіну. Рилізінг-фактор кортикотропіну (який називається тут CRF), пептид з 41 амінокислоти, являє собою первинний фізіологічний регулятор секреції пептидів, похідних проопіомеланокортину (РОМС), з переднього гіпофіза [J.Rivier et al., Рrос. Nat. Acad. Sei. (USA) 80:4851 (1983); W.Vale et al., Science 213:1394 (1981)]. У доповнення до його ендокринної ролі на рівні гіпофіза, імуногістохімічне визначення локалізації CRF показало, що гормон має широкий розподіл поза гіпоталамусом в центральній нервовій системі і продукує широкий спектр вегетативних, електрофізіологічних і поведінкових ефектів, що узгоджуються з роллю нейромедіатору або нейромодулятору в головному мозку [W.Vale et al., Rec. Prog. Ніг. Res. 39:245 (1983); G.F.Koob, Persp. Behav. Med. 2:39 (1985); E.B.De Souza et al., J. Neurosci, 5:3189 (1985)]. Існують також докази того, що CRF грає істотну роль в інтегруванні реакції імунної системи на фізіологічні, психологічні і імунологічні стресори [J.E.Blalock, Physiological Reviews 69:1 (1989); J.E.Morley, Life Sci. 41:527 (1987)]. Клінічні дані надають докази того, що CRF грає роль при психіатричних розладах і неврологічних захворюваннях, включаючи депресію, розлади, пов'язані з тривогою, і розлади харчування. Сверджувалося також, що CRF грає роль в етіології і патофізіології хвороби Альцгеймера, хвороби Паркінсона, хвороби Хантінгтона, супрануклеарному паралічі, що прогресує, і бічному аміотрофічному склерозі, оскільки вони відносяться до дисфункції CRF нейронів в центральній нервовій системі [огляд див. в публікації E.B De Souza, Hosp. Practice 23:59 (1988)]. При афективному розладі або великій депресії концентрація CRF значно збільшується в спинномозковій рідині (CSF) у осіб, що не приймають лікарські препарати [C.B.Nemeroff et al., Science 226:1342 (1984); C.M.Banki et al., Am. J. Psychiatry 144:873 (1987); R.D.France et al., Biol. Psychiatry 28:86 (1988); M.Arato et al., Biol. Psychiatry 25:355 (1989)]. Більше того, щільність рецепторів CRF значно знижується в лобовій корі жертв суїциду, що узгоджується з гіперсекрецією CRF [C.B.Nemeroff et al., Arch. Gen. Psychiatry 45:577 (1988)]. Крім того, є притуплена реакція адренокортикотропіну (АСТН) на CRF (введений внутрішньовенно), що спостерігалася у пацієнтів з депресією [P.W.Gold et al., Am. J. Psychiatry 141:619 (1984); F.Holsboer et al., Psychoneuroendocrinology 9:147 (1984); P.W.Gold et al., New Eng. J. Med. 314:1129 (1986)]. Доклінічні дослідження у щурів і не людиноподібних мавп надають додаткове підтвердження гіпотези про те, що гіперсекреція CRF може бути залучена до симптомів, що спостерігаються при депресії у людей [R.M.Sapolsky, Arch. Gen. Psychiatry 46:1047 (1989)]. Є попередній доказ того, що трициклічні антидепресанти можуть змінити рівні CRF і, таким чином, модулювати кількості рецепторів CRF в головному мозку [Grigoriadis et al., Neuropsychopharmacology 2:53 (1989)]. Стверджувалося також, що CRF грає роль в етіології пов'язаних з тривогою розладів. CRF викликає анксіогенні ефекти у тварин, і взаємодії між бензодіазепіном/не бензодіазепіновими анксіолітиками і CRF були продемонстровані на різноманітних поведінкових моделях тривоги [D.R. Britton et al., Life Sei. 31:363 (1982); C.W.Berridge and A.J.Dunn Regul. Peptides 16:83 (1986)]. Попередні дослідження з використанням передбачуваного антагоніста рецепторів CRF α-спірального бичачого CRF (9-41) на різноманітності поведінкових парадигм показують, що антагоніст викликає «подібні до анксіолітичних» ефекти, які якісно аналогічні бензодіазепінам [C.W.Berridge and A.J.Dunn Horm. Behav. 21:393 (1987), Brain Research Reviews 15:71 (1990)]. Нейрохімічні, ендокринні дослідження і вивчення зв'язування з рецепторами продемонстру 5 74634 6 вали взаємодії між CRF і бензодіазепіновими анккишкову непрохідність і гіперчутливість товстої сіолітиками, надаючи ще один доказ залучення кишки, пов'язану з психопатологічним порушенням CRF до даних розладів. Хлордіазепоксид послабі стресом [огляд див. в публікаціях J.R.McCarthy, лює «анксіогенні» ефекти CRF і в тесті конфлікту S.C. Heinriches and D.E.Grigoriadis, Curr. Pharm. [K.T.Britton et al., Psychopharmacology 86:170 Res., 5, 289-316 (1999); P.J.Gilligan, D.W.Robertson (1985); K.T.Britton et al., Psychopharmacology and R.Zaczek, J. Medicinal Chem., 43, 1641-1660 94:306 (1988)] і в тесті акустичного переляку (2000), G.P.Chrousos, Int. J. Obesity, 24, Suppl. 2, [N.R.Swerdlow et al., Psychopharmacology 88:147 S50-S55 (2000); E.Webster, DJ.Torpy, I.J.Elenkov, (1986)] у щурів. Антагоніст безодіазепінових рецеG.P.Chousos, Ann. N.Y. Acad. Sci., 840, 21-32 пторів (Ro15-1788), який окремо не виявляв пове(1998); DJ.Newport and C.B.Nemeroff, Curr. Opin. дінкової активності при тесті конфлікту дії, усував Neurobiology 10, 211-218 (2000); G.Mastorakos and ефекти CRF залежним від дози чином, в той час як I.Ilias, Ann. N.Y. Acad. Sei., 900, 95-106 (2000); зворотний агоніст бензодіазепіну (FG7142) посиM.J.Owens and C.B.Nemeroff, Expert Opin. Invest. лював дію CRF [K.T. Britton et al., Drugs, 8, 1849-1858 (1999); G.F.Koob, Ann. N.Y. Psychopharmacology 94:306 (1988)]. Acad. Sei., 909,170-185 (2000)]. Механізми і ділянки дії, за допомогою яких У кожній з наступних публікацій описані сполустандартні анксіолітики і антидепресанти надають ки, антагоністи CRF; однак в жодному з них не свої терапевтичні ефекти, ще мають бути з'ясоварозкриті сполуки, представлені в даному описі: ні. Однак, висловлювалася гіпотеза, що вони беWO95/10506; WO99/51608; WO97/35539; руть участь в придушенні гіперсекреції CRF, яка WO99/01439; WO97/44308; WO97/35846; спостерігається при вказаних розладах. ОсоблиWO98/03510; WO99/11643; PCT/US99/18707; вий інтерес представляє те, що попередні досліWO99/01454 і WO00/01675. дження з вивчення ефектів антагоніста рецепторів Відповідно до одного аспекту, даний винахід CRF (α-спірального CRF9-41) при різноманітних відноситься до нової сполуки, фармацевтичної поведінкових парадигмах показали, що антагоніст композиції і способів, які можуть застосовуватися CRF викликає «подібні до анксіолітичних» ефекти, при лікуванні афективного розладу, тривоги, деякі якісно аналогічні бензодіазепінам [огляд див. в пресії, синдрому роздратованого кишечнику, постпублікаціях G.F.Koob and K.T.Britton, In: травматичного стресового розладу, супрануклеарCorticotropin-Releasing Factor: Basic and Clinical ного паралічу, придушення імунітету, хвороби Studies of a Neuropeptide, E.B. De Souza and Альцгеймера, шлунково-кишкових захворювань, C.B.Nemeroff eds., CRC Press p221 (1990)]. невротичної анорексії або іншого розладу спожиДалі стверджувалося, що CRF грає роль при вання їжі, симптомів наркотичної або алкогольної серцево-судинних або пов'язаних з серцем захвоабстиненції, наркоманії, запальних розладів, порюваннях, а також при шлунково-кишкових розларушень фертильності, розладів, лікування яких дах, виникаючих внаслідок стресу, таких як гіперможна здійснити або полегшити шляхом антагонітонія, тахікардія і застійна серцева недостатність, зму у відношенні CRF, включаючи без обмеження інсульт, синдром роздратованого кишечнику, пісрозлади, виникнення яких викликає або якому ляопераційна кишкова непрохідність і гіперчутлисприяє CRF, або розлад, вибраний із запальних вість товстої кишки, пов'язана з психопатологічним розладів, таких як ревматоїдний артрит і остеоарпорушенням і стресом [огляд див. в публікаціях трит, біль, астма, псоріаз і різні алергії; генераліG.F.Koob and K.T.Britton, In: Corticotropin-Releasing зований тривожний розлад; панічний, пов'язаний з Factor: Basic and Clinical Studies of a Neuropeptide, фобіями, нав'язливо-компульсивний розлад; постE.B. De Souza and C.B.Nemeroff eds., CRC Press травматичний стресовий розлад; розлади сну, p221 (1990) і CMaillot, M.Million, J.Y.Wei, A.Gauthier, викликані стресом; сприйняття болю, таке як фібY.Tache, Gastroenterology, 119, 1569-1579 (2000)]. роміалгія; розлади настрою, такі як депресія, Надмірна експресія або недостатня експресія включаючи велику депресію, одиничні епізоди деCRF були запропоновані як основна причина депресії, рецидивуючу депресію, депресію, викликаяких медичних розладів. Такі виліковні розлади ну жорстоким поводженням з дітьми і післяпологовключають, наприклад, без обмеження: афективву депресію; дистемію; біполярні розлади; ний розлад, тривогу, депресію, головний біль, синциклотимію; синдром втоми; викликаний стресом дром роздратованого кишечнику, посттравматичголовний біль; рак, інфекції вірусом імунодефіциту ний стресовий розлад, супрануклеарний параліч, людини (ВІЛ); нейродегенеративні захворювання, придушення імунітету, хворобу Альцгеймера, такі як хвороба Альцгеймера, хвороба Паркінсона і шлунково-кишкові захворювання, невротичну анохвороба Хантінгтона; шлунково-кишкові захворюрексію або інші розлади харчування, наркоманію, вання, такі як виразки, синдром подразненого кисимптоми лікарської або алкогольної абстиненції, шечнику, хвороба Крона, спастичний коліт, діарея і запальні захворювання, серцево-судинні або попіслеопераційна кишкова непрохідність і гіперчутв'язані з серцем захворювання, проблеми фертиливість товстої кишки, пов'язана з психопатологічльності, інфекції вірусом імунодефіциту людини, ними порушеннями або стресом; розлади спожигеморагічний стрес, ожиріння, безпліддя, травми вання їжі, такі як анорексія і невротична булімія; голови і спинного мозку, епілепсію, інсульт, виразгеморагічний стрес; психотичні епізоди, викликані ки, бічний аміотрофічний склероз, гіпоглікемію, стресом; синдром еутиреоїдної хвороби; синдром гіпертонію, тахікардію і застійну серцеву недостатнеадекватного вироблення антидіуретичного горність, інсульт, остеопороз, передчасні роди, псимону (ADH); ожиріння; безпліддя; травми голови; хосоціальну карликовість, викликану стресом литравми спинного мозку, ішемічне пошкодження хоманку, виразку, діарею, післяопераційну нейронів (наприклад, церебральна ішемія, така як 7 74634 8 церебральна ішемія гіпокампа); ексцитотоксичне Інший варіант здійснення винаходу відноситьпошкодження нейронів; епілепсія; серцево-судинні ся до застосування сполук згідно з даним винахоі пов'язані з серцем розлади, включаючи гіпертодом (зокрема, мічених сполук даного винаходу) як нію, тахікардію і застійну серцеву недостатність; зондів для визначення локалізації рецепторів в інсульт, імунну дисфункцію, включаючи імунну клітинах і тканинах і як стандартів і реагентів для дисфункцію, викликану стресом (наприклад, визастосування при визначенні характеристик зв'якликані стресом лихоманки, стресовий синдром зування з рецепторами сполук, що тестуються. свиней, лихоманку, пов'язану з транспортуванням Мічені сполуки згідно з даним винаходом можна корів, кінську пароксизмальну фібріляцію і дисфузастосовувати для досліджень in vitro, таких як нкції, викликані іммобілізацією в обмеженому проавторадіографія зрізів тканин, або для способів in сторі у курей, стрес у овець, що відбилися від отаvivo, наприклад, емісійного позитронного томори, або стрес у собак, пов'язаний з взаємодією між графічного (PET) або однофотонного емісійного людьми і тваринами); м'язові спазми; невтримання комп'ютерного томографічного (SPEGT) сканувансечі; старечу деменцію типу Альцгеймера; демення. Зокрема, переважні сполуки згідно з даним цію, пов'язану з множиною інфарктів мозку; бічний винаходом можна застосовувати як стандарти і аміотрофічний склероз; залежність від хімічних реагенти при визначенні здатності потенційного речовин і наркоманію (наприклад, залежність від фармацевтичного засобу зв'язуватися з рецептоалкоголю, кокаїну, героїну, бензодіазепінів або ром CFR1. інших препаратів); симптоми наркотичної і алкого[1] У першому варіанті здійснення, даний вильної абстиненції; остеопороз; психосоціальну нахід відноситься до сполуки формули (І): карликовість і гіпоглікемію у ссавця. Даний винахід відноситься до нової сполуки, яка зв'язується з рецепторами рилізінг-фактора кортикотропіну, за допомогою цього змінюючи анксіогенні ефекти секреції CRF. Сполуку згідно з даним винаходом можна застосовувати для лікування психіатричних розладів і неврологічних захворювань, розладів, пов'язаних з тривогою, посттравматичного стресового розладу, супрануклеарного паралічу і розладів споживання їжі, а також для лікування імунологічних, серцевосудинних або захворювань, що відносяться до серця, і гіперчутливості товстої кишки, пов'язаної з і її стереоізомерних форм або сумішей її степсихопатологічним порушенням і стресом у ссавреоізомерних форм і її фармацевтично прийнятця. них солей або пролікарських форм. Відповідно до іншого аспекту, даний винахід [2] В іншому варіанті здійснення даний винахід відноситься до нової сполуки формули (І) (описавідноситься до сполуки варіанту здійснення [1], її ної нижче), яку можна застосовувати як антагоніст ізомерів, її стереоізомерних форм, сумішей її стерилізінг-фактора кортикотропіну. Сполука даного реоізомерних форм, її фармацевтично прийнятних винаходу виявляє активність як антагоніст рилізінгпроліків або її фармацевтично прийнятних сольофактора кортикотропіну і, як виявляється, придувих форм, причому вказана сполука являє собою шує гіперсекрецію CRF. Даний винахід також 4-((R)-2-бутиламіно)-2,7-диметил-8-(2-метил-6включає фармацевтичні композиції, що містять метоксипірид-3-іл)[1,5-а]-піразоло-1,3,5-триазин вказану сполуку формули (І), і способи застосуабо 4-((S)-2-бутиламіно)-2,7-диметил-8-(2-метил-6вання цієї сполуки для придушення гіперсекреції метоксипірид-3-іл)[1,5-а]-піразоло-1,3,5-триазин. CRF і/або лікування анксіогенних розладів. [3] В іншому варіанті здійснення, даний винаВикористання аналізів конкурентного зв'язухід відноситься до сполуки будь-якого з варіантів вання вважається особливо цінним для скринінгу здійснення [1] і [2], її фармацевтично прийнятних претендентів на нові препарати, наприклад, для проліків або її фармацевтично прийнятних сольоідентифікації нових лігандів CRF або інших сполук, вих форм, причому у вказаній сполуці по суті відщо мають навіть більшу або більш вибіркову афінсутній її (S) стереоізомер. ність зв'язування з рецепторами CRF, і тому вка[4] В іншому варіанті здійснення даний винахід зані кандидати могли б потенційно застосовувативідноситься до сполуки варіанту здійснення [1], ся як лікарські препарати. При аналізі визначають причому вказана сполука являє собою 4-(2здатність потенційного ліганду заміняти мічену бутиламіно)-2,7-диметил-8-(2-метил-6сполуку. метоксипірид-3-іл) [1,5-а]піразоло-1,3,5-триазин. Тому інший варіант здійснення винаходу [5] В іншому варіанті здійснення даний винахід включає застосування сполуки згідно з винаходом відноситься до сполуки варіанту здійснення [1], в аналізі зв'язування, при якому одна або більше причому вказана сполука являє собою 4-((R)-2сполук можуть бути приєднані до мітки, причому бутиламіно)-2,7-диметил-8-(2-метил-6мітка може безпосередньо або непрямо надавати метоксипірид-3-іл)[1,5-а]піразоло-1,3,5-триазин. сигнал, що виявляється. Різні мітки включають [6] Фармацевтична композиція, що містить радіоізотопи, флуоресцентні речовини, хемолюміфармацевтично прийнятний носій і терапевтично несцентні речовини, молекули специфічного зв'яефективну кількість будь-якої сполуки з варіантів зування, частки, наприклад магнітні частки, і до здійснення [1]-[5]. них подібні. 9 74634 10 [7] В іншому варіанті здійснення даний винахід головного болю, синдрому подразненого кишечнивідноситься до способу антагоністичного впливу ку, посттравматичного стресового розладу, супрана рецептор CRF у ссавця, що включає введення нуклеарного паралічу, придушення імунітету, хвоссавцеві терапевтично ефективної кількості будьроби Альцгеймера, шлунково-кишкових якої сполуки з варіантів здійснення [1]-[5]. захворювань, невротичної анорексії або інших [8] В іншому варіанті здійснення даний винахід розладів споживання їжі, наркоманії, симптомів відноситься до способу лікування розладу, що лікарської або алкогольної абстиненції, запальних виявляється гіперсекрецією CRF у теплокровної захворювань, серцево-судинних або захворювань, тварини, який включає введення тварині терапевщо відносяться до серця, проблем фертильності, тично ефективної кількості будь-якої сполуки з інфекцій вірусом імунодефіциту людини, геморагіваріантів здійснення [1]-[5]. чного стресу, ожиріння, безпліддя, травм голови і [9] В іншому варіанті здійснення даний винахід спинного мозку, епілепсії, інсульту, виразок, бічновідноситься до способу лікування розладу, лікуго аміотрофічного склерозу, гіпоглікемії або розвання якого можна здійснити або полегшити анталаду, лікування якого можна здійснити або полеггоністичним впливом на CRF, який включає ввешити шляхом антагонізму у відношенні CRF, дення ссавцеві терапевтично ефективної кількості включаючи, але не обмежуючись цим, розлади, будь-якої сполуки з варіантів здійснення [1]-[5]. виникнення яких викликає або якому сприяє CRF, [10] В іншому варіанті здійснення даний винау ссавця, що включає введення ссавцеві терапевхід відноситься до способу антагоністичного вплитично ефективної кількості будь-якої сполуки з ву на рецептор CRF у ссавця, який включає ввеваріантів здійснення [1]-[5]. дення ссавцеві терапевтично ефективної кількості Визначення будь-якої сполуки з варіантів здійснення [1]-[5]. Термін, що використовується тут, "фармацев[11] В іншому варіанті здійснення даний винатично прийнятні солі" відноситься до солей, одерхід відноситься до способу лікування тривоги або жаних з фармацевтично прийнятних нетоксичних депресії у ссавця, який включає введення ссавцеві кислот, що включають неорганічні кислоти і оргатерапевтично ефективної кількості будь-якої спонічні кислоти. Відповідні нетоксичні кислоти вклюлуки з варіантів здійснення [1]-[5]. чають неорганічні кислоти і органічні кислоти ос[12] В іншому варіанті здійснення даний винановних залишків, таких як аміни, наприклад хід відноситься до способу скринінгу для виявленоцтову, бензолсульфонову, бензойну, амфорсуня лігандів рецепторів CRF, причому спосіб вклюльфонову, лимонну, етолсульфонову, фумарову, чає: глюконову, глютамінову, бромистоводневу, хлориa) проведення аналізу конкурентного зв'язустоводневу, ізетіонову, молочну, малеїнову, яблування з рецептором CRF кількості будь-якої сполучну, мигдалеву, метансульфонову, слизову, азотки з варіантів реалізації від [1] до [5], яка мічена ну, памоєву, пантотенову, фосфорну, янтарну, міткою, що виявляється, і потенційного ліганду; і сірчану, винну кислоту, п-толуолсульфонову і до b) визначення здатності вказаного потенційноних подібні; і лужні або органічні солі кислотних го ліганду замістити вказану мічену сполуку. залишків, таких як карбоксильні кислоти, напри[13] В іншому варіанті здійснення даний винаклад солі лужних і лужноземельних металів, одерхід відноситься до способу виявлення рецепторів жані з наступних основ: гідрид натрію, гідроокис CRF в тканині, що включає: натрію, гідроокис калію, гідроокис кальцію, гідрооa) забезпечення контакту будь-якої сполуки з кис алюмінію, гідроокис літію, гідроокис магнію, варіантів здійснення [1]-[5], яка мічена міткою, що гідроокис цинку, аміак, триметиламіак, триетилавиявляється, з тканиною при умовах, які забезпеміак, етилендіамін, н-метил-глюкамін, лізин, аргічують можливість зв'язування сполуки з тканиною; нін, орнітин, холін, Ν,Ν'-дибензилетилендіамін, і хлорпрокаїн, діетаноламін, прокаїн, нb) виявлення міченої сполуки, пов'язаної з бензилфенетиламін, діетиламін, піперазин, тканиною. трис(гідроксиметил)амінометан, гідроокис тетра[14] В іншому варіанті здійснення даний винаметиламонію і до них подібні. хід відноситься до способу інгібування зв'язування Фармацевтично прийнятні солі сполук згідно з CRF з рецептором CRF-1, що включає забезпеданим винаходом можна одержати шляхом взаєчення контакту будь-якої сполуки з варіантів здійсмодії вільних кислотних або основних форм даних нення [1]-[5] з розчином, що включає клітини, що сполук зі стехіометричною кількістю відповідної експресують рецептор CRF1, причому сполука основи або кислоти у воді або в органічному розприсутня в розчині в концентрації, достатній для чиннику, або в суміші їх обох; звичайно, переважні інгібування зв'язування CRF з рецептором CRF-1. неводні середовища, подібні до простого ефіру, [15] В іншому варіанті здійснення даний винаетилацетату, етанолу, ізопропанолу або ацетонітхід відноситься до виробу, що включає: рилу. Переліки відповідних солей можна знайти в a) пакувальний матеріал; керівництві Remington's Pharmaceutical Sciences, b) сполуку будь-якого з варіантів здійснення 17th ed., Mack Publishing Company, Easton, PA, [1]-[5] і 1985, p.1418, опис якого включений тут як посиc) етикетку або вкладиш упаковки, що міститьлання. ся всередині вказаного пакувального матеріалу і Термін, що використовується тут, "фармацеввказує на те, що дана сполука ефективна для лікутично прийнятні проліки" означає будь-які ковалевання тривоги або депресії. нтно пов'язані носії, які вивільняють родовий пре[16] Даний винахід також включає спосіб лікупарат формули (І) in vivo, коли такі проліки вводять вання афективного розладу, тривоги, депресії, ссавцеві суб'єкту. Проліки сполук формули (І), а 11 74634 12 також, якщо можливо, цвітеріонні форми сполук Термін "по суті без його (S) стереоізомера", що згідно з даним винаходом відомі фахівцям в даній використовується тут для опису сполуки, означає, області медицини, придатні для застосування в що сполука складається із значно більшої частки контакті з тканинами людей і тварин і мають рівень його (R) стереоізомера, ніж його оптичного антитоксичності, подразнення, алергічної реакції і тому пода (тобто його (S) стереоізомера). У переважподібного, сумірний з доцільним співвідношенням ному варіанті здійснення винаходу термін «по суті вигода/ризик, і є ефективними при їх передбачубез його (S) стереоізомера» означає, що сполука ваному застосуванні. Термін «проліки» означає складається, щонайменше, приблизно з 90% мас. сполуку, яка швидко трансформується in vivo з його (R) стереоізомера і приблизно з 10% мас. або одержанням родової сполуки формули (І), наприменше його (S) стереоізомера. клад, шляхом гідролізу в крові. Функціональні груУ більш переважному варіанті здійснення випи, які можуть бути швидко трансформовані метанаходу термін «по суті без його (S) стереоізомера» болічним розщепленням in vivo, утворюють клас означає, що сполука складається, щонайменше, груп, які вступають в реакцію з карбоксильною приблизно з 95% мас, його (R) стереоізомера і групою сполук даного винаходу. Вони включають приблизно з 5% мас. або менше його (S) стереоітакі групи як алканоїл (такий як ацетил, пропіоніл, зомера. У ще більш переважному варіанті здійсбутирил і подібні до них), незаміщений і заміщений нення винаходу термін «по суті без його (S) стереароїл (такий як бензоїл і заміщений бензоїл), алкооізомера» означає, що сполука складається, ксикарбоніл (такий як етоксикарбоніл), триалкілсищонайменше, приблизно з 99% мас. його (R) стеліл (такий як триметил- і триетилсиліл), складні реоізомера і приблизно з 1% мас. або менше його моноефіри, утворені з дикарбоксильними кисло(S) стереоізомера. В іншому переважному варіанті тами (такі як сукциніл) і подібні до них, але не обреалізації винаходу термін «по суті без його (S) межуються ними. У зв'язку з легкістю, з якою групи стереоізомера» означає, що сполука складається сполук, що метаболічно розщеплюються, які можмайже з 100% мас. його (R) стереоізомера. Вказана застосовувати відповідно до даного винаходу, ні вище процентні частки базуються на загальній розщеплюються in vivo, сполуки, що несуть такі кількості об'єднаних стереоізомерів сполуки. групи, діють як проліки. Сполуки, що несуть групи, Термін "терапевтично ефективна кількість" які метаболічно розщеплюються, мають ту перевасполуки даного винаходу означає кількість, ефекгу, що вони можуть виявити поліпшену біологічну тивну для протидії патологічному рівню CRF або доступність внаслідок посиленої розчинності і/або лікування симптомів афективного розладу, тривошвидкості всмоктування, додану родовій сполуці, ги або депресій у хазяїна. завдяки присутності групи, що метаболічно розТермін "мічена", що використовується тут, щеплюється. Детальне обговорення проліків назначить, що сполука або безпосередньо, або недане в наступних публікаціях: Design of Prodrugs, прямо мічена міткою, яка забезпечує сигнал, що H.Bundgaard, ed., Elsevier, 1985; Methods in виявляється, наприклад, радіоізотоп, флуоресціEnzymology, К.Widder et al., Ed., Academic Press, юючими речовинами, ферментом, антитілами, 42, p.309-396, 1985; Α Texbook of Drug Design and частками, такими як магнітні частки, хемілюмінесDevelopment, Krogsgaard-Larsen and H.Budgaard, центними речовинами, Р32, l131 і Аt211 і т.д. ed. Chapter 5; "Design and Application of Prodrugs" Способи синтезу p.l 13-191, 1991; Advanced Drug Delivery Reviews, Багато які органічні сполуки існують в оптично H.Bungaard, 8, p.1-38, 1992; Journal of активних формах, тобто вони володіють здатністю Pharmaceutical Sciences, 77, p.285, 1988; Chem. обертати площину поляризованого світла. При Pharm. Bull., N.Nakeya et al., 32, p.692, 1984; Proописі оптично активної сполуки префікса D і L або drugs as Novel Delivery Systems, T.Higuchi and R і S використовуються для позначення абсолютV.Stella, Vol.14 of the A.C.S. Symposium Series, and ної конфігурації молекули навколо її хірального Bioreversible Carriers in Drug Design, Edward центра (центрів). Префікси d і 1 або (+) і (-) викоB.Roche, ed., American Pharmaceutical Association ристовуються для позначення ознаки обертання and Pergamon Press, 1987, які включені сюди як плоскополяризованого світла сполукою, причому (посилання. ) або 1 означають, що сполука є лівообертальною. "Проліками" вважають будь-які ковалентно поСполука з префіксом (+) або d є правообертальв'язані носії, які вивільняють активний батьківський ною. Для даної хімічної структури дані сполуки, які препарат формули (І) in vivo, коли такі проліки називаються стереоізомерами, ідентичні, за винявводять ссавцеві. Проліки сполук формули (І) одетком того, що вони є дзеркальними зображеннями ржують модифікацією функціональних груп, присуодна одної. Конкретний стереоізомер може також тніх в сполуках, таким чином, що модифікації розіменуватися енантіомером, і суміш таких ізомерів щеплюються, або при звичайній маніпуляції, або in часто називається енантіомерна суміш. Суміш vivo, до родової сполуки. Проліки включають споенантіомерів 50:50 називають рацемічною сумішлуки, в яких гідроксильна, аміно або сульфгідришю. льна групи пов'язані з будь-якою групою, яка при Даний винахід включає всі стереоізомерні фовведенні ссавцеві суб'єкту відщеплюється з утворми сполук формули І. Центри асиметрії, які приренням, відповідно, вільної гідроксильної, аміно сутні в сполуках формули І, можуть всі незалежно або сульфгідрильної групи. Приклади проліків один від одного мати S конфігурацію або R конфівключають ацетатні, форміатні і бензоатні похідні гурацію. Префікси d і 1 або (+) і (-) використовуспиртових і аміно функціональних груп в сполуках ються для позначення ознаки обертання плоскоформули (І) і тому подібне, але не обмежуються поляризованого світла сполукою, причому (-) або І ними. означають, що сполука є лівообертальною. Сполу 13 74634 14 ка з префіксом (+) або d є правообертальною. Висобами, наприклад хроматографією або кристалінахід включає всі можливі енантіомери і діастерезацією, використанням стереохімічно однорідних омери і суміші двох або більше стереоізомерів, початкових матеріалів для синтезу або стереовинаприклад суміші енантіомерів і/або діастереомебірковим синтезом. Необов'язково дериватизацію рів у всіх співвідношеннях. Таким чином, енантіоможна проводити перед розділенням стереоізомемери є предметом винаходу в енантіомерно чистій рів. Розділення суміші стереоізомерів можна проформі і у вигляді лівообертальних, і у вигляді правести на стадії сполук формули І або на стадії вообертальних антиподів, у вигляді рацематів і у проміжної сполуки під час синтезу. Даний винахід вигляді сумішей двох енантіомерів у всіх співвідтакож включає всі таутомерні форми сполук форношеннях. У випадку цис/транс-ізомерії винахід мули (І). включає і цис-форму, і транс-форму, а також суСполуки формули (І) можна одержати внасліміші даних форм у всіх співвідношеннях. Одердок використання методів, представлених на схемі жання окремих стереоізомерів можна провести 1. при бажанні розділенням суміші звичайними спо 15 Сполуку формули (II), де X=F, можна обробити алкоксидом металу (наприклад, метоксидом натрію, метоксидом калію; попередньо утвореним або утвореним in situ) в інертному розчиннику з одержанням проміжної сполуки формули (III). Інертні розчинники можуть включати, але не обмежуються ними, алкілові спирти (1-8 атомів вуглецю, переважно метанол або етанол), нижчі алканнітрили (1-6 атомів вуглецю, переважно ацетонітрил), воду, прості діалкілові ефіри (переважно простий діетиловий ефір), простий циклічний ефір (переважно тетрагідрофуран або 1,4-діоксан), Ν,Νдіалкілформаміди (переважно диметилформамід), Ν,Ν-діалкілацетаміди (переважно, диметилацетамід), циклічні аміди (переважно, №метилпіролідин2-он), діалкілсульфоксиди (переважно, диметилсульфоксид) або ароматичні вуглеводні (переважно, бензол або толуол). Переважна температура реакції знаходиться в діапазоні від 0°С до 100°С. Альтернативно, сполуку формули (II), де Х=ОН, можна обробити алкілуючим агентом в присутності основи в інертному розчиннику з утворенням проміжного продукту формули (III). Алкілуючі агенти включають, але не обмежуються ними, галогеналкани (наприклад, СН3І), діалкілсульфати (наприклад, Me2SO4) або алкілтрифторсульфонати (наприклад, CH3O3SCF3). Основи можуть включати, але не обмежуються ними, лужні метали, гідриди лужних металів (переважно, гідрид натрію), алкоксиди лужних металів (1-6 атомів вуглецю) (переважно, метоксид натрію або етоксид натрію), гідриди лужноземельних металів, карбонати металів лугів, карбонати лужних металів, карбонати перехідних металів (наприклад, карбонат срібла), діалкіламіди лужних металів (переважно, діізопропіламід літію), бікарбонати лужних металів, гідроксиди лужних металів, біс(триалкілсиліл)аміди лужних металів (переважно, біс(триалкілсиліл)амід натрію), триалкіламіни (переважно, N,N-діізопропіл-Nетиламін) або ароматичні аміни (переважно, піридин). Інертні розчинники можуть включати, але не обмежуються ними, галогензаміщені вуглеводні (18 атомів вуглецю, 1-8 атомів галогену), нижчі алканнітрили (1-6 атомів вуглецю, переважно, ацетонітрил), воду, прості діалкілові ефіри (переважно, прості діетилові ефіри), прості циклічні ефіри (переважно тетрагідрофуран або 1,4-діоксан), Ν,Νдіалкілформаміди (переважно, диметилформамід), Ν,Ν-діалкілацетаміди (переважно, диметилацетамід), циклічні аміди (переважно, №метилпіролідин2-он), діалкілсульфоксиди (переважно, диметилсульфоксид) або ароматичні вуглеводні (переважно, бензол або толуол). Переважна температура реакції знаходиться в діапазоні від 50°С до 150°С. Сполуку формули (III) можна трансформувати в сполуку формули (IV) взаємодією з бромуючим агентом в інертному розчиннику в присутності або за відсутності домішки. Бромуючі агенти включають, але цим не обмежуються, N-бромсукцинімід2,2'-азобісізобутиронітрил (AIBN)), бром. Домішки включають, але цим не обмежуються, фосфати лужних металів (наприклад, К3РО4, Na3PO4), гід 74634 16 рофосфати лужних металів (наприклад, Na2HPO4, K2HPO4), дигідрофосфати лужних металів (наприклад, NaH2PO4, KH2PO4). Інертні розчинники включають, але цим не обмежуються, галогензаміщені вуглеводні (1-6 атомів вуглецю, 1-6 атомів галогену, переважно хлор), воду, Ν,Ν-діалкілформаміди (переважно, диметилформамід), Ν,Νдіалкілацетаміди (переважно, диметилацетамід), циклічні аміди (переважно, N-метилпіролідин-2он). Температура реакції знаходиться в діапазоні від 0°С до 200°С (переважно, від 20°С до 120°С). Сполуку формули (IV) можна перетворити в сполуку формули (V) послідовною реакцією з (1) алкіллітієм в інертному розчиннику при температурі в діапазоні від -100°С до 50°С; (2) сполукою формули B(ORa)3 (де Ra являє собою розгалужений або прямоланцюговий алкіл з 1-20 атомів вуглецю) при температурі в діапазоні від -100°С до 50°С і (3) кислотою в присутності або за відсутності води при температурі в діапазоні від -100°С до 100°С. Алкіллітій може являти собою розгалужену або прямоланцюгову сполуку, що містить 1-20 атомів вуглецю. Інертні розчинники включають, але цим не обмежуються, прості діалкілові ефіри (переважно, простий діетиловий ефір), прості циклічні ефіри (переважно, тетрагідрофуран або 1,4діоксан) або ароматичні вуглеводні (переважно, бензол або толуол). Кислоти можуть включати, але цим не обмежуються, алканові кислоти з 2-10 атомів вуглецю (переважно, оцтову кислоту), галогеналканові кислоти (2-10 атомів вуглецю, 1-10 атомів галогену, такі як трифтороцтова кислота), арилсульфонові кислоти (переважно, п-толуолсульфонова кислота або бензолсульфонова кислота), алкансульфонові кислоти з 1-10 атомів вуглецю (переважно, метансульфонова кислота), хлористоводневу кислоту, сірчану кислоту або фосфорну кислоту. Сполуку формули (VII) можна одержати взаємодією сполуки формули (V) із сполукою формули (VI) в присутності комплексу солі паладію або нікелю, основи і інертного розчинника. Комплекси паладію або нікелю включають, але цим не обмежуються, фосфінові комплекси, такі як Рd(РРh3)4, РdСІ2(РРh3)2, NiСІ2(РРh3)2, або [1,1біс(дифенілфосфіно)фероцен]дихлорпаладій. Основи можуть включати, але цим не обмежуються, лужні метали, гідриди лужних металів (переважно, гідрид натрію), алкоксиди лужних металів (1-6 атомів вуглецю) (переважно, метоксид натрію або етоксид натрію), карбонати лужних металів, карбонати лужноземельних металів (наприклад, карбонат барію), карбонати перехідних металів (наприклад, карбонат срібла) або триалкіламіни (наприклад, триетиламін). Інертні розчинники можуть включати, але цим не обмежуються, прості діалкілові ефіри (переважно, простий діетиловий ефір), прості циклічні ефіри (переважно, тетрагідрофуран або 1,4-діоксан) або ароматичні вуглеводні (переважно, бензол або толуол). Переважна температура реакції знаходиться в діапазоні від 100° С до 100°С. Проміжна сполука формули (VII) може вступати в реакцію з основою в присутності інертного розчинника з одержанням сполуки формули (VIII), 17 74634 18 де Μ являє собою катіон лужного металу (напривуглеводні з 1-6 атомів вуглецю і 1-6 атомів галоклад, натрію або калію). Основи можуть включати, гену (переважно, дихлоретан або хлороформ), але цим не обмежуються, гідроокиси лужних меалкілові спирти з 1-10 атомів вуглецю (переважно, талів (наприклад NaOH або КОН), алкоксиди лужетанол), прості діалкілові ефіри (4-12 атомів вугних металів (1-6 атомів вуглецю) (переважно, мелецю, переважно, простий діетиловий ефір або токсид натрію або етоксид натрію) або гідроксиди простий діізопропіловий ефір) або прості циклічні лужноземельних металів. Інертні розчинники моефіри, такі як діоксан або тетрагідрофуран. Пережуть включати, але цим не обмежуються, алкілові важна температура реакції знаходиться в діапазоспирти (1-6 атомів вуглецю), нижчі алканнітрили ні від 0°С до 100°С. (1-6 атомів вуглецю, переважно, ацетонітрил), воСполуку формули (X) можна перетворити в ду, прості циклічні ефіри (переважно, тетрагідропроміжну сполуку формули (XI) обробкою сполуфуран або 1,4-діоксан), Ν,Ν-діалкілформаміди кою C=O(Rd)2 (де Rd являє собою галоген (пере(переважно, диметилформамід), Ν,Νважно, хлор), алкокси (1-4 атомів вуглецю) або діалкілацетаміди (переважно, диметилацетамід), алкілтіо (1-4 атомів вуглецю)) в присутності або за циклічні аміди (переважно, Ν-метилпіролідин-2відсутності основи в інертному розчиннику при он), діалкіл сульфоксиди (переважно диметил сутемпературі реакції від -50°С до 200°С. Основи льфоксид). Переважна температура реакції знахоможуть включати, але цим не обмежуються, гідридиться в діапазоні від 0°С до 150°С. ди лужних металів (переважно, гідрид натрію), Сполуку формули (VIII) можна обробити гідраалкоксиди лужних металів (1-6 атомів вуглецю) зингідратом в присутності кислоти і інертного роз(переважно метоксид натрію або етоксид натрію), чинника при температурі в діапазоні від 0°С до карбонати лужних металів, гідроксиди лужних ме200°С, переважно від 70°С до 150°С, з одержанталів, триалкіламіни (переважно, Ν,Ν-діізопропілням сполук формули (IX). Кислоти можуть включаN-етиламін або триетиламін) або ароматичні аміни ти, але цим не обмежуються, алканові кислоти з 2(переважно, піридин). 10 атомів вуглецю (переважно, оцтова кислота), Інертні розчинники можуть включати, але цим галогеналканові кислоти (2-10 атомів вуглецю, 1не обмежуються, алкілові спирти (1-8 атомів вуг10 атомів галогену, такі як трифтороцтова кислолецю, переважно, метанол або етанол), нижчі алта), арилсульфонові кислоти (переважно, пканнітрили (1-6 атомів вуглецю, переважно, ацетолуолсульфонова кислота або бензолсульфонотонітрил), прості циклічні ефіри (переважно, ва кислота), алкансульфонові кислоти з 1-10 атотетрагідрофуран або 1,4-діоксан), Ν,Νмів вуглецю (переважно, метансульфонова кислодіалкілформаміди (переважно, диметилформамід), та), хлористоводневу кислоту, сірчану кислоту або Ν,Ν-діалкілацетаміди (переважно, диметилацетафосфорну кислоту. мід), циклічні аміди (переважно, N-метилпіролідинІнертні розчинники можуть включати, але цим 2-он), діалкілсульфоксиди (переважно, диметилне обмежуються, воду, алкілові спирти (1-8 атомів сульфоксид) або ароматичні вуглеводні (переважвуглецю, переважно, метанол або етанол), нижчі но, бензол або толуол). алканнітрили (1-6 атомів вуглецю, переважно, Сполуку формули (XI) можна обробити галоацетонітрил), прості циклічні ефіри (переважно, генуючим агентом в присутності або за відсутності тетрагідрофуран або 1,4-діоксан), Ν,Νоснови в присутності або за відсутності інертного діалкілформаміди (переважно, диметилформамід), розчинника при температурі реакції в діапазоні від Ν,Ν-діалкілацетаміди (переважно, диметилацета-80°С до 250°С з одержанням галогенованої промід), циклічні аміди (переважно, №метилпіролідинміжної сполуки (XII) (де X являє собою галоген). 2-он), діалкілсульфоксиди (переважно, диметилГалогенуючі агенти включають, але цим не обмесульфоксид) або ароматичні вуглеводні (переважжуються, SOCI2, POCI3, PCI3, PCI5, РОВr3, РВr3 або но, бензол або толуол). РВr5. Основи можуть включати, але цим не обмеСполука формули (IX) може вступати в реакжуються, триалкіламіни (переважно, N,Nцію із сполуками формули H3С (C=NH) ORc (де Rc діізопропіл-N-етиламін або триетиламін) або ароявляє собою алкіл (1-6 атомів вуглецю) в присутматичні аміни (переважно, N,N-діетиланілін). ності або за відсутності кислоти, в присутності інеІнертні розчинники можуть включати, але цим ртного розчинника при температурі в діапазоні від не обмежуються, Ν,Ν-діалкілформаміди (переваж0°С до 200°С з одержанням сполуки формули (X). но, диметилформамід), Ν,Ν-діалкілацетаміди (пеКислоти можуть включати, але цим не обмежуютьреважно, диметилацетамід), циклічні аміди (переся, алканові кислоти з 2-10 атомів вуглецю (переважно, N-метилпіролідин-2-он) або ароматичні важно оцтову кислоту), галоалканові кислоти (2-10 вуглеводні (переважно, бензол або толуол). Переатомів вуглецю, 1-10 атомів галогену, такі як триважна температура реакції знаходиться в діапазофтороцтова кислота), арилсульфонові кислоти ні від 20°С до 200°С. (переважно п-толуолсульфонову кислоту або бенСполука формули (XII) може вступати в реакзолсульфонову кислоту), алкансульфонові кислоцію з алкіламіном в присутності або за відсутності ти з 1-10 атомів вуглецю (переважно метансульоснови при температурі реакції в діапазоні від -80 фонову кислоту), хлористоводневу кислоту, до 250°С з утворенням сполук формули (І). Основи сірчану кислоту або фосфорну кислоту. Можна можуть включати, але цим не обмежуються, гідривикористати стехіометричні або каталітичні кількоди лужних металів (переважно, гідрид натрію), сті таких кислот. алкоксиди лужних металів (1-6 атомів вуглецю) Інертні розчинники можуть включати, але цим (переважно, метоксид натрію або етоксид натрію), не обмежуються, воду, алканнітрили (1-6 атомів гідриди лужноземельних металів, діалкіламіди вуглецю, переважно ацетонітрил), галогензаміщені лужних металів (переважно, діізопропіламід літію), 19 74634 20 карбонати лужних металів, бікарбонати лужних методів. Реєстрували протонні ЯМР спектри на металів, біс(триалкілсиліл)аміди лужних металів апаратах Varian VXR або Unity 300 FT-NMR (переважно, біс(триалкілсиліл)амід натрію, триал(300МГц); хімічні зсуви визначали в м.д. (δ) віднокіламіни (переважно, N,N-діізопропіл-N-етиламін) сно внутрішнього тетраметилсиланового стандарабо ароматичні аміни (переважно, піридин). ту в дейтерохлороформі або дейтеродиметилсуІнертні розчинники можуть включати, але цим льфоксиді, як визначено нижче. Мас-спектри (MS) не обмежуються, алкілові спирти (1-8 атомів вугабо мас-спектри високого розрізнення (HRMS) лецю, переважно, метанол або етанол), нижчі алреєстрували на спектрометрі Finnegan МАТ 8230 каннітрили (1-6 атомів вуглецю, переважно, ацеабо спектрометрі моделі Hewlett Packard 5988A (з тонітрил), прості діалкілові ефіри (переважно, використанням хіміоіонізації (СІ) з NH3 як газомпростий діетиловий ефір), прості циклічні ефіри носієм, електроаерозольного розпилювача (TSI), (переважно, тетрагідрофуран або 1,4-діоксан), хіміоіонізації при атмосферному тиску (АРСІ) або Ν,Ν-діалкілформаміди (переважно, диметилфоргазовій хроматографії (GC)). Точки плавлення ремамід), Ν,Ν-діалкілацетаміди (переважно, диметиєстрували на нагрівальному блоковому приладі лацетамід), циклічні аміди (переважно, ΝMelTemp 3.0 і не коригували. Точки кипіння не кометилпіролідин-2-он), діалкілсульфоксиди (переригували. Всі визначення pH під час розробки проважно, диметилсульфоксид), ароматичні вуглевоводили індикаторним папером. дні (переважно, бензол або толуол) або галогенаРеагенти були закуплені в комерційних джелкани з 1-10 атомів вуглецю і 1-10 атомів галогену релах і, при необхідності, були очищені перед ви(переважно, дихлоретан). Переважна температура користанням відповідно до загальних методів, реакції знаходиться в діапазоні від 0°С до 140°С. описаних D.Perrin and W.L.F.Armarego, Purification Сполуки згідно з даним винаходом можна of Laboratory Chemicals, 3rd ed., (New York: одержати у вигляді сполук з радіоактивною міткою Pergamon Press, 1988). Хроматографію виконувапроведенням їх синтезу з використанням попередли на силікагелі з використанням систем розчинників, що включають, щонайменше, один атом, ників, вказаних нижче. Для змішаних систем розякий є ізотопом. Радіоізотоп, переважно, вибирачинників дані об'ємні співвідношення. В іншому ють з, щонайменше, одного з атомів вуглецю (певипадку, частини і процентні частки дані по масі. реважно, 14С), водню (переважно, 3Н), сірки (переАбревіатурами, що звичайно використовуються є: важно 35S) або йоду (переважно, 125l). Такі мічені ДМФ (Ν,Ν-диметилформамід) EtOH (етанол), Мерадіоактивними ізотопами зонди зручно синтезуОН (метанол), EtOAc (етилацетат), НОАс (оцтова ються постачальником радіоізотопів, що спеціалікислота), DME (1,2-діетоксіетан) і ТГФ (тетрагідзується в синтезі на замовлення мічених радіоакрофуран). тивними ізотопами сполук-зондів. Такі Наступні приклади представлені для більш допостачальники включають фірми Amersham кладного опису винаходу. Дані приклади, які предCorporation, Arlington Heights, 111.; Cambridge ставляють кращий спосіб, що передбачається в Isotope Laboratories, Inc. Andover, Mass,; SRI цей час для здійснення винаходу, призначені для International, Menlo Park, Calif., Wizard Laboratories, ілюстрації, а не для обмеження винаходу. West Sacramento, Calif.; ChemSyn Laboratories, Приклад 1 Lexena, KS; American Radiolabeled Chemicals, Inc., Одержання 2,7-диметил-8-(2-метил-6St.Louis, Mo.; і Moravek Biochemicals Inc., Brea, метоксипірид-3-іл) [1,5-а]піразоло-[1,3,5]-триазинCalif. 4(3Н)-ону Мічені тритієм сполуки-зонди можна також A. 2-Метокси-6-метилпіридин зручно одержати каталітично за допомогою обміну Натрій (31,0г, 1,35моль) додавали порціями в міченої тритієм оцтової кислоти, що каталізується метанол (500мл) протягом 30хв. при перемішуванплатиною, обміну міченої тритієм трифтороцтової ні в колбі, обладнаній зворотним холодильником. кислоти, що каталізується кислотою або гетероПісля завершення додавання реакційній суміші генного каталізованого обміну з газоподібним тридавали можливість охолодитися до навколишньої тієм. Такі способи одержання також зручно провотемператури. Порціями додавали 2-фтор-6дять у вигляді радіоактивної мітки, що метилпіридин (50г, 450ммоль) при перемішуванні. проводиться на замовлення будь-яким постачальПотім реакційну суміш нагрівали до температури ником, перерахованим в попередніх абзацах, з флегми і перемішували протягом 48 годин. Суміш використанням сполуки винаходу як субстрату. потім охолоджували до навколишньої температури Крім того, деякі попередники можуть бути піддані і розчинник видаляли у вакуумі з одержанням жовобміну тритій-галоген газоподібним тритієм, віднотої олії. Залишок обробляли водою (500мл) і провленням газоподібним тритієм ненасичених зв'язводили три екстракції простим ефіром (200мл). ків або відновленням з використанням боротритиОб'єднані органічні шари сушили над MgSO4, фіду натрію, як бажано. льтрували і розчинник видаляли у вакуумі з фільтАвторадіографію рецепторів (картирування рату з одержанням жовтого рідкого продукту: 1Hрецепторів) можна проводити in vitro, як описано ЯМР (CDCI3, 300МГц): δ 7,44 (дд, 1Н, J=8,7), 6,71 Kuhar в розділі 8.1.1-8.1.9 публікації Current (д, 1Н, J=7), 6,53 (д, 1Н, J=8), 3,91 (с, 3Н), 2,45 (с, Protocols in Pharmacology (1998) John Wiley & 3Н). Sons, New York, з використанням сполук згідно з B. 2-Метокси-6-метилпіридин даним винаходом, мічених радіоактивною міткою. Суміш 2-гідрокси-6-метилпіридину (6,85г, Приклади 62,8ммоль), карбонату срібла (22,5г, 81,6ммоль), Дані аналізів реєстрували для сполук, описайодметану (39,1мл, 628ммоль) і хлороформу них нижче, у використанням наступних загальних (200мл) перемішували при кімнатній температурі 21 74634 22 протягом 40 годин в темряві. Реакційну суміш фі6,63 (д, 1H, J=8), 3,95 (с, 3Н), 2,35 (с, 6Н); АРСl+ льтрували через целіт. Зібрану тверду речовину мас-спектрометрія: 205 (М++Н). промивали простим ефіром. Об'єднані фільтрати F. 1-Ціан-1-(2-метил-6-метоксипірид-3концентрували у вакуумі з одержанням рідкого іл)пропан-2-он, натрієва сіль продукту (6,25г), який був ідентичний продукту зі Суміш метоксиду натрію (25% мас/мас, 13мл, стадії А. 70ммоль), 2-метил-3-(5-метилізоксазол-4-іл)-6С. 6-Метокси-3-бром-2-метилпіридин метоксипіридину (7,15г, 35ммоль) і метанолу Суміш 2-метокси-6-метилпіридину (17,0г, (50мл) перемішували при кімнатній температурі 138ммоль) і розчину дигідрофосфату натрію протягом 16 годин. Розчинник видаляли у вакуумі (0,15моль у воді, 250мл) перемішували при кімназ одержанням жовтої олії. Розтирання в простому тній температурі. Бром (7,1мл, 139ммоль) додаваефірі, фільтрація і сушіння у вакуумі давали нели по краплях протягом 15хв. через краплинну очищений продукт у вигляді білої твердої речовилійку. Реакційну суміш потім перемішували при ни (9,3г). кімнатній температурі протягом 4 годин. Прозорий G. 5-Аміно-4-(2-метил-6-метоксипірид-3-іл)-3безбарвний розчин розбавляли водою (500мл) і метилпіразол екстрагували дихлорметаном (200мл) три рази. Суміш 1-ціан-1-(2-метил-6-метоксипірид-3Об'єднані органічні шари сушили над MgSO4, фііл)пропан-2-ону натрієвої солі (9,3г), гідразингідральтрували і розчинник видаляли у вакуумі з фільтту (6мл, 123,3ммоль) і крижаної оцтової кислоти рату з одержанням жовтої рідини. Флеш(150мл) перемішували при кімнатній температурі хроматографія на силікагелі (ЕtOАс:гексан::1:20) і протягом 4 годин. Реакційну суміш концентрували видалення розчинника з бажаних об'єднаних фрау вакуумі. Залишок розчиняли в 1н НСl і одержакцій дали прозорий, безбарвний рідкий продукт ний в результаті розчин екстрагували ЕtOАс два (15,4г): 1H-ЯМР (CDCI3, 300МГц): δ 7,60 (д, 1Н, рази. У водний шар додавали 1н розчин NaOH до J=8), 6,46 (д, 1Н, J=8), 3,89 (с, 3Н), 2,54 (с, 3Н). досягнення рН=12. Одержаний напіврозчин екстD. 6-Метокси-2-метилпіридин-3-борна кислота рагували три рази етилацетатом. Об'єднані оргаРозчин 6-метокси-3-бром-2-метилпіридину нічні шари сушили над MgSO4 і фільтрували. Роз(59,8г, 296ммоль) в сухому ТГФ (429мл) охолочинник видаляли у вакуумі з одержанням в'язкої джували при перемішуванні до -78°С в атмосфері олії (5,8г): 1Н-ЯМР (CDCI3, 300МГц): 7,37 (д, 2Н, азоту. Розчин н-бутиллітію (2,5моль, 130,4мл, J=8), 6,62 (д, 2Н, J=8), 3,95 (с, 3Н), 2,36 (с, 3Н), 326ммоль) в гексані додавали по краплях протя2,08 (с, 3Н); АРСl+ - мас-спектрометрія: 219 гом 30хв. Реакційну суміш перемішували протягом (М++Н); 260 (M++CH3CN). 3 годин при -78°С. Додавали по краплях протягом Н. 5-Ацетамідино-4-(2-метил-6-метоксипірид30хв. розчин триізопропілборату (102,7мл, 3-іл)-3-метилпіразол, сіль оцтової кислоти 445ммоль) в сухому ТГФ (100мл). Реакційну суміш Етилацетамідатгідрохлорид (6,46г, 52,2ммоль) нагрівали до кімнатної температури при перемішушвидко додавали в суміш карбонату калію (6,95г, ванні протягом 16 годин. У реакційну суміш при 50,0моль), дихлорметану (60мл) і води (150мл), перемішуванні додавали оцтову кислоту (37,35г, що швидко перемішується. Шари розділяли і вод622ммоль), потім воду (110мл). Через 2 години ний шар екстрагували дихлорметаном (2x60мл). шари розділяли і органічний шар концентрували у Об'єднані органічні шари сушили над MgSO4 і фівакуумі. Залишок обробляли 2-пропанолом льтрували. Розчинник видаляли простою дистиля(750мл) і розчинник видаляли на роторному випацією і залишок в резервуарі використали без порнику (температура бані -50°С). Залишок розтирадальшого очищення. ли в простому ефірі. Продукт збирали фільтруванКрижану оцтову кислоту (1,0мл, 17,4ммоль) ням і сушили у вакуумі (48,4г): т.пл.>200°С; 1Ндодавали в суміш 5-аміно-4-(2-метил-6ЯМР (CDCI3, 300МГц): δ 7,83 (д, 1Н, J=8), 6,56 (д, метоксипірид-3-іл)-3-метилпіразолу (3,8г, 1Н, J=8), 3,85 (с, 3Н), 2,44 (с, 3Н); Газова хромато17,4ммоль), вільної основи етилацетаміду і дихлографія-мас-спектрометрія: 168 (М*+Н). рметану (100мл), що перемішується. Одержану E. 2-Метил-3-(5-метилізоксазол-4-іл)-6реакційну суміш перемішували при кімнатній темметоксипіридин пературі протягом 16 годин; в кінці цього періоду Суміш 4-йод-5-метилізоксазолу (18,2г, концентрували у вакуумі. Залишок розтирали в 87ммоль), 6-метокси-2-метилпіридин-3-борної кипростому ефірі, продукт фільтрували і промивали слоти (14,6г, 87ммоль), бікарбонату натрію (22,0г, великими кількостями простого ефіру. Білу тверду 262ммоль), води (150мл) і DME (150мл) дегазуваречовину сушили у вакуумі (5,4г): 1Н-ЯМР (CDCI3, ли три рази при перемішуванні подачею вакууму, а 300МГц): 7,43 (д, 2Н, J=8), 6,69 (д, 2Н, J=8), 4,9 потім введенням азоту. Однією порцією додавали (шир.с, 3Н), 3,93 (с, 3Н), 2,31 (с, 3Н), 2,24 (с, 3Н), [1,1-біс(дифенілфосфіно)фероцен]дихлорпаладій 2,13 (с, 3Н), 1,88 (с, 3Н); АРСl+ - мас(II) (2,14г, 2,6ммоль). Реакційну суміш дегазували, спектрометрія: 260 (М++Н). як указано вище. Реакційну суміш потім перемішуІ. 2,7-Диметил-8-(2-метил-6-метоксипірид-3-іл) вали при 80°С протягом 4 годин, потім охолоджу[1,5-а]-піразоло-[1,3,5]триазин-4(3Н)-он вали до кімнатної температури. Тричі екстракція Гранули натрію (3,9г, 169ммоль) додавали ЕtOАс, сушіння об'єднаних органічних шарів над порціями в етанол (200мл) при енергійному переMgSO4, фільтрація і видалення розчинника у вакумішуванні. Після вступу в реакцію всього натрію умі давали олію. Флеш-хроматографія (ЕtOАс текдодавали 5-ацетамідино-4-(2-метил-6сан::1:9) і видалення розчинника у вакуумі з бажаметоксипірид-3-іл)-3-метилпіразол, сіль оцтової них фракцій давали продукт (7,15г): 1H-ЯМР кислоти (5,4г, 16,9ммоль) і діетилкарбонат (CDCl3, 300МГц): δ 8,16 (с, 1Н), 7,33 (д, 1Н, J=8), (16,4мл, 135,3ммоль). Одержану реакційну суміш 23 74634 24 нагрівали до температури флегми і перемішували Криві інгібування зв'язування [125I-Tyr°]-o-CRF з протягом 18 годин. Суміш охолоджували до кімнаклітинними мембранами при різному розведенні тної температури і розчинник видаляли у вакуумі. препарату, що тестується, аналізували програмою Залишок розчиняли у воді і повільно додавали 1н повторюваного вирівнювання кривої LIGAND розчин НСl до досягнення рН-6. Водний шар екст[PJ.Munson and D.Rodbard, Anal. Biochem. 107:220 рагували EtOAc три рази; об'єднані органічні шари (1980), яка забезпечує одержання величин Кі для сушили над MgSO4 і фільтрували. Розчинник виінгібування, які потім використовуються для оцінки даляли у вакуумі з одержанням твердої речовини. біологічної активності. Розтирання в простому ефірі, фільтрація і сушіння Інгібування активності аденілатциклази, стиу вакуумі давали білу тверду речовину (3,9г): 1Нмульованої CRF ЯМР (CDCI3, 300МГц): 7,49 (д, 2Н, J=8), 6,69 (д, Інгібування активності аденілатциклази, сти2Н, J=8), 3,93 (с, 3Н), 2,35 (с, 3Н), 2,28 (с, 3Н), 2,24 мульованої CRF, можна виконати, як описано (с, 3Н); АРСl+ - мас-спектрометрія: 286 (М++Н). G.Battaglia et al. Synapse 1:572 (1987). Коротко, Приклад 2 аналізи проводять при 37°С протягом 10хв. в Одержання 4-((R)-2-бутиламіно)2,7-диметил-8200мл буферу, що містить 100ммоль Tris-НСl (pH (2-метил-6-метоксипірид-3-іл) [1,5-аіпіразоло-1,3,57,4 при 37°С), 10ммоль MgCl2, 0,4ммоль етиленгтриазину лікольтетраацетату (EGTA), 0,1% альбуміну бичаА. 4-Хлор-2,7-диметил-6-(2-метил-6чої сироватки (ВSA), 1ммоль ізобутилметилксанметоксипірид-3-іл)[1,5а]піразоло-триазин тину (ІВМХ), 250 одиниць/мл фосфокреатинкінази, Суміш 2,7-диметил-8-(2-метил-6-метоксипірид5ммоль креатинфосфату, 100ммоль гуанозин 5'3-іл) [1,5-а]-піразоло-[1,3,5]триазин-4-ону (приклад трифосфату, 100нмоль oCRF, антагоністичні пеп1, 3,9г, 13,7ммоль), діізопропілетиламіну (9,5мл, тиди (діапазон концентрації від 10-9 до 10-6m) і 54,7ммоль), оксихлориду фосфору (5,1мл, 0,8мг первинної вологої маси тканини (приблизно 54,7ммоль) і толуолу (75мл) перемішували при 40-60мг білка). Реакції ініціюються додаванням температурі флегми протягом 4 годин. Леткі речо1ммоль АТФ/32Р]АТФ (приблизно 2-4мКі/пробірку) і вини видаляли у вакуумі. Залишок вміщували на припиняють додаванням 100мл 50ммоль Tris-HCl, підкладку з силікагелю на целіті і елюювали 1:1 45ммоль АТФ і 2% додецилсульфату натрію. Для сумішшю EtOAc і гексану. Розчинник видаляли у контролю витягання цАМФ 1мкмоль [3Н]цАМФ вакуумі з фільтрату з одержанням олії. (приблизно 40000 розпадів за 1хв.) додають в коВ. 4-((R)-2-Бутиламіно)2,7-диметил-8-(2жну пробірку перед відділенням. Відділення метил-6-метоксипірид-3-іл) [1,5-а] піразоло-1,3,5[32Р]цАМФ від [32Р]АМФ виконують послідовним триазин елююванням через колонку Dowex і глиноземну Суміш 4-хлор-2,7-диметил-8-(2-метил-бколонку. метоксипірид-3-іл)-[1,5-а] піразолотриазину, (R)-2Біологічний аналіз in vivo бутиламіну (2,0мл, 20,5ммоль), діізопропілетилаАктивність in vivo сполуки даного винаходу міну (9,5мл, 54,7ммоль) і сухого ТГФ (25мл) переможна оцінити з використанням одного з біологічмішували при кімнатній температурі протягом 18 них аналізів, що існують і є прийнятними в даній годин. Розчинник видаляли у вакуумі. Хроматогобласті. Ілюстративні з даних тестів включають рафія залишку на колонці (спочатку з використананаліз акустичного переляку, тест підйому по схоням ЕtOАс:гексану::1:2, потім з використанням дах і аналіз хронічного введення. Дані і інші модеEtOАс:гексану::1:4) давала продукт. Видалення лі, які можна використати для тестування сполук розчинника у вакуумі давало білу тверду речовину даного винаходу, були описані в публікації (2,3г): т.пл. 118,3°С; 1H-ЯМР (CDCI3, 300МГц): δ C.W.Berridge and A.J.Dunn Brain Research Reviews 7,41 (д, 1Н, J=8), 6,63 (д, 1Н, J=8), 6,25 (шир.д, 1H, 15:71 (1990). J=9), 4,35-4,30 (м, 1Н), 3,95 (с, 3Н), 2,49 (с, 3Н), Сполуку можна тестувати у будь-якого виду 2,35 (с, 3Н), 2,30 (с, 3Н), 1,76-1,66 (м, 2Н), 1,34 (д, гризунів або дрібного ссавця. 3Н J=7), 1,02 (т, 3Н, J=7); 13С-ЯМР (CDCl3, Сполуку згідно з даним винаходом можна за100,52МГц): δ 163,8, 163,0,155,7, стосовувати при лікуванні дисбалансу, пов'язаного 153,7,147,8,146,6,141,6,118,5, 107,4, 106,6, 53,3, з патологічними рівнями рилізінг-фактора кортико48,2, 29,7, 26,1, 22,9, 20,4, 13,1, 10,3; ІЧ (без домітропіну у пацієнтів, які страждають депресією, шок, КВr, см-1): 3380 (м), 3371 (м), 2968 (м), 2928 афективними розладами і/або тривогою. (м), 2872 (в), 1621 (с), 1588 (с), 1544 (с), 1489 (с), Сполуку даного винаходу можна вводити для 1460 (с), 1425 (с), 1413 (с), 1364 (с), 1346 (м), 1304 лікування вказаних відхилень від норми засобами, (с), 1275 (с), 1247 (с), 1198 (м), 1152 (м), 1134 (м), які створюють контакт активного агента з ділянкою 1112 (м), 1034 (с), 1003 (м); ESI (+)-HRMS: Розрадії агента в організмі ссавця. Сполуку можна ввохункова для C18H24N6O: 341.2089; Знайдена: дити будь-яким звичайним засобом, існуючим для 341.2093 (М++Н). Аналітично розрахункова для застосування в поєднанні з лікарськими препараC18H24N6O: С, 63,51, Н, 7,12, N, 24,69; Знайдена: С, тами або у вигляді окремого терапевтичного засо63,67, Н, 7,00, N, 24,49. бу, або в комбінації з терапевтичними засобами. її Корисність можна вводити окремо, але загалом її вводять з Аналіз зв'язування з рецепторами CRF щурів фармацевтичним носієм, вибраним на основі вибдля оцінки біологічної активності. раного шляху введення і стандартної фармацевАфінність зв'язування з рецепторами відносно тичної практики. коркових рецепторів щурів аналізували відповідно Введене дозування буде варіювати в залеждо опублікованих способів (E.B. De Souza, J. ності від застосування і відомих чинників, таких як Neurosce, 7: 88 (1987). фармакодинамічний характер певного засобу і 25 74634 26 спосіб і шлях його введення; вік реципієнта, маса і напівтверді жирові речовини. Протиокислювальні стан здоров'я; природа і ступінь виявленості симпагенти, такі як бісульфіт натрію, сульфіт натрію томів; вид супутнього лікування; частота лікування або аскорбінова кислота, або окремо, або в комбіі бажаний ефект. Для застосування при лікуванні нації являють собою відповідні стабілізуючі агенти. вказаних захворювань або станів сполуку даного Використовують також лимонну кислоту і її солі і винаходу можна вводити перорально щодня в доЕДТА. Крім того, парентеральні розчини можуть зуванні активного інгредієнта 0,002-200мг/кг маси містити консерванти, такі як бензалконійхлорид, тіла. Звичайно доза 0,01-10мг/кг в дробових дозах метил- або пропіл-парабен і хлорбутанол. 1-4 рази/день або в композиції пролонгованого Відповідні фармацевтичні носії описані в керівивільнення буде ефективна при одержанні бажавництві "Remington's Pharmaceutical Sciences", ного фармакологічного ефекту. A.Osol, стандартному посиланні в даній області. Лікарські форми (композиції), придатні для Фармацевтичні лікарські форми, які можна завведення, містять від близько 1мг до близько стосовувати для введення сполук даного винахо100мг активного інгредієнта на одиницю. У даних ду, можна проілюструвати, як викладено нижче: фармацевтичних композиціях активний інгредієнт Капсули звичайно буде бути присутнім в кількості приблизВелику кількість стандартних лікарських форм но від 0,5 до 95% мас. на основі загальної маси у вигляді капсул одержують заповненням кожної з композиції. стандартних твердих желатинових капсул, що Активний інгредієнт можна вводити пероральскладаються з двох частин, 100мг порошкоподібно в твердих лікарських формах, таких як капсули, ного активного інгредієнта, 150мг лактози, 50мг таблетки і порошки, або в рідких формах, таких як целюлози і 6мг стеарату магнію. еліксири, сиропи і/або суспензії. Сполуки даного М'які желатинові капсули винаходу можна також вводити парентерально в Суміш активного інгредієнта в олії, що перевастерильних, рідких дозованих композиціях. рюється, такій як олія соєвих бобів, олія насіння Желатинові капсули можна використати для бавовни або оливкова олія готують і ін'єктують за вміщення активного інгредієнта і відповідного нодопомогою позитивного зміщення закачуванням в сія, такого як лактоза, крохмаль, стеарат магнію, желатин для формування м'яких желатинових капстеаринова кислота або похідні целюлози, але не сул, що містять 100мг активного інгредієнта. Капобмеженого ними. Аналогічні розріджувачі можна сули промивають і сушать. використати для виготовлення пресованих таблеТаблетки ток. І таблетки, і капсули можна виготовити у виВелику кількість таблеток одержують звичайгляді продуктів пролонгованого вивільнення для ними процедурами з тим, щоб стандартна дозоватривалого вивільнення лікарського засобу протяна форма становила 100мг активного інгредієнта, гом періоду часу. Пресовані таблетки можуть бути 0,2мг колоїдного двоокису кремнію, 5мг стеарату покриті цукром або плівкою для маскування немагнію, 275мг мікрокристалічної целюлози, 11мг приємного смаку або такими покриттями, що викокрохмалю і 98,8мг лактози. Відповідні покриття ристовуються для захисту активних інгредієнтів від можна наносити для поліпшення смакових якостей атмосфери або для забезпечення можливості виабо відстроченого всмоктування. бірного розпаду таблетки в шлунково-кишковому Сполуки даного винаходу можна також застотракті. совувати як реагенти або стандарти при біохімічРідкі лікарські форми для орального введення ному дослідженні неврологічної функції, дисфункможуть містити фарбувальні або ароматизуючі ції і патології. агенти для збільшення прийняття пацієнтом. Хоча даний винахід був описаний і проілюстЗвичайно, вода, фармацевтично прийнятні рований з точки зору певних переважних варіантів олії, сольовий розчин, водна декстроза (глюкоза) і реалізації, для фахівців в даній області будуть родинні цукрові розчини і гліколі, такі як пропіленгочевидні інші варіанти реалізації. Тому винахід не ліколь або поліетиленгліколь, являють собою відобмежується конкретними описаними і проілюстповідні носії для парентеральних розчинів. Розчированими варіантами реалізації, але може модини для парентерального введення переважно фікуватися або змінюватися без відходу від суті містять розчинну у воді сіль активного інгредієнта, винаходу, повний діапазон домагань якого визнапридатні стабілізуючі агенти і, якщо необхідно, чений прикладеною формулою винаходу. Комп’ютерна верстка Л. Купенко Підписне Тираж 26 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601