Спосіб отримання фітосубстанції на основі аронії чорноплідної

Спосіб отримання фітосубстанції на основі 3 43236 год. Готовий продукт у вигляді сухого розсипчастого субстрату фасують у герметичну тару. Одержана фітосубстанція - однорідний сублімований дрібнокристалічний порошок рожевовишневого кольору, плодового запаху, солодкувато-кислого смаку. Приклад 1 У гомогенізатор внесли свіжі плоди аронії чорноплідної, попередньо промиті проточною водою, підсушені. Плоди подрібнили до утворення однорідної густої маси, до якої додали структуроутворювач, а саме 20% розчин сорбіту. Одержаною сумішшю заповнили ін'єкційні флакони місткістю 200мл на 1/3 загального об'єму і піддали пристін 4 ковому заморожуванню на установці HZ 12/50 при -40°С протягом 10хв. Сублімаційну сушку суміші здійснили на приладі LZ-30 впродовж - 24 год. Отриманий продукт у вигляді сухого розсипчастого субстрату розфасували у герметичну тару. Отриманий продукт дрібнокристалічний порошок рожево-вишневого кольору, плодового запаху, солодкувато-кислого смаку. Приклад 2 Було одержано зразки сублімованих порошків плодів аронії чорноплідної з сорбітом і без структуроутворювача, а також досліджено їх кристалографічні характеристики згідно методик Державної фармакопеї України (ДФУ). Таблиця 1 Характеристика ліофілізованих порошків аронії чорноплідної (ЛПА) № п/п Складові компоненти 1 ЛПА без структуроутворювача 2 ЛПА з сорбітом в кількості 2% Опис Порошок темно-вишневого кольору, гігроскопічний, спостерігається залишки шкірки плодів та великі частки, сильно грудкується. Порошок рожево-вишневого кольору, однорідний, дрібнокристалічний. Фітосубстанція без структуроутворювача, як наведено на Фіг.1 являє собою вишнево-рожевий грубодисперсний, гігроскопічний порошок, має незадовільні технологічні характеристики, спостерігається карамелізація, залишки шкірки плодів та великі частки, сильно грудкується. Натомість при додаванні сорбіту (Фіг.2) готовий продукт набуває вигляду розсипчастого порошку темно-рожевого кольору, кристалами прави льної форми, однорідні, рідко зустрічаються грубодисперсні частинки, немає залишків шкірки плодів і карамелізації і має покращенні технологічні властивості. Приклад 3 Досліджено кількісний і якісний склад одержаних ліофілізованих порошків аронії, згідно методик ДФУ, ДФ XI вид. Таблиця 2 Результати фітохімічних досліджень ліофілізованих порошків аронії порівняно із сухими плодами аронії № п/п 1 2 3 4 5 Біологічно активні сполуки Поліфенольні сполуки, % Флавоноїди, % Органічні кислоти, % Дубильні речовини, % Аскорбінова кислота, % Одержанні дані свідчать, що обрана нами технологія забезпечує одержання порошків із високим вмістом біологічно активних сполук більшим ніж в сухій стандартизованій рослинній сировині, а також доцільність ведення структуроутворювача, а саме сорбіту в кількості 2% від маси сировини. Приклад 4 Для визначення протизапальної активності ліофілізованих порошків аронії чорноплідної використовувалась модель набряку лапи щура, викликаного субплантантами введенням флогогенного агенту. З цією метою під апоневроз підошви задньої лапи вводили 0,1мл 2% водного розчину формаліну. Експериментальні дослідження проводили на білих щурах-самцях масою 0,13-0,15кг, Сухі плоди 10,39±0,10 4,46±0,06 4,45±0,06 6,19±0,08 0,44±0,01 ЛПА з сорбітом 2 % 13,54±0,17 5,76±0,07 8,31±0,09 8,47±0,09 0,28±0,02 розділених на 3 групи. За 2 год і зразу після введення флогогенного агенту тваринам першої групи перорально вводили відповідно ЛПА з сорбітом 2% в дозі 25мг на 100г маси тіла тварини. Друга група - контрольні тварини, яким вводили по 0,1мл 2% водного розчину формаліну. Третя група інтактні тварини. Вимірювання об'єму лапи виконували онкометрично по А.С. Захаревському до початку експерименту, через 1 год, через 3 год, і в момент найбільшого розвитку набряку через 5 год. Результати проведеного експерименту представлені в таблицях 3 і 4. 5 43236 6 Таблиця 3 Вплив ліофілізованих порошку плодів аронії чорноплідної на розвиток набряку кінцівки щура № групи Об'єкт дослідження 1 2 ЛПА - сорбіт Контроль Кількість структуроутворювача, % 2,0 Приріст об'єму лапки, % через 1 год через 3 год через 5 год 119±3 119±4 115±4 127±4 135±6 137±5 Таблиця 4 Антиексудативна активність ліофілізованих порошків плодів аронії чорноплідної № групи Об'єкт дослідження 1 Кількість структуроутворювача, % ЛПА - сорбіт 2,0 Результати проведених досліджень (табл. 3, 4) свідчать, що серед досліджуваних порошків аронії чорноплідної із різними структуроутворювачами найвищу протизапальну активність проявляє ліофілізований порошок плодів аронії чорноплідної із сорбітом, який пригнічує запальну реакцію на 59,5% на 5 год експерименту. Приклад 5 Вивчення гепатозахисної активності ліофілізованого порошку плодів аронії чорноплідної із сорбітом проводили на скринінговій моделі ушкодження печінки, яка виникає при введенні тетрахлорметану. Гепатозахисну активність ліофілізованих порошків аронії чорноплідної вивчали за методикою Позднякова B.C. і співавторів. Досліди проводили на 24 білих щурах масою 0,18-0,25кг, розділених на 4 групи по 6 тварин. Для відтворення гострого токсичного ураження печінки тваринам 1-3 груп підшкірно вводили 50% олійний розчин тетрахлорметану в дозі 0,8мл на 0,1кг маси тварини впродовж 2-х діб з проміжком 24 год. Досліджуваний препарат вводили тваринам за Приріст об'єму лапки, % через 1 год через 3 год через 5 год 29,6 45,7 59,5 1 год до і 2 год після введення гепатотропної отрути. Тваринам другої групи вводили внутрішньочеревно водні розчини ліофілізованих порошків плодів аронії чорноплідної в дозі 25мг на 1,0кг маси тварини. Четверта група - інтактні тварини. Для порівняння антигіпоксичної активності використовували рослинний збір „Силібор", який вводили третій групі з розрахунку 0,04мг на 100г маси тіла тварини при тих же умовах досліду. Тварини контрольної першої групи лікування не отримували. Щурів декапітували на третю добу з моменту першого введення тетрахлорметану. Про фармакотерапевтичну ефективність досліджуваних екстрактів робили висновок на основі біохімічних та функціональних показників стану печінки, які визначали через 24 год. після останнього введення тетрахлорметану. Смертність у контрольній групі становила 16,7 %. Результати біохімічних досліджень крові представленні в табл. 5. Таблиця 5 Результати дослідження гепатопротекторної активності ліофілізованих порошків плодів аронії чорноплідної із сорбітом Група тварин 1 2 3 4 Об'єкт досліджен- Кількість тваня рин в групі 50% олійний роз6 чин CCL4 ЛПА-С 6 Силібор 6 Інтактні 6 Доза мг/0,1кг Результати свідчать, що ЛПА проявляє гепатозахисні властивості. Застосування ліофілізованиго порошку з плодів аронії чорноплідної з сорбітом при гострому токсичному ураженні печінки зменшує токсичність тетрахлорметану, забезпечуючи гепатозахисну активність. АлАТ, мклмоль/год×мл АсАТ, мклмоль/год×мл 0,8 1,13±0,04 0,95±0,04 25,0 25,0 0,78±0,04 0,60±0,03 0,54±0,04 0,92±0,04 0,44±0,02 0,39±0,02 Джерела інформації: 1. Пат. 2171111 Россия, МПК7 А61К 35/78 / Экстракт листьев аронии, обладающий биологической активностью, и способ его получения (Ипотова О.М.) - №2171111 Заявл. 2000111125/14; Опубл. 2001.07.27 7 Комп’ютерна верстка А. Крулевський 43236 8 Підписне Тираж 28 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601