Композиція для харчування з нежиттєздатною біфідобактерією і незасвоюваним олігосахаридом

Реферат: Винахід належить до галузі харчування, зокрема до композиції для харчування немовляти і/або дитини, що містить незасвоюваний олігосахарид А і/або В, де згаданий незасвоюваний олігосахарид має ступінь полімеризації від 2 до 200, і нежиттєздатну Bifidobacterium breve в 3 13 кількості, еквівалентній 10 -10 куо В. breve на г сухої маси композиції для харчування 3 немовляти і/або дитини, і містить життєздатну Bifidobacterium breve в кількості менше ніж 10 куо В. breve на г сухої маси харчування для немовляти і/або дитини. UA 100985 C2 UA 100985 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Галузь винаходу Представлений винахід стосується галузі харчування немовлят і/або дітей. Зокрема представлений винахід стосується харчування немовляти і/або дитини з незасвоюваним олігосахаридом і нежиттєздатною біфідобактерією. Така харчова композиція переважно використовується для лікування або профілактики алергії, переважно харчової алергії, і/або атопічних захворювань, включаючи атопічний дерматит і/або астму. Передумови створення винаходу У немовлят людей, що годують материнським молоком, після народження розвивається кишкова мікрофлора збагачена молочною кислотою, що продукується бактеріями. Це обумовлено присутністю незасвоюваних сахаридів в людському молоці, які специфічно ферментуються бактеріями, особливо біфідобактерією, продукуючи молочну кислоту. Мікрофлора збагачена біфідобактерією є корисною, оскільки, вона має профілактичну дію на інфекції, діарею, запор, шлунково-кишкове запалення, кишкове визрівання, алергію, зокрема харчову алергію, атопічні захворювання, включаючи атопічний дерматит, і астму і має корисний сплив на імунну систему. Молочна суміш для немовлят може бути адаптована для імітації біфідогенної дії людського молока. WO 2005039319 описує застосування живої Bifidobacterium breve і суміші двох різних незасвоюваних сахаридів для поліпшення мікрофлори немовлят, що годують молочною сумішшю. Документ описує важливість біфідобактерії як на родовому рівні, так і на видовому рівні. WO 20070046698 описує застосування композиції, що містить незасвоюваний олігосахарид для виготовлення композиції для ентерального введення немовлятам народженим завдяки кесаревому розтину. Вводили живі молочнокислі бактерії для підвищення різноманітності і/або кількості мікроорганізмів в кишечнику немовлят народжених завдяки кесаревому розтину. JP 01242532 описує застосування життєздатної або нежиттєздатної B. breve, як імуностимулятора, що стимулює бляшки Пеєровая попереджаючи таким чином інфекцію ентерального тракту і алергію. Цей документ не стосується харчової композиції для немовлят і/або дітей. Короткий опис суті винаходу Відомо, що живі клітини B. breve можуть поліпшувати мікрофлору і, таким чином, зменшувати алергію. Однак, переважним є застосування нежиттєздатної B. breve. Це має декілька переваг: 1) Продукт, що містить нежиттєздатну B. Breve, легше зберігати і зменшуються витрати, оскільки, відсутні спеціальні умови для підтримання життєздатності клітин B. breve на прийнятному рівні. Це особливо стосується продуктів з активністю води вище 0,3. 2) Відсутнє постокислення внаслідок відсутності ферментативної здатності B. breve в продуктах, що зберігаються, з високою активністю води і/або в харчуванні немовлят в період після розведення водою і перед вживанням. 3) Після одержання, кінцева харчова композиція з нежиттєздатною B. breve може бути пастеризована і/або стерилізована, і тому зменшується імовірність забруднення шкідливими мікроорганізмами, такими як E. sakazakii. Тому представлений винахід забезпечує рідку, готову до використання композицію, що містить нежиттєздатну B. Breve, яка одержується і зберігається при кімнатній температурі. 4) При бажанні, порошкоподібний продукт з нежиттєздатною B. breve може бути розведений водою при температурі вище 37(C. 5) Дозу клітин B. breve одержувану кожним немовлям і/або дитиною можна легко контролювати, оскільки вони не ростуть в рідкому продукті і відсутній ріст в кишковому тракті немовлят. Останній є змінюваним фактором, що залежить від кишкового оточення особи і тому призводить до змін в ступені корисної дії у окремих немовлят. Винахідниками неочікувано було встановлено, що харчування немовляти і/або дитини, що містить незасвоювані олігосахариди, може бути переважно доповнено нежиттєздатними клітинами Bifidobacterium breve, що мають профілактичну і/або лікувальну дію на харчову алергію і/або інші атопічні захворювання. Дія нежиттєздатної Bifidobacterium breve в композиціях була співставима з дією життєздатних клітин B. breve. Дослідження протиалергійної дії інактивованої B. breve не можна було пояснити безпосередньою пробіотичною дією, такою як покращення флори, оскільки клітини вже були мертвими і тому незбільшувалась кількість клітин B. breve в мікрофлорі. На сьогодні, сприятлива дія B. breve обумовлювалась присутністю живих клітин. Дія нежиттєздатних клітин B. breve була впівставима, але трохи меншою ніж у випадку живих B. breve. Винахідниками неочікувано було встановлено, що дія нежиттєздатної B. breve може навіть трохи поліпшуватись в присутності незасвоюваних олігосахаридів. Це є 1 UA 100985 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 неочікуваним, оскільки загалом в синбіотичних рецептурах присутній незасвоюваний олігосахарид стимулює присутність пробіотичної бактерії і тому проявляє покращену дію. Винахідниками неочікувано знайшли, що в рецептурах, що також містять інактивовану B. breve, яка не здатна використовувати і одержувати користь від присутніх незасвоюваних олігосахаридів, також спостерігається поліпшення дії порівняно з окремими сполуками. Незасвоювані олігосахариди стимулюють кишкову мікрофлору немовляти і/або дитини, особливо кількості біфідобактерії і/або молочнокислої бактерії. Одночасне покращення мікрофлори харчуванням немовлят і/або дітей незасвоюваними олігосахаридами, з одночасним введенням нежиттєздатної B. breve, призводить до поліпшеної дії при профілактиці і/або лікуванні розладів, таких як профілактична дія на інфекції, діарею, запор, шлунково-кишкові запалення, кишкове визрівання, алергію, особливо харчову алергію, атопічний дерматит і/або астму. Детальний опис винаходу Представлений винахід стосується харчування немовляти і/або дитини, що містить незасвоюваний олігосахарид A і/або B і нежиттєздатну Bifidobacterium breve в кількості 3 еквівалентній принаймні 10 куо на г сухої маси харчування немовляти і/або дитини, і містить 3 життєздатну Bifidobacterium breve в кількості менше ніж 10 куо на г сухої маси харчування немовляти і/або дитини. В одному з аспектів, представлений винахід стосується способу харчування немовляти і/або дитини. В наступному аспекті, представлений винахід стосується способу лікування і/або попередження алергії, переважно харчової алергії, і/або атопічних захворювань включаючи атопічну екзему і/або астму, де згаданий спосіб включає введення представленого харчування для немовляти і/або дитини суб'єктові. В ще одному наступному аспекті, представлений винахід стосується способу лікування і/або попередження інфекції, де згаданий спосіб включає введення представленого харчування для немовляти і/або дитини суб'єктові. В ще одному наступному аспекті, представлений винахід стосується способу лікування і/або попередження пелюшкового дерматиту, де згаданий спосіб включає введення представленого харчування для немовляти і/або дитини суб'єктові. Іншими словами, представлений винахід стосується застосування представленого харчування для немовляти і/або дитини, для виготовлення композиції або харчування для лікування і/або профілактики алергії, переважно харчової алергії, атопічних захворювань, включаючи атопічну екзему, і/або астми, або, іншими словами, представлений винахід стосується представленого харчування для немовляти і/або дитини, для застосування при лікуванні і/або профілактиці алергії, переважно харчової алергії, атопічної екземи і/або астми. Також, альтернативно, представлений винахід стосується застосування представленого харчування для немовляти і/або дитини, для виготовлення композиції або харчування для лікування і/або профілактики інфекції або, іншими словами, представлений винахід стосується представленого харчування для немовляти і/або дитини, для застосування при лікуванні і/або профілактиці інфекції. Також, альтернативно, представлений винахід стосується застосування представленого харчування для немовляти і/або дитини, для виготовлення композиції або харчування для лікування і/або профілактики пелюшкового дерматиту або, іншими словами, представлений винахід стосується представленого харчування для немовляти і/або дитини, для застосування при лікуванні і/або профілактиці пелюшкового дерматиту. Bifidobacterium breve Bifidobacterium breve є грам-позитивною, анаеробною, розгалуженою паличкоподібною бактерією. Представлена B. breve переважно має принаймні 95 % ідентичність з 16 S рРНК послідовністю порівняно з диким штамом B. breve ATCC 15700, більш переважно, принаймні, 97 % ідентичність (Stackebrandt & Goebel, 1994, Int. J. Syst. Bacteriol. 44:846-849). Біфідобактерія включена в композицію, способи і застосування представленого винаходу переважно гібридизується з B. breve зондом і дає сигнал в дослідженні з 5" нуклеазою, як описано в WO 2005039319. Переважно штами B. breve виділяються з екскрементів здорових немовлят, що годують людським молоком. Типово, вони є комерційно доступними від виробників молочнокислої бактерії, але вони також можуть бути виділені безпосередньо з екскрементів, ідентифіковані, охарактеризовані і продуковані. Відповідно до переважного втілення, представлена композиція містить принаймні, одну B. breve вибрану з групи, що містить B. breve Bb-03 (Rhodia/Danisco), B. breve M-16V (Morinaga), B. breve R0070 (Institute Rosell, Lallemand), B. breve BR03 (Probiotical), B. 2 UA 100985 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 breve BR92) (Cell Biotech) DSM 20091, і LMG 11613. Найбільш переважно, нежиттєздатною B. breve є нежиттєздатна B. breve M-16V (Morinaga). Найбільш переважно, нежиттєздатною B. breve є бактерія з штаму B. breve I-2219 депонована в CNCM Париж, Франція. Представлена композиція містить нежиттєздатну Bifidobacterium breve в кількості 3 еквівалентній принаймні 10 куо на г сухої маси композиції. Представлена композиція 313 переважно містить нежиттєздатну B. breve в кількості еквівалентній 10 10 колоній утворюючих 412 одиниць (куо) B. breve на грам сухої маси представленої композиції, переважно 10 10 , більш 511 510 переважно 10 10 , найбільш переважно в кількості еквівалентній 10 10 куо B. breve на грам сухої маси представленої композиції. Переважно, представлена композиція містить 413 5 12 нежиттєздатну B. breve в кількості еквівалентній 10 10 , більш переважно від 10 до 10 , 611 найбільш переважно еквівалентній 10 510 колоній утворюючих одиниць (куо) B. breve на грам загального незасвоюваного олігосахариду. Доза нежиттєздатної B. breve згідно з 414 представленим винаходом переважно вводиться в добовій дозі еквівалентній 10 10 , більш 5 13 612 переважно від 10 до 10 , навіть більш переважно еквівалентній 10 10 , найбільш переважно 811 10 510 колоній утворюючих одиниць (куо). Коли композиція є рідкою, композиція переважно 414 містить кількість еквівалентну 10 10 колоній утворюючих одиниць (куо) нежиттєздатної B. 513 612 breve на 100 мл представленої композиції, переважно 10 10 , більш переважно 10 10 , 611 найбільш переважно еквівалентну 10 10 куо B. breve на 100 мл представленої композиції. 3 Кількість нежиттєздатної Bifidobacterium breve еквівалентна принаймні 10 куо на г сухої маси означає нежиттєздатну Bifidobacterium breve в кількості, яка є еквівалентною кількості 3 принаймні 10 куо B. breve на г сухої маси. Еквівалент куо може бути визначений шляхом проведення 5’нуклеазного дослідження використовуючи зонди і праймери B. Breve, як описано в WO 2005039319, в продукті (тобто, молочна суміш для немовлят), що містить нежиттєздатну B. breve і порівняно її з калібрувальною кривою одержаною з порівнюваного продукту (наприклад, стандартної молочної суміші для немовлят) для якої була додана відома кількість куо висушеної життєздатної B. breve. Висушену життєздатну біфідобактерію можна одержати з комерційних джерел, як описано вище. Значення куо на калібрувальній кривій одержаної для життєздатної або живою B. Breve, яка має таку ж саму відповідь в 5’нуклеазному дослідженні як продукт, що включає інактивовану B. Breve, розглядається як еквівалентне кількості куо нежиттєздатної B. breve. Альтернативно, кількість куо на г сухої маси можна визначити в композиції безпосередньо перед стадією інактивації. Присутність високих кількостей життєздатної біфідобактерії буде приводити до постокислення в рідких молочних сумішах немовлят. Тому, представлена композиція містить 3 2 менше ніж 10 куо життєздатної біфідобактерії, переважно менше ніж 10 , більш переважно менше ніж 10 куо на г сухої маси композиції. В рідкій формі, представлена композиція містить 4 3 переважно менше ніж 10 куо життєздатної біфідобактерії, переважно менше ніж 10 , більш 2 переважно менше ніж 10 куо на 100 мл. Кфо життєздатної біфідобактерії можна визначити як описано в Ingham, S. C., 1999, J. Food Prot. 62 (1) p.77-80. Переважно композиція містить повністю не вимірювану кількість живої B. breve. Однак, повна відсутність живої B. breve є досить складним завданням або не може бути визначена. Відповідно, відсутність живої B. breve може бути визначена за допомогою планшетних способів, як визначена нижче межа 3 детектування. Ця межа детектування становить 10 куо/г сухої маси композиції. Нежиттєздатна B. breve в представленій заявці стосується мертвої B. breve, B. Breve, що не здатна до культивування, B. Breve, що не росте, і/або (метаболічно) неактивної B. breve. Клітини B. breve можна зробити нежиттєздатними за допомогою відомих в цій галузі способів, включаючи стадії теплової обробки (включаючи стерилізацію, пастеризацію, UHT обробку), радіаційну обробку (УФ), обробку киснем, обробку бактерицидами, такими як етанол, сонікування, обробкуультрависоким тиском, гомогенізацію високим тиском і використовуючи руйнівник клітин. Переважно, B. breve вбивають нагріванням. Присутність нежиттєздатної B. breve переважно попереджає і/або лікує, принаймні, один розлад, що вибирають з групи, яка містить інфекції, діарею, запор, шлунково-кишкові запалення, розлади викликані погіршенням кишкового визрівання, (харчові) алергії, атопічний дерматит, екзему і астму, і в той же час забезпечуючи багато технологічних переваг для продукту, включаючи збільшення терміну придатності, зменшення випадків бактеріального зараження, зменшення постокислення продукту, покращення контролю дози і покращення зручності відновлення. Незасвоювані олігосахариди Представлена композиція містить незасвоюваний олігосахарид A і/або B. Незасвоюваний олігосахарид A і/або B переважно стимулює ріст кишкової бактерії, що продукує молочну 3 UA 100985 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 кислоту, зокрема, біфідобактерії і/або молочнокислої бактерії і, таким чином, стимулює утворення здорової кишкової мікрофлори, і переважно ферментується в органічні кислоти. Утворені органічні кислоти стимулюють продукування слизу і, таким чином, покращують функцію кишкового бар'єру і/або визрівання у немовлят. Однак, присутність незасвоюваного олігосахариду A і/або B має корисну дію на інфекції, алергії і/або атопічні захворювання. Переважно, незасвоюваний олігосахарид A і/або B є водорозчинним (згідно із способом описаним в L. Prosky et al, J. Assoc. Anal. Chem 71: 1017-1023, 1988) і є олігосахаридом із ступенем полімеризації (СП) 2-200. (Середня) СП незасвоюваного олігосахариду A і/або B є переважно нижче 200, більш переважно нижче 100, навіть більш переважно нижче 60, найбільш переважно нижче 40. Незасвоюваний олігосахарид A і/або B не перетравлюється в кишечнику під дією травних ферментів присутніх у людському верхньому шлунково-кишковому тракті (тонка кишка і шлунок). Незасвоюваний олігосахарид A і/або B переважно ферментується кишковою мікрофлорою людини. Наприклад, глюкоза, фруктоза, галактоза, цукроза, лактоза, мальтоза і мальтодекстрини розглядаються як такі, що перетравлюються. Олігосахаридні матеріали можуть включати моносахариди, такі як глюкоза, фруктоза, фукоза, галактоза, рамноза, ксилоза, глюкуронова кислота, GalNac і т.і., але вони не є частиною олігосахаридів представленого винаходу. Незасвоюваний олігосахарид A і/або B, що включається в композиції, способи і застосування представленого винаходу включає суміш незасвоюваних олігосахаридів. Це є загальною практикою, оскільки застосування незасвоюваного олігосахариду з, наприклад, однією довжиною ланцюгу є дуже дорогим. Переважно, незасвоюваний олігосахарид вибирають з групи, що містить фрукто-олігосахарид (включаючи, інулін), незасвоюваний декстрин, галактоолігосахарид (включаючи, трансгалакто-олігосахарид), ксило-олігосахарид, арабіноолігосахарид, арабіногалакто-олігосахарид, глюко-олігосахарид (включаючи, гентіоолігосахарид і циклодекстрин), глюкомано-олігосахарид, галактомано-олігосахарид, мананолігосахарид, хіто-олігосахарид, олігосахарид уронової кислоти, сіалілолігосахарид (включаючи, 3-SL, 6-SL, LSTa, b,c, DSLNT, S-LNH, DS-LNH) і фуко-олігосахарид (включаючи, (ун)сульфатований фукоідан OS, 2-FL, 3-FL, LNFP I, II, III, V, LNnFPI, LNDH) і їх суміші, більш переважно фрукто-олігосахарид (включаючи, інулін), галакто-олігосахарид (включаючи, трансгалакто-олігосахарид,  і переважно  зв'язаний), олігосахарид уронової кислоти і фукоолігосахарид і їх суміші, навіть більш переважно трансгалакто-олігосахарид і/або інулін, найбільш переважно трансгалакто-олігосахарид. Коли незасвоюваний олігосахарид A і/або B є сумішшю, середні відповідні параметри використовуються для визначення представленого винаходу. Представлений винахід переважно забезпечує композицію з двома різними незасвоюваними олігосахаридами, тобто незасвоюваний олігосахарид A і незасвоюваний олігосахарид B. Незасвоюваний олігосахарид A і незасвоюваний олігосахарид B переважно мають різний тип глікозидного зв'язку, різний ступінь полімеризації і/або a різний моносахаридний склад. Згідно з переважним втіленням представленого винаходу, відсоток певного моносахариду в незасвоюваному олігосахариді A є, принаймні, на 40 кількісних% вище, ніж відсоток того ж самого моносахариду в незасвоюваному олігосахариді B, переважно, принаймні, на 50 %, більш переважно, принаймні, на 75 %, навіть більш переважно, принаймні, на 90 %. Збільшена різноманітність моносахаридів стимулює ширшу популяцію корисних кишкових бактерій. Відсоток моносахариду в незасвоюваному олігосахариді можна просто розрахувати шляхом ділення кількості відповідних моносахаридних залишків (наприклад, глюкози) в незасвоюваному олігосахариді на загальну кількість моносахаридних залишків в незасвоюваному олігосахариді і множення її на 100. Коли незасвоюваним олігосахаридам є суміш незасвоюваного олігосахариду, внесок кожного окремого моносахариду в суміш незасвоюваного олігосахариду повинна братись в кількісному вираженні. Відсоток моносахариду суміші незасвоюваного олігосахариду може бути просто визначений шляхом повного гідролізу суміші і визначення відсотку кожного моносахариду. Переважно, незасвоюваний олігосахарид A містить, принаймні, 40 кількісних% галактози, більш переважно, принаймні, 67 % галактози, більш переважно, принаймні, 75 % галактози. Переважно, незасвоюваний олігосахарид B містить, принаймні, 30 кількісних% фруктози, більш переважно, принаймні, 67 % фруктози, навіть більш переважно, принаймні, 80 % фруктози. Згідно з переважним втіленням представленого винаходу, середня СП незасвоюваного олігосахариду A є принаймні на 5 моносахаридних залишків нижче ніж середня СП незасвоюваного олігосахариду B, переважно, принаймні, на 10, навіть більш переважно, принаймні, на 15. Переважно, незасвоюваний олігосахарид A має середню СП 2-10, більш переважно 3-5. Переважно, незасвоюваний олігосахарид B має середню СП нижче 200, більш 4 UA 100985 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 переважно 11-60, навіть більш переважно 20-30. Включаючи незасвоюваний олігосахарид з підвищеним ступенем полімеризації зменшується осмотичне навантаження, що є корисним для харчування немовлят і/або поліпшення пребіотичної стимуляції кишкової мікрофлори також в більшості перефиричних частин товстої кишки. Незасвоюваний олігосахарид A і B з різною СП можуть мати такий же самий або різний моносахаридний склад. Переважно, незасвоюваний олігосахарид A і B мають різний моносахаридний склад і різну СП. Переважно, принаймні, 80 мас. %, більш переважно, принаймні, 95 мас. %, найбільш переважно, принаймні, 98 мас. % загальної маси незасвоюваного олігосахариду A і B має СП нижче 60, більш переважно нижче 40, найбільш переважно нижче 20. Нижчий СП переважно зменшує в'язкість і підвищує ферментованість незасвоюваних олігосахаридів. Переважно, принаймні 50 мас. %, переважно принаймні 75 мас. % загальної маси незасвоюваного олігосахариду A і B є незасвоюваними олігосахаридами з СП 2-8. При використанні суміші з високим масовим відсотком малих незасвоюваних олігосахаридів збільшується ферментованість і стимулююча дія на ріст молочнокислої бактерії і біфідобактерії. В наступному переважному втіленні представленого винаходу, відсоток, принаймні, одного глікозидного зв'язку незасвоюваного олігосахариду A виходячи із загальної кількості глікозидних зв'язків незасвоюваного олігосахариду A є, принаймні, на 40 % вище або нижче, ніж відсоток того ж самого глікозидного зв'язку в олігосахариді B, переважно, принаймні, на 50 %, навіть більш переважно, принаймні, на 75 %. Термін "глікозидний зв'язок", як використовується в представленому винаході, стосується C-O-C зв'язку утворюваному між кільцями двох циклічних моносахаридів шляхом відщеплення води. Збільшення різноманітності глікозидних зв'язків стимулює ширшу популяцію корисних бактерій. Глікозидні зв'язки відрізняються тим, що вони ковалентно зв'язують атоми вуглецю в моносахаридних залишках в різних положеннях, і/або що вони можуть утворювати α або β зв'язки. Прикладами різних глікозидних зв'язків, що зустрічаються в незасвоюваних сахаридах, є β(1,3), α(1,4), β(2,1), α(1,2), і β(1,4) зв'язки. Переважно, глікозидні зв'язки в незасвоюваному олігосахариді A включають, принаймні, 40 % β(1,4) і/або β(1,6) глікозидних зв'язків, більш переважно, принаймні, 75 %. Глікозидні зв'язки в незасвоюваному олігосахариді B переважно включають, принаймні, 40 % β(2,1) глікозидних зв'язків, більш переважно, принаймні, 75 %. Переважно, незасвоюваний олігосахарид A і B відрізняються за складом моносахаридних залишків і за типом глікозидних зв'язків. Переважно, незасвоюваний олігосахарид A і B відрізняється за типом глікозидного зв'язку і СП. Найбільш переважно, незасвоюваний олігосахарид A і B відрізняється за типом глікозидного зв'язку, складом моносахариду і СП, для того щоб оптимально поліпшувати біологічну різноманітність і стимулювати ріст багатьох кишкових організмів, особливо різних видів Bifidobacterium. Переважно, принаймні, 60 %, більш переважно, принаймні, 75 %, навіть більш переважно 90 %, найбільш переважно 98 %, від загальної кількості моносахаридних залишків незасвоюваного олігосахариду A і B є моносахаридами вибраними з групи, що включає галактозу (gal), фруктозу (fru) і глюкозу (glu). Незасвоюваним олігосахаридом A є переважно олігосахариди, що вибирають з групи, яка містить β-галакто-олігосахарид, α-галакто-олігосахарид і галактан. Згідно з більш переважним втіленням незасвоюваним олігосахаридом A є β-галакто-олігосахарид або трансгалактоолігосахарид. Переважно, незасвоюваний олігосахарид A містить галакто-олігосахариди з β(1,4) і/або β(1,6) глікозидними зв'язками і термінальну глюкозу. Трансгалакто-олігосахарид, наприклад, доступний під торговою назвою Vivinal®GOS (Borculo Domo Ingredients, Zwolle, Netherlands), Bi2muno (Clasado), Cup-oligo (Nissin Sugar) і Oligomate55 (Yakult). Незасвоюваним олігосахаридом B є переважно фрукто-олігосахарид. Фрукто-олігосахарид може в іншому контексті мати назву - фруктополісахариди, олігофруктоза, поліфруктоза, поліфруктан, інулін, леван і фруктан і може стосуватись олігосахаридів, що включають βзв'язані фруктозні залишки, які переважно є зв'язаними β(2,1) і/або β(2,6) глікозидними зв'язками, і переважно СП від 2 до 200. Переважно, фрукто-олігосахарид містить термінально β(2,1) глікозидприєднану глюкозу. Переважно, фрукто-олігосахарид містить принаймні 7 βзв'язані фруктози. В наступному переважному втіленні, інулін використвоується як незасвоюваний олігосахарид B. Інулін є типом фрукто-олігосахариду, де, принаймні, 75 % глікозидних зв'язків є β(2,1) зв'язаними. Типово, інулін має середню довжину ланцюгу від 8 до 60 моносахаридних залишків. Придатний фрукто-олігосахарид для використання в композиціях представленого винаходу є комерційно доступним під торговими назвами Raftiline®HP (Orafti). Іншими придатними джерелами є рафтілоза (Orafti), фібрулоза і фібрулін (Cosucra) і Фрутафіт і фруталоза (Sensus). Найбільш переважним є трансгалакто-олігосахарид з середньою СП нижче 10, переважно нижче 6, як незасвоюваний олігосахарид A, і фрукто-олігосахарид з середньою СП вище 7, 5 UA 100985 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 переважно вище 11, навіть більш переважно вище 20, як незасвоюваний олігосахарид B, оскільки, така комбінація, як було встановлено, є оптимальною для поліпшення кишкової мікрофлори. Якщо композиція містить незасвоюваний олігосахарид A і B, масове співвідношення незасвоюваного олігосахариду A до незасвоюваного олігосахариду B є переважно від 1/99 до 99/1, більш переважно від 1/19 до 19/1, навіть більш переважно від 1 до 19/1. Це масове співвідношення є особливо корисним, коли незасвоюваний олігосахарид A має низьку СП і незасвоюваний олігосахарид B має відносно високу СП. Це гарантує оптимальну рівновагу між осмотичною концентрацією розчину і придатністю до ферментації. Це також гарантує оптимальну дію різноманітності складу моносахариду, глікозидних зв'язків і/або ступеня полімеризації. Переважно олігосахаридом A є трансгалакто-олігосахарид і олігосахаридом B є фрукто-олігосахарид Таким чином, згідно з одним з втілень представлене харчування для немовляти містить незасвоювані олігосахариди A і B, де незасвоювані олігосахариди A і B відрізняються або: і) за відсотком, принаймні, одного моносахариду олігосахариду A виходячи із загальної кількості моносахаридних залишків олігосахариду A, де вміст моносахариду є принаймні на 40 кількісних% вищим, ніж відсоток того ж самого моносахариду в олігосахариді B; і/або іі) за відсотком, принаймні, одного глікозидного зв'язку олігосахариду A виходячи із загальної кількості глікозидних зв'язків олігосахариду A, де вміст глікозидного зв'язку є принаймні на 40 кількісних% вищим, ніж відсоток того ж самого глікозидного зв'язку в олігосахариді B; і/або ііі) за ступенем полімеризації олігосахариду A, де ступінь полімеризації олігосахариду A є принаймні на 5 моносахаридних залишків нижче, ніж ступінь полімеризації олігосахариду B. В переважному втіленні представлена композиція також містить незасвоюваний олігосахарид C. Незасвоюваний олігосахарид C містить олігосахариди уронової кислоти. Термін олігосахарид уронової кислоти, як використовується в представленому винаході, стосується олігосахариду, в якому принаймні 50 кількісних% моносахаридних залишків присутніх в олігосахариді є залишками, що вибирають з групи, яка містить гулуронову кислоту, мануронову кислоту, галактуронову кислоту, ідуронову кислоту, рибуронову кислоту і глюкуронову кислоту. В переважному втіленні, олігосахарид уронової кислоти містить, принаймні, 50 кількісних% галактуронової кислоти виходячи із загальної кількості залишків уронової кислоти в олігосахариді уронової кислоти. Олігосахариди уронової кислоти використовувані в винаході переважно одержують деградацією пектину, пектату, алгінату, хондроітину, гіалуронової кислоти, гепарину, гепарану, бактеріальних вуглеводів, і/або сіалогліканів, більш переважно пектину і/або алгінату, навіть більш переважно пектину, найбільш переважно полігалактуронової кислоти. Переважно, деградований пектин одержують гідролізом і/або бетаелімінуванням фруктових і/або рослинних пектинів, більш переважно яблучного, цитрусового пектину і/або пектину цукрового буряку, навіть більш переважно яблучного, цитрусового пектину і/або пектину цукрового буряку деградованого за допомогою, принаймні, однієї ліази. Переважно, представлена композиція містить від 25 до 100 мас. %, більш переважно від 50 до 100 мас. % олігосахариду уронової кислоти із СП від 2 до 250 виходячи із загальної маси олігосахариду уронової кислоти в композиції, більш переважно СП від 2 до 100, навіть більш переважно СП від 2 до 50, найбільш переважно СП від 2 до 20 виходячи із загальної маси олігосахариду уронової кислоти в композиції. В переважному втіленні, принаймні, одна з термінальних уронових кислот олігосахариду уронової кислоти має подвійний зв'язок. Подвійний зв'язок ефективно захищає від приєднання патогенної бактерії до епітеліальних клітин кишечнику. Це є корисним для немовлят. Переважно, одна з термінальних уронових кислот містить C4-C5 подвійний зв'язок. Подвійний зв'язок в термінальній уроновій кислоті може, наприклад, бути одержаний шляхом ферментного гідролізу пектину ліазою. Олігосахарид уронової кислоти може бути модифікований. Олігосахарид уронової кислоти може бути метоксильований і/або амідований. В одному з втілень, олігосахариди уронової кислоти характеризуються ступенем метоксилювання вище 20 %, переважно вище 50 %, навіть більш переважно вище 70 %. Як тут використовується, "ступень метоксилювання" (також згадується як СЕ або "ступень естерифікації") призначений для вираження міри, з якою естерифковані вільні карбоксильні групи, що містяться в олігосахариді уронової кислоти (наприклад, метильовані). Переважно, композиція містить незасвоювані олігосахариди - трансгалакто-олігосахарид, фрукто-олігосахарид і продукт деградації пектину. Масове співвідношення трансгалакто 6 UA 100985 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 олігосахарид: фрукто-олігосахарид: продукт деградації пектину становить переважно (20-2): 1: (1-3), більш переважно (12-7): 1: (1-2). Представлена композиція переважно містить 0,05-20 мас. % незасвоюваного олігосахариду (A+B + C), більш переважно 0,5-15 мас. %, навіть більш переважно 1-10 мас. %, найбільш переважно 2,0-10 мас. % виходячи з сухої маси представленої композиції. Молочні суміші Представлене харчування для немовляти і/або дитини переважно вводиться етентерально, більш переважно орально. Представлене харчування для немовляти і/або дитини переважно використовується як молочна суміш для немовлят. Представлене харчування для немовляти і/або дитини можна переважно використовувати як єдине повне харчування для немовлят. Така їжа переважно містить жир, протеїн і вуглевод і переважно вводиться в рідкій формі. Переважно, композиція є готовим до використання рідким харчовим продуктом, наприклад, є готовою до вживання рідкою формою. Розфасована готова до вживання рідка їжа переважно включає менше стадій одержання ніж порошкова, що розводиться, і, тому, зменшується імовірність забруднення шкідливими мікроорганізмами. Тому, представлений винахід також стосується харчування для немовляти і/або дитини, яке переважно містить від 5 до 50 ен% жиру, від 5 до 50 ен% протеїну, від 15 до 90 ен% вуглеводу і нежиттєздатну B. breve і незасвоюваний олігосахарид A і/або B і, необов'язково, C. Переважно, представлене харчування для немовляти і/або дитини містить від 35 до 50 ен% жиру, від 7,5 до 12,5 ен% протеїну і від 35 до 80 ен% вуглеводу (ен% є скороченням для енергетичного відсотку і представляє відносну кількість кожного складового, що впливає на загальне значення калорійності рецептури). Переважно, харчування для немовляти і/або дитини містить жири. Переважно, харчування для немовляти і/або дитини містить рослинні жири. Переважно, жировий компонент є комбінацією рослинних жирів і, принаймні, однієї олії, що вибирають з групи, яка містить риб'ячу, тваринну, водоростеву і бактеріальну олію. Переважно, жир містить понад 50 мг/100 ккал (переважно понад 1 мас. % виходячи із загальної кількості жирних кислот) α-ліноленову кислоту (ALA). Переважно, жирова композиція має мас/мас співвідношення лінолева кислота (LA) до ALA від 4 до 15, більш переважно від 5 до 8. Переважно, представлене харчування длянемовляти і/або дитини містить довголанцюгові поліненасичені жирні кислоти (LC-PUFA), більш переважно ейкозапентаєнову кислоту (EPA), і/або докозагексаєнову кислоту (DHA), і/або арахідонову кислоту (ARA). Переважно, харчування для немовляти і/або дитини містить, виходячи із загальної кількості жирних кислот, 0,03-0,8 мас. %, більш переважно 0,12-0,4 мас. % DHA. Переважно, композиція містить, виходячи із загальної кількості жирних кислот, 0,01-0,2 мас. %, більш переважно 0,03-0,1 мас. % EPA. Переважно, композиція містить 0,03-1,6 мас. %, більш переважно 0,12-0,8 мас. % ARA, виходячи із загальної кількості жирних кислот. Присутність LC-PUFA переважно зменшує кишкову проникність або поліпшує імунну систему або обидва чинники, таким чином, обумовлюючи синергічну дію з іншими компонентами винаходу стосовно дії проти алергії, атопічного дерматиту, інфекцій і т.і… Переважно, харчування для немовляти і/або дитини містить протеїни. Протеїни, що використовуються при одержанні харчування, переважно вибирають з групи, що містить тваринні протеїни (такі як молочні протеїни, включаючи казеїни і сироваткові протеїни, протеїни м'яса і протеїни яєць), рослинні протеїни (такі як, соєвий протеїн, пшеничний протеїн, рисовий протеїн, картопляний протеїн і гороховий протеїн), гідролізати (частково і/або повністю), вільні амінокислоти і їх суміші. Особливо переважним є джерело азоту одержане з коров'ячого молока, зокрема, протеїни коров'ячого молока, такі як казеїн і сироваткові протеїни, оскільки, амінокислотний склад цих протеїнів є добре збалансованим. Оскільки представлена композиція є придатною для використання для зниження алергійної реакції у немовляти і/або дитини, протеїн харчування для немовляти переважно вибирають з групи, що містить гідролізований протеїн молока (наприклад, гідролізований казеїн і/або гідролізований сироватковий протеїн), гідролізований рослинний протеїн і/або амінокислоти. Застосування цих протеїнів також зменшує алергійні реакції у немовлят і/або дітей і/або збільшує абсорбцію протеїну. Переважно, джерело протеїну є сильно і/або частково гідролізованим. Більш переважно, джерелом протеїну є сильно гідролізований сироватковий протеїн одержаний з коров'ячого молока. Переважно, харчування немовляти і/або дитини містить засвоювані вуглеводи. Засвоювані вуглеводи використовувані при одержанні харчування, переважно, вибирають з групи, що містить цукрозу, лактозу, мальтозу, галактозу, глюкозу, фруктозу, тверді кукурудзяні сиропи, крохмаль і мальтодекстрини і їх суміші, більш переважно лактозу. Представлене харчування для немовляти і/або дитини переважно містить мінерали, мікроелементи і вітаміни, холін, таурин, карнітин, міоінозит і/або їх суміші. Переважно, 7 UA 100985 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 представлена композиція містить таурин, який зменшує симптоми астми (Adv. Exp. Med. Biol. 2003 526:403-10). Таурин діє синергічно з компонентами представленого харчування для немовляти і/або дитини. Переважно, представлене харчування для немовляти і/або дитини містить нуклеотиди. Переважно, композиція містить цитидин 5’-монофосфат, уридин 5’монофосфат, аденозин 5’-монофосфат, гуанозин 5’-монофосфат і інозин 5’-монофосфат. Переважно, представлене харчування для немовляти і/або дитини містить 0,005-0,07, більш переважно 0,01-0,035 мас. % нуклеотидів виходячи з сухої маси. Присутність нуклеотидів переважно діє на імунну систему, кишковий бар'єр і/або кишкову мікрофлору. Таким чином, очікується, що нуклеотиди проявляють синергічну дію з іншими компонентами винаходу стосовно дії проти алергії, атопічного дерматиту, інфекцій і т.і… Переважно, представлене харчування для немовляти і/або дитини містить і LC-PUFA, і нуклеотиди. Переважно, представлене харчування для немовляти і/або дитини є композицією, що не ферментується. Ферментування мікроорганізмами призводить до зниження pH, що може бути шкідливим для новоутворених зубів. Переважно, композиція має pH вище 5,5, більш переважно 6,0, навіть більш переважно 6,5 для того щоб зменшити пошкодження зубів. Переважно, харчування для немовляти і/або дитини має pH від 6 до 8. Переважно, представлене харчування для немовляти і/або дитини є композицією, що ферментується. Переважно, представлене харчування містить молочний продукт, що ферментується Bifidobacterium breve, клітини якої є інактивованим після ферментації. Молочний продукт, який ферментується B. Breve, містить фрагменти або/і продукти виділені B. breve, такі як глікопротеїни, гліколіпіди, пептидоглікан, ліпотейхоєва кислота (LTA), ліпопротеїни, капсулярні полісахариди і/або ДНК. Ці імуногенні молекули викликають толерантність кишкового тракту проти колонізації бактеріями, що продукують молочну кислоту. Крім того, при ферментації і/або іншій взаємодії B. breve з молочними продуктами, можуть утворюватись додаткові біоактивні сполуки, такі як біоактивні пептиди і/або олігосахариди, які також стимулюють імунну систему і/або стимулюють колонізацію кишкової мікрофлори. Молочний продукт переважно вибирають з групи, що містить молоко, казеїн, казеїновий протеїн, гідролізат казеїнового протеїну, казеїнові пептиди, сироватка, сироватковий протеїн, гідролізат сироваткового протеїну, сироваткові пептиди і лактоза або їх суміші. Молоком може бути цільне молоко, напів-зняте молоко і/або зняте молоко. Сироваткою може бути солодка сироватка і/або кисла сироватка. Переважно, водним субстратом, що ферментується, зняте молоко. Проблеми зі стулом (наприклад, твердий стул, недостатній об'єм стулу, діарея) є основною проблемою у багатьох дітей. Було знайдено, що проблеми зі стулом можуть бути зменшені шляхом введення представленої комбінації нежиттєздатної B. breve і незасвоюваного олігосахариду в рідкому харчовому продукті, який має осмотичність від 50 до 500 мОсм/кг, більш переважно від 100 до 400 мОсм/кг. З огляду на викладене вище, також важливо, що рідка харчова композиція не має надмірної калорійності, однак, забезпечує достатньо калорій для харчування суб'єкта. Тому, рідкий харчовий продукт переважно має калорійність від 0,1 до 2,5 ккал/мл, навіть більш переважно калорійність від 0,4 до 1,2 ккал/мл, найбільш переважно від 0,55 до 0,75 ккал/мл. Представлене харчування для немовляти і/або дитини переважно має в'язкість від 1 до 60 мПа.с, переважно від 1 до 20 мПа.с, більш переважно від 1 до 10 мПа.с, найбільш переважно від 1 до 6 мПа.с. Низька в'язкість гарантує відповідне введення рідини, наприклад, гарантує проходження через отвір соски. Також ця в'язкість точно відповідає в'язкості людського молока. Крім того, низька в'язкість забезпечує нормальне потрапляння в шлунок і краще поглинання енергії, що є важливим для немовлят і/або дітей, які потребують енергії для оптимального росту і розвитку. Представлену композицію переважно одержують шляхом змішування порошкової композиції з водою. Зазвичай молочну суміш для немовляти одержують таким шляхом. Крім того, представлений винахід також стосується розфасованої порошкової композиції, де згадане упакування має інструкцію по змішуванню порошку з придатною кількістю рідини, для того щоб одержати рідку композицію з в'язкістю від 1 до 60 мПа.с. В'язкість рідини визначають використовуючи Physica Rheometer MCR 300 (Physica -1 Messtechnik GmbH, Ostfilden, Germany) із швидкістю зсуву 95 с при 20 C. Включення нежиттєздатної B. breve збільшує термін зберігання харчування для немовляти і/або дитини, зокрема, порівняно з харчуванням для немовляти і/або дитини, що містить життєздатну B. breve. Це особливо корисно для рідкого харчування для немовляти і/або дитини. Таким чином, харчування для немовляти і/або дитини згідно з представленим винаходом переважно зберігається при кімнатній температурі протягом принаймні 6 місяців, переважно принаймні 12 місяців, переважно, коли харчування для немовляти і/або дитини знаходиться в рідкій готовій до вживання формі. 8 UA 100985 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 Застосування Харчування для немовляти і/або дитини згідно з представленим винаходом є особливо корисним для харчування передчасно народжених дітей, вчасно народжених дітей (як вагінально народжених, так і немовлят народжених внаслідок кесаревого розтину), немовлят, які знаходяться на стадії адаптації до твердої їжі, немовлят і/або дітей з підвищеним ризиком до або що страждають на алергію, і/або немовлят і/або дітей з підвищеним ризиком до інфекції, таких як немовлята і/або діти, що перебувають на догляді в денному стаціонарі, або страждають від інфекції. Винахід є особливо корисним для вагінально народжених немовлят. Винахід є особливо корисним для немовлят народжених внаслідок кесаревого розтину, оскільки, ці немовлята мають погіршену колонізацію мікробами товстої кишки. Тому, представлений винахід забезпечує спосіб годування немовляти і/або дитини людини, де згаданий спосіб включає введення немовляті і/або дитині представленої композиції. Переважно, немовля і/або дитина має вік від 0 до 36 місяців, навіть більш переважно від 0 до 18 місяців, найбільш переважно від 0 до 12 місяців. В переважному втіленні, представлений винахід забезпечує спосіб годування немовляти людини віком 0-12 місяців. В переважному втіленні, представлений винахід забезпечує спосіб годування дитини людини віком 12-36 місяців. Представлений винахід також забезпечує спосіб покращення здоров'я немовляти і/або дитини, що включає введення композиції, що містить нежиттєздатну B. breve і незасвоюваний олігосахарид A і/або B і, необов'язково, C, немовляті і/або дитині. Крім того, представлений винахід також забезпечує спосіб покращення здоров'я немовляти і/або дитини, що включає стадії a) змішування i) зокрема, нутрецевтично або фармацевтично прийнятної рідини; і ii) сухої композиції, де суха композиція містить B. breve і незасвоюваний олігосахарид A і/або B і, необов'язково, C, і стадію б) введення композиції одержаної на стадії a) немовляті і/або дитині. Введення немовляті харчування, що містить нежиттєздатну B. breve і незасвоюваний олігосахарид, переважно, призводить до поліпшення кишкової мікрофлори через збільшення кількості бактерій, що продукують молочну кислоту, і/або через зменшення кількості патогенних бактерій, і/або через стимулювання імунної системи. Переважно, харчування для немовляти і/або дитини, що містить нежиттєздатну B. breve і незасвоюваний олігосахарид A і/або B і, необов'язково, C, використовується в способі для лікування і/або профілактики шлунковокишкових розладів і/або імунних розладів у немовлят і/або дітей, згаданий спосіб включає введення згаданої композиції немовляті і/або дитині. Представлене харчування може бути особливо придатним для лікування алергії (більш особливо, харчової алергії), алергічного риніту, харчової гіперчутливості, атопічного дерматиту, тобто, алергійної або атопічної екземи, зокрема, свербіжу шкіри викликаного дерматитом, алергічного кон'юнктивіту, астми, зокрема, задухи викликаної астмою, діареї, кишкового запалення, інфекції, запору, кишкових судомів і/або колік. В переважному втіленні, представлений винахід забезпечує спосіб лікування і/або профілактики (харчової) алергії, алергічного риніту, харчової гіперчутливості, екземи (тобто, атопічного дерматиту), астми, діареї, кишкового запалення і/або інфекції. Переважно, представлений винахід забезпечує спосіб лікування і/або профілактики інфекції і/або діареї. В переважному втіленні, представлений винахід забезпечує спосіб лікування і/або профілактики (харчової) алергії, астми і/або атопічного дерматиту. Зменшується кількості випадків цих захворювань завдяки покращенню мікрофлори, покращенню імунної системи і/або зменшенню транслокації алергенів через кишковий бар'єр. В одному з втілень, композиція використовується для покращення шкіри і зменшення звербіжу шкіри у немовля і/або дитини. В одному з втілень, композиція використовується для зменшення задухи у немовля і/або дитини. Крім того, введення харчування для немовляти і/або дитини, що містить нежиттєздатну B. breve і незасвоюваний олігосахарид, підсилює імунну систему. В одному з втілень, харчування для немовляти і/або дитини, що містить нежиттєздатну B. breve і незасвоюваний олігосахарид A і/або B і, необов'язково, C, використовується в способі лікування або профілактики системних і/або респіраторних інфекцій і/або запалення у немовлят і/або дітей, де згаданий спосіб включає введення згаданого харчування для немовляти немовляті і/або дитині. Переважно, харчування для немовляти і/або дитини, що містить нежиттєздатну B. breve і незасвоюваний олігосахарид A і/або B і, необов'язково, C, використовується в способі лікування або профілактики пелюшкового дерматиту (або подразнення шкіри від пелюшок, пелюшковового дерматиту), у немовлят і/або дітей, де згаданий спосіб включає введення згаданого харчування для немовляти немовляті і/або дитині. 9 UA 100985 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 Переважно, харчування для немовляти і/або дитини, що містить нежиттєздатну B. breve і незасвоюваний олігосахарид A і/або B і, необов'язково, C, використовується в способі лікування або профілактики колік і/або абдомінальних судом, здуття, метеоризму, абдомінального болю, запору, запального захворювання кишечнику, синдрому подразненого кишечнику, і/або для поліпшення мінералізації кісток, і/або профілактики ожиріння в похилому віці (зокрема, центрального ожиріння), у немовлят і/або дітей, де згаданий спосіб включає введення згаданого харчування для немовляти немовляті і/або дитині. В цьому документі і в пунктах формули винаходу, дієслово "містить" і його спряження використовуються в їх необмежуючому сенсі в значенні, що включає елементи, які ідуть за словом, але елементи спеціально не включені не виключаються. Приклади Приклад 1: Нежиттєздатна B. breve має протиалергійну дію Самців BALB/c мишей (6-8 тижнів) одержували від Чарльз Рівер (Someren, The Netherlands). Мишей поміщали окремо в клітки типу II з напівсинтетичною їжею (AING93) на основі рецептури росту Американського інституту харчування (1993) і водою, які одержували без обмеження. Мишей розподіляли на різні групи для лікування A-D (N=6) і кожну групу розділяли на дві підгрупи по 3 тварини в підгрупі. Друга підгрупа починала із затримкою один тиждень. Активну сенсибілізацію проводили за допомогою двох інтраперітонеальних ін'єкцій на день 0 і день 7. Мишей з негативної контрольної групи (група A) сенсибілізували використовуючи салін забуферений фосфатом (PBS), що містить 2,25 мг гідроксиду алюмінію і 2,25 гідроксиду магнію, як ад'ювант (Alum inject, Pierce) в об'ємі 100 мкл і.п. ін'єкції. Мишей з інших груп сенсибілізували використовуючи 10 мкг овальбуміну (OVA) в PBS (фільтрованого через 0,2 мкм), що містить 2,25 мг гідроксиду алюмінію і 2,25 мг гідроксиду магнію (Alum Imject, Pierce) в об'ємі 100 мкл і.п. ін'єкції. Через чотири тижні після останньої ін'єкції (на 35, 38 і 41 день), мишей з груп B, C, і D обробляли протягом 20 хвилин розпиленим овальбуміну (10 мг/мл) (загалом 3 рази одним аерозолем протягом 20 хвилин). Мишей з групи A обробляли аерозолем саліну. Аерозолі одержували з розпилювача Джет (Pari IS-2, Pari-Werk GmbH, Starnberg, Germany, розмір часточок 2-3 мікрони) з'єднаного з макролоновою кліткою, в яку поміщали мишей. Починаючи з 28 дня і закінчуючи 42 днем, мишей кожен день орально обробляли: Миші з 9 групи A і B одержували 200 мкл NaCl/день. Миші з групи C одержували 10 КФО Bifidobacterium breve M16-V в 200 мкл саліну і миші з групи D одержували таку ж саму кількість бактерії як і група C з тією різницею, що вона була інактивована нагріванням протягом 10 хвилин при 90 °C. 3 Композиція C містила менше ніж 10 куо живої B. breve на г сухої маси (тобто, нижче межі 9 детектування). Композиція C містила інактивовану B. breve в кількості еквівалентній 10 куо B. breve. На 41 день визначали базальну товщину вуха використовуючи підпружинений кронциркуль (Mitutoyo, Veenendaal, The Netherlands). Потім, мишей провокували за допомогою інтрадермальної ін'єкції 20 мкл OVA (40 мкг/мл в PBS) у вушні раковини обох вух після чого тварин анестезували використовуючи ізофлуран, O2 і N2O. Проводили подвійне вимірювання обох вух до і через 1, 6 і 24 години після провокації OVA анестезованих тварин. Результати приведені в Таблиці 1. Негативний контроль показав збільшення товщини вуха приблизно на 20 % порівняно з позитивним контролем, який приймали за 100 %. Обробка життєздатною B. breve показало тільки 45 % збільшення товщини вуха. Це вказує на зменшення алергійної реакції приблизно на 70 % порівняно з позитивним і негативним контролем. Нежиттєздатна B. breve дає 60 % збільшення товщини вуха. Це означає зменшення алергійної реакції приблизно на 52 % порівняно з позитивним і негативним контролем. Ці результати вказують на протиалергійну і/або імунополіпшувальну дію нежиттєздатної B. Breve, що співставимо (приблизно 75 %) з життєздатними клітинами B. breve. Це є неочікуваним, оскільки не передбачалось, що інактивована B. breve буде мати таку ж дію, оскільки не може спричиняти впливу через розвиток флори. Таблиця 1 Відсоток збільшення товщини вуха внаслідок алергійної реакції на овальбумін у balb/c мишей Група мишей, що обробляється Відносне збільшення вуха у % (сп) 10 Відносне зменшення алергійної реакції у % UA 100985 C2 Продовження таблиці 1 Група A, негативний контроль Група B, позитивний контроль Група C, обробка живою B. breve Група D, обробка нежиттєздатною B. breve * p < 0,05 порівняно з позитивним контролем. 5 10 15 20 25 30 35 20,49 (9,83) 100 (6,86) 45,13 (8,64)* 58,60 (13,12)* 100 0 69 52 Приклад 2 Комбінація нежиттєздатної B. breve і незасвоюваних олігосахаридів має підвищену протиалергійну дію порівняно з окремими компонентами. CH3/HeOuJ мишей (3-5 тижнів) одержували від Чарльз Рівер. Мишей поміщали окремо в клітки типу II з напівсинтетичною їжею вільною від протеїну коров'ячого молока і водою, які одержували без обмеження. Мишей розділяли на різні групи для обробки A-E (N=6) протягом 2 тижнів. Різними групами для обробки A-E (N=6) були група негативного контролю (група A), 9 група позитивного контролю (Група B), група, що одержувала 210 КФО Bifidobacterium breve M16-V, інактивовану нагріванням протягом 10 хвилин при 90 °C, на г дієти (група C), група, що одержувала 20 мг незасвоюваних олігосахаридів (TOS (одержували від Vivinal GOS, Borculo Domo) і lcFOS (Raftilin HP, Orafti) в м/м/ співвідношення 9/1 на г дієти (Група D), і група, що одержувала і анактивовану нагріванням B. Breve, і незасвоювані олігосахариди (Група E). Дієта 9 групи C і D містить, таким чином, інактивовану B. breve в кількості еквівалентній 210 КФО на г 3 дієти. Композиція містить менше ніж 1 10 куо живої B. breve/г дієти (кожне значення нижче межі детектування). Активну сенсибілізацію проводили за допомогою внутрішньошлункового годування через зонд на 14, 21, 28, 35, 42 і 49 день 0,5 мл сироваткового протеїну (DMV International, Veghel, 40 мг сироваткового протеїну/мл PBS, з токсином холери, 20 мкг/мл PBS, як адювант.) Мишей з негативної контрольної групи (група A) сенсибілізували PBS (салін забуферений фосфатом), що містить токсин холери, як ад'ювант. На 54 день, мишей з груп A, B, C, D і E провокували за допомогою інтрадермальної ін'єкції 20 мкл сироваткового протеїну (0,5 мг протеїну/мл PBS) в ліву вушну раковину. В праве вухо, як контроль, ін'єктували PBS. Вимірювали товщину вуха двічі використовуючи цифровий мікрометр (Mitutuyo, Veenendaal) в t=0 і t=1. t=0 і контрольний набряк правого вуха віднімали від товщини виміряної для лівого вуха в t=1. Результати показані в Таблиці 2. Негативний контроль показує збільшення товщини вуха на 36,0 мкм (значення 0 %) порівняно з позитивним контролем, 159,9 мкм, яке приймали за 100 %. Обробка нежиттєздатною B. breve показала тільки збільшення товщини вуха до 116,0 мкм. Це вказує на зменшення алергійної реакції приблизно на 35 % порівняно з позитивним і негативним контролем. Застосування незасвоюваних олігосахаридів призводить до збільшення товщини вуха до 103,8 мкм. Це вказує на зменшення алергійної реакції приблизно на 45 % порівняно з позитивним і негативним контролем. Комбінація нежиттєздатної B. breve і незасвоюваних олігосахаридів призводить до збільшення товщини вуха тільки до 80,4. Це вказує на неочікуване поліпшення зменшення алергійної реакції на 64 % порівняно з позитивним і негативним контролем. Таблиця 2 Значення збільшення товщини вуха внаслідок алергійної реакції на сироватковий протеїн у мишей Група мишей, що обробляється Збільшення вуха в мкм (сп) 36,0 (5,7)* 159,9 (12,2) Група A, негативний контроль Група B, позитивний контроль Група C, обробка нежиттєздатною B. 116,0 (12,2)* breve Група E, обробка нежиттєздатною B. 80,4 (10,8)* breve і пребіотиками * p < 0,05 порівняно з позитивним контролем. 40 11 Відносне зменшення алергійної реакції в % 100 0 35 64 UA 100985 C2 5 10 15 Ці результати вказують на неочікуване покращення дії комбінації незасвоюваних олігосахаридів і нежиттєздатної B. breve порівняно з окремими компонентами. Це є неочікуваним, оскільки інактивована B. breve не може метаболізувати незасвоювані олігосахариди. Приклад 3: Рідке дитяче молоко з B. breve Рідке, готове до вживання, поживне молоко містить на 100 мл: - 67 ккал - 1,9 г протеїну (протеїну коров'ячого молока) - 8,1 г засвоюваних вуглеводів (з яких 7,8 г лактози) - 3,0 г жиру - 0,8 г незасвоюваних олігосахаридів: 0,72 галакто-олігосахаридів одержаних від Vivival GOS 0,08 г фруктану одержаного від RaftilinHP 9 - 5,10 куо еквівалентів обробленої теплом нежиттєздатної Bifidobacterium breve pH приблизно 6,7. ФОРМУЛА ВИНАХОДУ 20 25 30 35 40 45 50 55 60 1. Композиція для харчування немовляти і/або дитини, що містить незасвоюваний олігосахарид А і/або В, де згаданий незасвоюваний олігосахарид має ступінь полімеризації від 2 до 200, і 313 нежиттєздатну Bifidobacterium breve в кількості, еквівалентній 10 10 куо В. breve на г сухої маси композиції для харчування немовляти і/або дитини, і містить життєздатну Bifidobacterium 3 breve в кількості менше ніж 10 куо В. breve на г сухої маси харчування для немовляти і/або дитини. 2. Композиція для харчування за пунктом 1, яка знаходиться в готовій до вживання рідкій формі. 3. Композиція для харчування за пунктом 1 або 2, яка додатково містить сильно і/або частково гідролізоване джерело протеїну. 4. Композиція для харчування за будь-яким з попередніх пунктів, яка зберігається при кімнатній температурі протягом принаймні 6 місяців. 5. Композиція для харчування за будь-яким з попередніх пунктів, яка є неферментованим харчуванням для немовляти і/або дитини. 6. Композиція для харчування за будь-яким з попередніх пунктів, де рН харчування становить від 6 до 8. 7. Композиція для харчування за будь-яким з попередніх пунктів, що містить незасвоюваний олігосахарид А і В, де незасвоюваний олігосахарид А і В відрізняється або: і) за відсотком принаймні одного моносахариду олігосахариду А, виходячи із загальної кількості моносахаридних залишків олігосахариду А, де вміст моносахариду є принаймні на 40 кількісних % вищим, ніж відсоток того ж самого моносахариду в олігосахариді В; і/або іі) за відсотком принаймні одного глікозидного зв'язку олігосахариду А, виходячи із загальної кількості глікозидних зв'язків олігосахариду А, де вміст глікозидного зв'язку є принаймні на 40 кількісних % вищим, ніж відсоток того ж самого глікозидного зв'язку в олігосахариді В; і/або ііі) за ступенем полімеризації олігосахариду А, де ступінь полімеризації олігосахариду А є принаймні на 5 моносахаридних залишків нижче, ніж ступінь полімеризації олігосахариду В. 8. Композиція для харчування за будь-яким з попередніх пунктів, де незасвоюваний олігосахарид вибирають з групи, що містить фрукто-олігосахарид, незасвоюваний декстрин, галакто-олігосахарид, ксило-олігосахарид, арабіно-олігосахарид, арабіногалакто-олігосахарид, глюко-олігосахарид, глюкомано-олігосахарид, галактомано-олігосахарид, манан-олігосахарид, хіто-олігосахарид, олігосахарид уронової кислоти, сіалілолігосахарид і фуко-олігосахарид. 9. Композиція для харчування за будь-яким з попередніх пунктів, де принаймні 60 кількісних % від загальної кількості моносахаридних залишків олігосахариду А і/або В є моносахаридами, вибраними з групи, що містить галактозу, фруктозу і глюкозу. 10. Композиція для харчування за будь-яким з попередніх пунктів, що містить олігосахарид А і В, де масове співвідношення олігосахариду А і В становить від 19/1 до 1/19. 11. Композиція для харчування за будь-яким з попередніх пунктів, де олігосахаридом А є трансгалакто-олігосахарид і олігосахаридом В є фрукто-олігосахарид. 12. Композиція для харчування за будь-яким з попередніх пунктів, що містить 0,5-10 мас. % незасвоюваного олігосахариди, виходячи з сухої маси харчування для немовляти і/або дитини. 13. Композиція для харчування за будь-яким з попередніх пунктів, що додатково містить ейкозапентаєнову кислоту (ЕРА), і/або докозагексаєнову кислоту (DHA), і/або арахідонову кислоту (ARA). 12 UA 100985 C2 5 10 14. Композиція для харчування за будь-яким з попередніх пунктів, що додатково містить від 5 до 50 ен% ліпіду, від 5 до 50 ен% протеїну, від 15 до 90 ен% вуглеводу. 15. Композиція для харчування за будь-яким з попередніх пунктів, де нежиттєздатну В. breve вибирають з нежиттєздатної В. breve штаму M-16V і В. breve штаму 1-2219. 16. Застосування композиції для харчування немовляти і/або дитини за будь-яким з попередніх пунктів, для виготовлення композиції для годування немовляти і/або дитини. 17. Застосування композиції для харчування немовляти і/або дитини за будь-яким з пунктів 115, для виготовлення композиції для лікування і/або профілактики алергії, переважно харчової алергії, і/або атопічних захворювань, включаючи екзему і/або астму. 18. Застосування композиції для харчування немовляти і/або дитини за будь-яким з пунктів 115, для виготовлення композиції для лікування і/або профілактики інфекції. 19. Застосування композиції для харчування немовляти і/або дитини за будь-яким з пунктів 115, для виготовлення композиції для лікування і/або профілактики пелюшкового дерматиту. Комп’ютерна верстка Г. Паяльніков Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 13