Спосіб одержання глюкоамілази

Изобретение относится к биотехнологии, а именно, к производству глюкоамилазы, и может применяться в спиртовой промышленности. Наиболее близким техническим решением является способ получения глюкоамилазы, предусматривающий выращивание посевного материала, приготовление питательной среды, проведение гидролиза крахмалистого сырья, например, кукурузной муки с водой в соотношении 1 : 3, разваривание его и ферментативный гидролиз (осахаривание) крахмалистого сырья бактериальной a-амилазой или солодовым молоком. Часть сусла разбавляют водой до концентрации сухих ве ществ 6%, в оставшуюся вносят диаммонийфосфат, обе части подкисляют серной кислотой до pH 4,8, стерилизуют, охлаждают и направляют питательные среды для получения посевного материала и на стадию ферментации продуцента глюкоамилазы Aspergillus awamori. Указанный способ имеет следующие недостатки. Процесс ферментативного гидролиза крахмалистого сырья длительный, трудоемкий, связан с большим расходом теплоэнергетических ресурсов, так как требует многократно повторяющихся процессов термообработки и охлаждения сырья, обеспечения условий ферментативного гидролиза углеводов, использования ферментных материалов и стерилизации питательной среды. В основу изобретения поставлена задача создания такого способа получения глюкоамилазы, в котором используют вместо зернового сырья отходы спиртового производства - крахмалистую барду. Техническим результатом, который может быть получен при использовании предложенного способа, является упрощение технологии, обеспечение необходимой степени декстринизации и осахаривания крахмала, обогащение питательной среды аминокислотами, снижение вязкости и степени пенообразования массы, повышение качества и стерильности питательной среды, а также увеличение роста продуцента. Поставленная задача достигается использованием в качестве компонентов зернового сырья, воды и крахмалистой барды в массовом соотношении 0,8 - 1,6 : 0,8 - 6,0 : 0,4 - 6,4 при содержании растворимых сухи х ве ществ 2 - 6мас.%, причем кислотный гидролиз проводят после приготовления питательной среды, а перед стерилизацией pH среды доводят щелочью до pH 3,5 - 5,0. Предложенный способ получения глюкоамилазы позволяет использовать взамен высококачественного дорогостоящего зернового сырья отходы спиртового производства - крахмалистую барду, являющуюся важным источником низкомолекулярных азотистых веществ и аминокислот, фосфорных соединений, микроэлементов и органических кислот, которые необходимы для увеличения роста массы. Использование барды в качестве одного из основных компонентов сырья позволяет снизить вязкость и степень пенообразования массы, что позволяет интенсифицировать проведение технологического процесса, сократить ферментацию до 5 суток и снизить степень инфицирования готовой культуры. Способ получения глюкоамилазы включает измельчение крахмалистого сырья, выращивание посевного материала известным способом путем приготовления питательной среды, проведения кислотного гидролиза и выдержки, установления величины pH среды путем введения щелочи, стерилизацию, охлаждение и ферментацию, в качестве компонентов крахмалистого сырья используют крахмалистую барду, воду и зерновое сырье в массовом соотношении 0,4 - 6,4 : 0,8 - 6,0 : 0,8 - 1,6 при концентрации растворимых сухи х ве ществ крахмалистого сырья 2 - 6мас.%, причем кислотный гидролиз проводят после приготовления питательной среды, а перед стерилизацией pH среды устанавливают щелью до величины 3,5 - 5,0. Предлагаемый способ получения глюкоамилазы осуществляют следующим образом. Проводят выращивание посевного материала на питательной среде известным способом. Для этого крахмалистое сырье, например, кукурузу в количестве 100 - 200кг измельчают, смешивают с 50 - 70кг воды и 950 - 50кг барды и готовят водно-сырьевую суспензию в массовом соотношении 0,8 - 1,6 : 0,8 - 6,0 : 0,4 - 6,4 при концентрации сухи х ве ществ крахмалистого сырья 2 - 6мас.%. В полученную водно-сырьевую суспензию вводят кислоту ортофосфорную или серную, или соляную, или азотную, или их смеси до установления pH 4,8 - 1,5 и проводят кислотный гидролиз при температуре 60 - 180°C и выдержкой в течение 15 - 85мин до получения растворимых сухих ве ществ 9 - 20мас.%. pH гидролизованной массы устанавливают щелочью до величины 3,5 - 5,0, стерилизуют при температуре 130 - 135°C в течение 2 часов, охлаждают до 35°C и проводит ферментацию культивированным продуцентом Aspergillus awamori при постоянном перемешивании и аэрации до накопления активности глюкоамилазы 200 - 260ед/мл. Пример 1. Ведут выращивание посевного материала на питательной среде. Для этого крахмалистое сырье, например, кукуруз у в количестве 125кг измельчают, смешивают с 375кг воды и 500кг барды и готовят водно-спиртовую суспензию в массовом соотношении 1 : 3 : 4 при концентрации сухи х веществ крахмалистого сырья 4%. В полученную водно-сырьевую суспензию вводят кислоту ортофосфорную или серную, или соляную, или азотную, или их смеси до установления pH 3,5 и проводят кислотный гидролиз при температуре 120°C и выдержкой в течение 50мин до получения растворимых сухих ве ществ 17мас.%. pH гидролизованной массы устанавливают щелочью до величины 3,5 - 5,0, стерилизуют при 130 135°C в течение 2 часов, охлаждают до 35°C и ведут ферментацию культивированным продуцентом Aspergillus awamori при постоянном перемешивании и аэрации до накопления активности глюкоамилазы 280ед/мл. Примеры конкретного выполнения 1 - 5, осуществленные по вышеуказанной технологии, приведены в таблице. Проанализировав примеры, необходимо отметить, что приемлемыми для производства являются - 1, 3 и 4, а оптимальным - 1.