Штам azotobacter chroococum вніісм-20, призначений для виготовлення азотобактерину під овочеві культури

Штамм Azotobacter chroococum ВНИИСМ-20, предназначенный для изготовления азотобактерина под овощные культуры. т і 126602/ Штамм Az.chroococum В-2662 не п а т о г е Изобретение относится к микробиоi логической промышленности и с е л ь с к о нен и предназначен для изготовления му х о з я й с т в у . бактериального удобрения азотбактериЦель изобретения - -получение штамна под овощные культуры. ма^ способствующего повышению урожай- 5 Предлагаемый штамм В-2662 обладает ности овощных культур при одновременбольшей скоростью размножения. При ном улучшении к а ч е с т в а их плодов использовании его в качестве основы з а счет увеличения содержания в них изготовления азотбактернна промышвитамина С и повышения с а х а р и с т о с т и . ленным способом можно получить био10 массу 0,8-1 млрд клеток в 1 мл кульУказанным требованиям с о о т в е т с т туральной среды. Предлагаемый штамм вует штамм Az.otobacter chroococum обладает высокой способностью фиксаВНИИСМ-20 (В-2662>. Штамм депониро1 ции атмосферного а з о т а : из расчета ван в коллекции культур ВНИИ с е л ь с к о хозяйственной микробиологии под н о на 1 г потребленного сахара он фиксимером 20 и в Центральном музее п р о 15 рует на 55% больше а з о т а , из расчета .мышлешшх микроорганизмов института на 1 г сухой биомассы - на 42% боль"ВНИИгенетика" под номером В-2662. ше ( с м . т а б л . 1 , интенсивно продуцирует ауксины, витамин В и вещества, сдерШтамм выделен из черноземной поч-і живающие рост фитопатогенных грибов. вы Херсонской области, идентифицирован по "Краткому определителю б а к т е - 20 Это свойство важно также из-з.а того, 1 что при промышленном использовании рий Берджи", его в качестве основы азотобактерина Морфолого-культуральные признаки. улучшается снабжение растений биолоA z o t o b a c t e r chroococum В-2662 гически активными веществами, в р е культура неспороносная, а э р о б н а я , грамотрицательная, подвижная. Клетки 25 зультате чего увеличивается их урожайность и качество плодов. В 1982 г. имеют вид толстых крупных палочек в теплицах совхоза "Киевская овощс закругленными концами, часто с о е ная фабрика" в результате обработки диненные попарно. Имеют длину 4,4 мкм рассады огурцов сорта TCXAW1 азотбаки объем 22,21 мкм . На твердой беэазотистой среде Эшби (дистиллирован- 30 тернном, изготовленным на штамме В-2662 на площади 500 м , была полуная вода t л , маннит 20 г , K2HPQ, чена средняя прибавка урожая по 0,2 г , Мо0 4 0,2 г АС1 0,2 г , K 2 q, 0,1 г, 1,5 кг с 1 м ло сравнению с контромел 5,0 г, а г а р 1,5 г/ образует слил е м без бактеризации. Экономический зистые, выпуклые, гладкие колонии, эффект 15 тыс.рублей с 1 г а / В 1983 г, окрашенные в коричневый ц в е т . При 35 в результате бактеризации рассады выращивании на качалках на жидкой томатов и"огурцов азотбактерином б е з а з о т и с т о й среде Эшби при 220тем же штаммом была получена на пло240 об/мин и температуре 28-30°С скорость размножения с о с т а в л я е т щади 5220 м общая прибавка урожая 1,8 поколений в 1 с у т , что на 28% 40 овощей 8314 кг. Экономический эффект 15,3 тыс.рублей с 1 га. выше, чем у штамма - прототипа. В теплицах совхоза "Львовская Физиолого-биохимические с в о й с т в а . овощная фабрика" в 1982 г. при бактеКультура быстрорастущая. Не рас-' ризации рассады огурцов сорта "Мост е т на белковых с р е д а х . Не разжижает желатины. Слабо пептонизирует молоко. 45 ковский тепличный" азотбактерином, изготовленным на основе штамма Восстанавливает нитраты до нитритов. В-2662, получена прибавка урожая Активно продуцирует ростовые в е щ е с т 1 от»"3,8 до 7,7 кг с 1 м . Экономичесв а , витамины группы В, сдерживает кий эффект 21-25 тыс.руб. с 1 га. рост и р а з в и т и е фитопатогенных гриТаким образом, предлагаемый штамм б о в . Азотфиксирующая активность штам- 50 В-2662 существенно повышает урвкай ма В-2662 увеличивалась с в о з р а с т о м , и качество плодов овощных культур. е е оптимум наблюдался на 5-6 с у т к и . В табл.1 приведена сравнительная Количество фиксированного а з о т а характеристика штамма Azotobacter 8,4 мг на 1 г усвоенного сахара или 57 мг на 1 г сухой биомассы к л е т о к . 55 chroococum В-2662 и штамма-прототипа Azotobacter chroococum штамм КХ. Признаки штамма устойчивы. Перес е в а е т с я один раз в 6 м е с . и хранится Скорость размножения учитывалась на твердой среде Эшби при 5-7°С. * по приросту численности клеток азото 12o6027 азотистой среде Эмби следующего сосбактера сравниваемых штаммов при выращивании на жидкой среде на качалтава.г: ках. На основании полученных данных Маннит 20 рассчитывали время генерации и коли0,2 К 2 НРО 4 чество поколения в сутки. 0,2 МоО, 7Н о 0 0,2 NaCl Активность азотфиксации определяК 0,1 лась по методу Кьельдаля, образова2°4 5 ние ауксинов - по методу биотестов Вода дисна отрезках колиоптелей пшеницы и листовых черешков фасоли, обраэова- 1 тиллированние витамина В, - по методу Е.Н.Одинная 1 л о Рассаду томатов и огурцов обрацовой. батывают жидким азотобактерином на Способность сдерживать или подавоснове штамма Azotobacter chroococum лять рост и развитие фитопатогенных 15 ВНИИСМ-20 методом полива горшочков грибов определялась методом блоков перед высадкой в субстрат (грунт, и цилиндров, помещаемых на газоны минеральная вата, щебень и др.) или тест-культур, выращенных на суслообмакиванием корней при никировке. агаре . Стерильные блоки фильтровальРасход культуры 5 мл на одно растеной бумаги диаметром 0,5 см пропи20 ние. Титр культуры 0 , 8 - 1 млрд клетывали , а стерильные стеклянные ток в 1 мл культуральной среды. цилиндры объемом 0,2 мл заполняли Обработку семян томатов и огуртрехсуточными культурами сравниваецов проводят методом замачивания их мых штаммов азотобактера. В качестве перед высадкой в грунт в культуре тест-культур использовали фитопато- 25 с указанным титром микроорганизмов генные грибы Fusarium culmorum, Fuв течение 10-12 ч при 20°С. sarium oxysporum, Fusarium sambuОпыты проведены в теплице при cinum, Fusarium gibbosum, Fusarium соблюдении требований агротехники avenouceum. возделывания овощных культур (1981 г). Содержание Сахаров в плодах и Действие штамма проверяли на сортах литьях бактеризованных растений опре-30 томатов "Украинец" (см.табл.2) и деляли по методу Бертрана, содержа"Украинский тепличный1* (см.табл.3) ние аскорбиновой кислоты в плодах и сортах огурцов "ТСХА-1" и листьях бактеризованных растений (см.табл.4) и "эстафета1" (см.табл.5)1 по методу И.Мурри, В качестве контроля использовали П р и м е р . Жидкий азотобактерин 35 Azotobacter chroococum штамм К, для обработки овощных культур полуОпыты проводили в четырехкратной чают выращиванием штамма Azotobacter повторности. chroococum ВНИИСМ-20 на жидкой безТ а б л и ц а 1 Штамм Показатели В-2662 К(прототип) Скорость размножения (количество поколений) сут Азотфиксация, MrN на 1 г потребленного сахара 1,8 It* 8,4 5,4 Азотфиксация, MrN на 1 г сухой биомассы 57,0 40,2 Образование ауксинов мкг/л среды 2,9 Следы Образование витамина В сухой биомассы 4,8 3,7 3 вида 2 вида мкг/г Способность сдерживать или подавлять грибы . 1266027 Продолжение табл.1 Показатели Штамм і В-2662 Содержание Сахаров в плодах томатов четырех сортов, "бактеризованных .азотобактерином (средние данные), % на глюкозу К(прототип) 4,2 Содержание аскорбиновой кислоты в плодах томатов, бактеризованных азотобактерином, выращенным в закрытом грунте, мг в 100 г мезги 3,6 12 И 10 ,8 Содержание Сахаров в листьях к а п у с ты, бактеризованной азотобактерином, % на глюкозу • 5, 4 4, 8 Содержание аскорбиновой кислоты в листьях капусты, бактеризованной азотобактерином 40 , 0 18, 4' Прибавка урожая капусты, бактери.зованной азотобактерином, % к контролю без бактеризации 96 ,2 82, 7 I Та • • • ' • • • , • • ] • ' б л и ц а •I 4 2 • г Штамм, использованный для бактеризации Урожай , кг с 1 ы I • і 1 3 К 18,4 17,4 16,9 17,1 10 20,7 20,1 19,6 21,4 К2НРО4 = + 0 , 3 , к г ; Р% = 1,58; HCP oS = 1,34 кг/м ; Т а б л и ц а Урожай, кг с 1 м Штамм, использованный 1 для бактеризации. К 10 16 ,о K2HPO4 =±0,2 к г ; Р% I .3 4 14, 0 13, 6 16, 1 15, 2 Т а б л и а . 4 >9 15 8 ' 13 ,4 3 2 12 ,9 кг/м* 1,36; • . I Урожай, кг с 1 м [Птамм, использованный для бактеризации 1 .' Г.. '? 2 I '. 4 К 2.9,7 28 ,4 30 ,1 29 ,8 10 34,8 35 , 0 33 , 5 35 ,2 К 2 НРО. = to,5 кг; Р% - 1,56; Н( 2 , 3 кг/м 1266027 Т а б л и ц а 5 — ' IIIIIi I • для бактеризации • • — 4 23,3 10 Р% 22,2 23,5 23,6 25,5 к Редактор Г.Вельская • Урожай, кг с 1 м Итамм, использованный К 2 НРО 4 = + 0,3 кг; * 26,2 25,4 25,8 ш 1,23; НСР = 1,3 кг/м 0,5 Составитель Л. Чибисова Техред Л.Сердюкова Корректор В. Бутяга Заказ 976/ДСП Тираж 410 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретении и открытий 113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5 Є" Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул.Проектная, 4