Спосіб хроматографічного визначення мікроелементів в озолених пробах харчових продуктів

Спосіб хроматографічного визначення мікроелементів в озолених пробах харчових продуктів, що включає переведення цих мікроелементів в діетилдитюкарбамшатні комплекси (ДЕДТК) та наступне хроматографічне розділення на мікроколонковому рідинному хроматографі з детектуванням в УФ-області, який відрізняється тим, що як елюент використовують суміш складу ацетонітрил - 0.02М, ацетатний буферний розчин з рН 5,5, етилацетат - 510 3 М, розчин натрій-діетилтюкарбамшату (Na-ДЕДТК) у співвідношенні компонентів 62 28 5 5 та застосовують трихвильове детектування комплексів на 256, 280, 326нм Винахід відноситься до аналітичної хімії, а саме до способів хроматографічного визначення мікроелементів і може бути використаний для аналізу озолених проб харчових Традиційно для визначення окремих мікроелементів в озолених пробах харчових продуктів використовують фотометричні та вольтамперометричні методи аналізу [Див ГОСТ 26927-86, 26928-86, 26931-86, 26932-86, 26933-86, 26934-86, 26935-86], метод атомно-адсорбційної спектроскопи дозволяє проводити багатоелементний аналіз озолених проб харчових продуктів [див "Методические указания по атомно-абсорбционным методам определения токсичных элементов в пищевых продуктах и пищевом сырье" М , 1992 (№ ОМ9/471)], перспективним методом багатоелементного аналізу є оберненофазова (ОФ) високоефективна рідинна хроматографія (ВЕРХ) хелатів [Див Тимербаев А Р , Петрухин О М Жидкостная адсорбционная хроматография хелатов - М Наука 1989 - 2 8 8 с ] 93 Орел, 1993 Авторы - м н е Мотылева С М (ВНИИ СПК г Орел), инж 2-й кат Соснина М В (АО "Научприбор", г Орел)] Визначають кадмій, купрум, плюмбум та цинк у вигляді диетилдитюкарбамшатів Для розділення використовують хроматографічну колонку 64 х Змм, заповнену сорбентом Сепарон С18 (5мкм), та елюент складу ацетонітрил - 0.02М ацетатний буферний розчин (рН 5,4) - хлороформ - 2 10 4 М розчин натрій диетилдитюкарбамшату (Na-ДЕДТК) при співвідношенні компонентів 65 31 2 2 Детектування здійснюють на 252, 262нм Чутливість визначення становить ВІДПОВІДНО 0,02мг/кг для кадмію, 0,05 для купруму, 0,10 - для плюмбуму та 0,80 - для цинку Недоліком способу є мала КІЛЬКІСТЬ елементів, які можна одночасно визначати, недостатня точність визначення Найбільш близьким по технічній суті та досягаємих результатах до даного винаходу є спосіб хроматографічного визначення мікроелементів в озолених пробах харчових продуктів, що описаний в [Див "Методика количественного анализа озоленных проб продукции плодово-овощного, животного и растительного происхождения и продуктов их переработки на содержание Cd, Pb, Zn, Си методом ВЭЖХ с использованием микроколончатого хроматографа" Свидетельство № 109 (110, 111) Тому в основу винаходу поставлене завдання збільшити КІЛЬКІСТЬ аналізуємих елементів та підвищити точність їх визначення Поставлене завдання вирішується завдяки тому, що запропонований спосіб хроматографічного визначення мікроелементів, таких як Cd, Co, Cu, Hg, Ni, Pb і Zn, передбачає переведення їх в диетилдитюкарбамшатні комплекси, послідуюче хроматографічне розділення на мікроколонковому хроматографі з використанням елюенту складу ацетонітрил - 0.02М ацетатний буферний розчин (рН 5,5) - етилацетат - 5 10 3 М розчин Na-ДЕДТК при співвідношенні компонентів 62 28 5 5 та трихвильове детектування комплексів на 256, 280, О со го 49330 326нм Зазначені умови забезпечують успішне розділення та визначення мікроелементів у вигляді диетилдитюкарбамшатних комплексів, а порядок елюювання вказаних комплексів в цих умовах відповідає такому ряду металів Cd < Pb < Zn < Ni < Co < Си < Hg При введенні до складу елюенту етилацетату відбувається модифікування поверхні сорбенту, що дозволяє уникнути похибок при ідентифікації хроматографічних зон диетилдитюкарбамшатних комплексів окремих елементів Умови трихвильового детектування на 256, 280, 326нм обрані у ВІДПОВІДНОСТІ ІЗ результатами досліджень спектрів поглинання в УФ області диетилдитюкарбамшатних комплексів Cd, Co, Cu, Hg, Ni, Pb та Zn і забезпечують максимальну чутливість та точність визначення ВІДПОВІДНИХ мікроелементів Спосіб здійснюється наступним чином пробу переводять в розчин, створюють певне значення рН середовища, додають маскуючі реагенти та комплексоутворювач, комплекси екстрагують протягом певного часу, в аліквотних частинах екстракту змінюють розчинник та хроматографують на рідинному мікроколонковому хроматографі з подальшим детектуванням в УФ області Приклад визначення мікроелементів озолену пробу розчиняли в мінімальній КІЛЬКОСТІ (ДО ЗМЛ) Елемент Cd Co Си Hg Ni Pb Zn 10% розчину суміші нітратної та хлоридної кислот, КІЛЬКІСНО переносили в мірну колбу на 25см3, нейтралізували концентрованим аміаком до рН 4 - 6 та доводили до мітки буферним розчином з рН 5,5 До аліквотної частини отриманого розчину додавали 0,5см 3 1М сегнетової солі, 2,0см31М фториду калію, 0,1см3 10 4 М розчину реагента (Na-ДЕДТК), разводили до 20,0см3 бідистильованою водою, додавали 2,0см3 хлороформу та струшували 1хв Потім відбирали 0,5см3 хлороформного екстракту та переносили в бюкс, упарювали у витяжній шафі, залишок розчиняли в 0,1см3 ацетонітрилу і хроматографували з використанням аналітичної колонки 64 х 2мм, заповненої сорбентом Сепарон С18 (5мкм), на рідинному хроматографі "Милихром-4" зі спектрофотометричним детектором на УФ область Об'єм проби складав 5 - Юмкл, витрата елюента - 150мкл/хв Ідентифікацію та кількісне визначення проводили з використанням зовнішнього стандарту за допомогою програми збору та обробки хроматографічних даних В табл 1 наведені значення утримуваних об'ємів та оптимальні умови детектування окремих комплексів для забезпечення максимальної чутливості Таблиця 1 Умови визначення мікроелементів у вигляді ДЕДТК Утримуваний об'єм комплексу, Умови детектування, нм Чутливість визначення, нг мкл 150-190 256 15 790 - 840 326 2 930 - 980 280 1 1040-1090 280 10 640 - 680 326 6 460-510 256 10 580 - 630 256 2 Запропонований спосіб хроматографічного визначення мікроелементів був використаний для аналізу майонезів продукт" (табл 2) Результати визначення мікроелементів в майонезах торгової Майонез / мг/кг Cd Co Си Hg 0,015 ± 0,012 + 0,354 + 0,005 ± "Делікатесний" 0,007 0,002 10,004 0,021 0,020 + 0,009 ± 0,317 + 0,003 ± "Провансаль легкий" 0,002 0,001 0,003 0,032 0,020 ± 0,010 ± 0,392 ± 0,003 ± "3 часником" 0,007 0,002 0,030 0,001 0,026 ± 0,016 ± 0,301 ± 0,004 ± "Луцький Довгань" 0,006 0,003 0,042 0,001 0,022 ± 0,011 ± 0,256 ± 0,003 + "Європейський" 0,005 0,003 0,034 0,001 0,027 ± 0,011 + 0,274 ± 0,004 ± "Провансаль № 1" 0,006 0,026 0,001 0,004 По КІЛЬКОСТІ аналізуємих елементів та точності визначення запропонований спосіб переважає торгової марки марки "Торчин-продукт" Ni РЬ 0,013 ± 0,023 ± 0,004 0,005 0,017 + 0,019 ± 0,004 0,003 0,009 ± 0,021 ± 0,002 0,005 0,011 ± 0,027 ± 0,002 0,004 0,015 ± 0,020 ± 0,004 0,003 0,013 ± 0,022 ± 0,003 0,003 найближчий аналог (табл 3) "ТорчинТаблиця 2 Zn 0,745 ± 0,090 0,615 + 0,072 0,692 ± 0,076 0,591 ± 0,080 0,609 ± 0,052 0,654 ± 0,047 49330 Таблиця З Порівняльна оцінка заявленого способу та найближчого аналогу Мікроелемент Кадмій Кобальт Купрум Меркурій Ні кол Плюмбум Цинк Відносна похибка, % Аналог ЗО Не визн 25 Не визн Не визн ЗО 40 Заявлений спосіб 25 ЗО 10 20 25 20 15 ДП «Український інститут промислової власності» (Укрпатент) вул Сім'ї Хохлових, 15, м Київ, 04119, Україна (044) 456 - 20 - 90 ТОВ "Міжнародний науковий комітет" вул Артема, 77, м Київ, 04050, Україна (044)216-32-71