Спосіб активації амілолітичних ферментів

Спосіб активації амілолітичних ферментів, який включає розбавлення ферментного препарату водою та внесення активатора - солі металу у вигляді водного розчину, який відрізняється тим, що ферментний препарат розбавляють водою з температурою 20-40°С у співвідношенні 1 100, як сіль металу використовують сіль цинку або кальцію, або магнію і вносять її у КІЛЬКОСТІ 5*10 5 1*10 моль/л розбавленого ферментного препарату Винахід стосується біохімії, зокрема ферментів - пдролаз (амілолітичні ферменти), їх активації, і може бути використаний у спиртовій промисловості Відомий спосіб активації амілолітичних ферментів, який включає розбавлення водою ферментного препарату, з наступним введенням активатора - юна металу у вигляді водного розчину солі Як ферментний препарат використовують Аміломізентерин Гх-467, як активатор - сіль кальцію концентрацією 2*10 6 М або цинку концентрацією 3*10 6 М Розчин витримують при температурі 50°С протягом ЗОхв [Изменение активности амилолитических ферментных препаратов при тепловой обработке Траубенберг С Е , Бачурин А Л , Лысюк Ф А и др Ферментная и спиртовая промышленность, 1984, №8, С 2 9 - 3 2 ] водою, та внесення активатора - юна металу у вигляді водного розчину солі, згідно з винаходом, ферментний препарат розбавляють водою з температурою 20 - 40°С у співвідношенні 1 100, як сіль металу використовують сіль цинку або кальцію або магнію і вносять її в КІЛЬКОСТІ 5*10 5 -1*10 3 моль/л розбавленого ферментного препарату Завдяки здатності ІОНІВ металу сприяти утворенню активних і стійких форм ферменту, така обробка ферментного препарату дозволяє підвищити активність його амілолітичних ферментів на 17 - 40% та стабілізувати и протягом тривалого часу Це дозволяє зменшити витрату ферментного препарату на оцукрювання і забезпечити зниження собівартості спирту, що виробляється з крохмалевмісної сировини, підвищити конкурентоспроможність на внутрішньому та зовнішньому ринках При здійсненні способу були використані ферментний препарат - Сан Супер 240L - (аамілаза, глюкоамілаза), продуцент Aspergillus mger, сульфат цинку - х ч хлорид кальцію - х ч сульфат магнію - х ч Активність ферментного препарату Сан Супер (амілолітичних ферментів і глюкоамілази) визначали згідно ГОСТ 20264 4-89 Декстринолітична активність, од/мл - 850, глюкоамілазна активність, од/мл - 3050 Спосіб реалізується таким чином Приклад 1 На аналітичних вагах зважують 0,0966г сульфату цинку і розводять водою в колбі до 50мл Але цей спосіб характеризується високою температурою витримування розчину, вузьким діапазоном концентрації ІОНІВ металів, відносно тривалою витримкою - ЗОхв, невисоким ступенем підвищення активності (12 - 25%) В основу винаходу поставлено завдання вдосконалити спосіб активації амілолітичних ферментів, в якому за рахунок проведення процесу в нових умовах, забезпечувались можливість здійснення активації при нижчій температурі та розширення діапазону концентрації ІОНІВ металів, що дозволило б за короткий проміжок часу максимально підвищити активність ферментів Поставлене завдання вирішується тим, що в способі активації амілолітичних ферментів, який включає розбавлення ферментного препарату 00 ю (О ю 56584 1мл ферментного препарату розводять у співвідношенні 1 100 водою температурою 30°С, та вносять 1мл розчину сульфату цинку в КІЛЬКОСТІ, ЩО забезпечує концентрацію його у розведеному фе4 рментному розчині 1*10 М Після змішування активність розчину ферментного препарату становила декстринолітична 1050од/мл, глюкоамілазна - 3970од/мл, що на 24 і 30%, ВІДПО ВІДНО, вище початкових значень Надалі розчин ферментного препарату дозують на оцукрювання крохмалевмісної сировини Витримування розчину більше 2 годин при вказаних вище умовах не супроводжується втратою активності ферментного препарату Приклад 2 Ферментний препарат розбавляють аналогічно, водою з температурою 40°С, але ж активатор використовують сіль сульфат магнію концентрацією 5*10 5 М Після зміщування активність розчину ферментного препарату становила декстринолітична - 1020од/мл, глюкоамілазна - 3810од/мл Активність таким чином підвищується на 20 і 25%, ВІДПОВІДНО Приклад З Ферментний препарат розбавляють водою те мпературою 40°С В даному прикладі як активатор використовують хлорид кальцію при концентрації його у розбавленому ферментному препараті 1*10 3 М Активність ПІСЛЯ змішування розчину ферментного препарату та розчину солі становить декстринолітична - 1190од/мл, глюкоамілазна 3600од/мл, що на 18 і 40%, ВІДПОВІДНО, вище початкових значень Приклад 4 Ферментний препарат розбавляють водою температурою 20°С Наступні операції проводять аналогічно прикладу 3 Декстринолітична активність таким чином становить - 1200од/мл, глюкоамілазна -3600од/мл, що на 18 і 22 % , ВІДПОВІДНО, вище початкового значення Розбавлення ферментного препарату водою температурою 50°С та витримка з активаторами до двох годин супроводжується втратою активності препарату Використання активаторів у концентрації 1*10 2 М веде до втрати активності При високих концентраціях ІОНІВ металів активний центр молекул ферменту може бути зайнятий іонами металу, внаслідок цього, активність ферментів знижується Концентрація активатора 1*10 6 М не має суттєвого впливу на активність ферментів Підписано до друку 05 06 2003 р Тираж 39 прим ТОВ "Міжнародний науковий комітет" вул Артема, 77, м Київ, 04050, Україна (044)236-47-24