Спосіб концентрування ферментного препарату

Винахід стосується рибопереробної галузі харчової промисловості, зокрема до отримання ферментних препаратів для подальшої переробки гідробіонтів. Відомий спосіб отримання протеолітичного комплексу (RU, патент, 2034028, кл. С 12 N 9/64, 1995), що включає подрібнення вихідної сировини, екстракцію 1% розчином хлористого кальцію, концентрування та центрифугування, з подальшим мікро- та ультрафільтруванням. Недоліком даного винаходу є складність і висока вартість вилучення протеолітичного комплексу, за рахунок використання для концентрування і фільтрування мембран. Найбільш близьким до запропонованого нами є спосіб отримання іммобілізованого тріпсину (А. с. СРСР 994 556, кл. С 12 N 9/76, С 12 N 11/14, опубл. 1983, бюл. 5), що включає зв'язування отриманого ферменту з гідрогелем полікремнієвої кислоти в присутності іонів кальцію, дегідратацію ведуть протягом 6-8 годин до вологості 12-15%. Недоліком даного способу є його довготривалість та низька стабільність отриманого препарату. В основу винаходу поставлено задачу створення способу концентрування ферментного препарату шляхом зв'язування ферментного препарату з біоспецифічним сорбентом з послідуючим помірним сушінням, що дозволяє отримати препарат з високою активністю, зменшити час процесу, забезпечити стабільність активності препарату при звичайних умовах зберігання. Основа технології базується на властивостях полімерних електролітів утворювати з білками комплекси, які легко самоосаджуються за рахунок укрупнювання молекул. Для осадження білків ферментів використовують природний аніоніт - пектин, який переходить внаслідок хімічних перетворень у низькометаксильований. Отриманий комплекс пектин-фермент нестійкий, внаслідок чого випадає в осад. Швидкість утворювання пектинферментного комплексу залежить від ступеню етерифікації пектину; чим вона нижче, тим більше швидкість. Поставлена задача вирішується тим, що у відомому способі концентрування ферментного препарату проводять зв'язування ферментного препарату з біоспецифічним сорбентом з послідуючим сушінням. Згідно з винаходом вилучений ферментний препарат концентрують 0,1-1,5% розчином пектину у співвідношенні 2:1 при температурі 18-20°С і рН=3-5, декантують, центрифугують та висушують при t=40°С. Використання розчину пектину концентрацією 0,1-1,5% дозволяє отримати комплекс пектин-фермент у вигляді осаду, який легко відділити декантуванням та центрифугуванням. Завдяки подальшому сушінню ферментний препарат можна зберігати при звичайних умовах. Препарат отримують без специфічного рибного запаху, з відносною вологістю 30%. Крайнє значення рН=5, при підвищенні основності розчину ступінь осадження пектин-ферментного комплексу знижується, що в свою чергу утруднює отримання кінцевого продукту і збільшує час процесу. Заявлений спосіб здійснюється таким чином. У фільтрат ферментного препарату додають розчин пектину концентрацією 0,1-1,5% у співвідношенні 2:1 і витримують до 30 хвилин. На протязі цього часу відбувається утворювання гелю. Після цього розчин декантують, центрифугують. Потім ферментний препарат у вигляді гелю сушать при температурі не більш 40°С. Отриманий препарат подрібнюють, просіюють до вигляду порошку та зберігають при температурі 18-20°С в герметичних пакунках і відносній вологості 75%. Термін зберігання 6 місяців. Суть винаходу ілюструється наступними прикладами. Приклад 1. До 1000мл екстракту нутрощів риб океанічного промислу додають 500мл розчину пектину концентрацією 0,6%, ретельно перемішують, додають 0,1М цетратний буфер, доводячи рН розчину до 3. Суміш витримують 30 хвилин. Далі протягом 30 хвилин повільно декантують і центрифугують при n=2000 об/хв 5 хвилин. Надалі осад сушать при температурі не вище 40°С без примусової вентиляції. Герметично пакують у поліетиленові пакунки. Питома активність препарату складає 105од/мг білку, вихід концентрованого ферментного препарату 17%. Приклад 2. До 1000мл екстракту додають 500мл 1% розчину пектину, рН суміші доводять 0,1М цетратним буфером до 5 і витримують 15 хвилин. Питома активність препарату - 98од/мг білку. Вихід концентрованого ферментного препарату складає 27%. Готовий ферментний препарат може бути використаний для дозрівання повільнодозріваючих риб, здійснення ферментолізу при виробництві фаршевих консервів та паст, у виробництві солоної та копченої продукції, пресервів, а також рибних гідролізатів.