Спосіб визначення якості харчових продуктів

Спосіб визначення якості харчових продуктів, що включає приготування контрольного зразка і 3 - тривалість способу визначення - 24-48 годин; - невисока чутливість способу. В основу корисної моделі поставлено задачу розробити удосконалений спосіб визначення якості харчових продуктів, в якому, шляхом обробки контрольної проби, що містить певну кількість осіб Daphnia m. S. сумішшю люмінолу та пероксиду водню та наступної реєстрації інтенсивності хемілюмінесценції, забезпечити підвищення чутливості і точності способу, а також скорочення тривалості визначення якості харчових продуктів. Поставлена задача вирішена в способі визначення якості харчових продуктів, що передбачає приготування контрольного зразка і дослідної проби, введення певної кількості осіб Daphnia m. S. у контрольний зразок і дослідну пробу та витримку їх в інкубаційних середовищах при 28°С, тим, що витримку Daphnia m. S. здійснюють протягом 2-х годин, після чого в контрольний зразок та дослідну пробу додають по 50мкл 0,2мМ розчину люмінолу і 1%-го розчину пероксиду водню, реєструють інтенсивність хемілюмінесценції та роблять висновок про якість харчових продуктів за різницею значень хемілюмінесценції контрольного зразка і дослідної проби. Новизна способу, що заявляється, полягає в тому, що: - Daphnia m. S витримують в інкубаційному середовищі протягом 2-х годин; - в контрольний зразок і дослідну пробу, що містять певну кількість осіб Daphnia m. S., вводять задану кількість розчину люмінолу і пероксиду водню; - після введення вказаних хімічних реагентів реєструють інтенсивність хемілюмінесценції; - за різницею значень хемілюмінесценції контрольного зразка і дослідної проби роблять висновок про якість харчових продуктів. Спосіб здійснюють наступним чином. Готують дослідну пробу шляхом гомогенізації певного харчового продукту з наступним центрифугуванням протягом 10хв. при 10000об/хв. з подальшим приготуванням водного екстракту при гідромодулі 1:4. В якості контрольного зразка беруть воду. Далі відбирають Daphnia m. S. віком не більше 24 годин (ювеніси), вміщують по 5 осіб у пробірки з досліджуваною пробою та контрольним зразком і витримують в них протягом 2-х годин при 28°С. Далі відбирають по 500мкл інкубаційного середовища контрольного зразка і дослідної проби і додають до кожного з них по 50мкл 0,2мМ розчину люмінолу та 1%-го розчину пероксиду водню і визначають величину інтенсивності хемілюмінесценції за допомогою хемілюмінометру ХМЛ-3. Якість харчового продукту визначають по величині зміни інтенсивності хемілюмінесценції, порівнюючи величину lK контрольного зразка та l дослідної проби. Приклад 1. Приготували дослідну пробу і контрольний зразок, як наведено вище. В якості дослідного продукту використовували картоплю. Картоплю подрібнювали на лабораторному гомогенізаторі до розміру часток 0,3-1,0мм. До 100г зразку додавали 400см3 Н2О (співвідношення 1:4), ретельно перемішували та фільтрували че 40159 4 рез паперовий складчастий фільтр. Фільтрат і контрольний зразок поміщали в окремі пробірки. В кожну пробірку поміщали по 5 осіб дафній (Daphnia m. S.). Обидві пробірки поміщали в термостат при t=28°С на 2 години. Далі з кожної пробірки відбирали по 500мкл середовища, додавали 50мкл 0,2мМ розчину люмінолу та 50мкл 1% Н2О2 та реєстрували інтенсивність хемілюмінесценції. Дані наведені в Таблиці 1. Приклад 2. Проводили визначення якості харчового продукту аналогічно тому, як наведено в Прикладі 1, в якості дослідного продукту використовували екстракт полуниці. Дані наведені в Таблиці 1. Як видно з наведених даних, рівень хемілюмінесценції середовища існування дафній коливається в межах 1700±48квант/с. При додаванні екстракту полуниці він дещо збільшується, досягаючи 1950±61, а при додаванні екстракту картоплі - 1870±49квант/с. Підвищення рівня хемілюмінесценції, очевидно, пов'язане з наявністю в ньому або токсичних речовин, що стимулюють виділення екзометаболітів у середовище, або речовин, що подразнюють організм дафній та сприяють виділенню екзометаболітів у середовище їх існування. Приклад 3. Приготували дослідну пробу, як наведено вище. В якості дослідного продукту використовували картоплю. Картоплю подрібнювали на лабораторному гомогенізаторі до розміру часток 0,3-1,0мм. До 100г зразку додавали 400см3 Н2О (співвідношення 1:4), ретельно перемішували та фільтрували через паперовий складчастий фільтр. У 5 пробірок поміщали фільтрат та додавали патулін у кількостях, щоб кінцева його концентрація у пробірках була 0,001; 0,01; 0,1; 1,0 та 10,0мг/дм3 відповідно. По 10см3 середовища із 5ти пробірок переносили у наступний ряд пробірок та в кожну з них поміщали по 5 осіб дафній. Поміщали пробірки з дафніями у термостат при t=28°С на 2год. Потім з кожної пробірки відбирали по 500мкл середовища, додавали 50мкл 0,2мМ розчину люмінолу та 50мкл 1% Н2О2 та реєстрували інтенсивність хемілюмінесценції. Дані наведені в Таблиці 2. Приклад 4. Проводили визначення якості харчового продукту аналогічно тому, як наведено в Прикладі 3. В якості дослідного продукту використовували екстракт полуниці. Дані наведені в Таблиці 2. Як видно з даних, наведених у Таблиці 2, при додаванні до середовищ існування дафній розчинів патуліну спостерігається підвищення інтенсивності хемілюмінесценції. Але при концентрації патуліну 1,0мг/дм3 цей показник знижується. Це пояснюється стимуляцією продукування екзометаболітів Daphnia magna Straus. При подальшому підвищенні концентрації патуліну інтенсивність хемілюмінесценції знижується у зв'язку з загибеллю тест-культури Daphnia magna Straus. У зразках з екстрактами картоплі та полуниці при додаванні до середовища існування дафній екстрактів, що містять патулін, інтенсивність хемілюмінесценції змінюється аналогічно, але характер цих змін значно більш виражений, що пов'яза 5 40159 но з комбінованою токсичністю як патуліну, так і самих екстрактів. Таким чином, на підставі одержаних даних можна зробити наступні висновки: 1) збільшення інтенсивності хемілюмінесценції дослідної проби до ~15% в порівнянні з контрольним зразком пов'язано з властивістю конкретного харчового продукту; 2) збільшення інтенсивності хемілюмінесценції 6 дослідної проби до ~20-25% свідчить про наявність в продукті слідових кількостей (в межах дозволених концентрацій) токсичних речовин; 3) збільшення інтенсивності хемілюмінесценції дослідної проби на ³50% в порівнянні з контрольним зразком свідчить про наявність в харчовому продукті токсичних речовин. Таблиця 1 Рівень хемілюмінесценції досліджуваних зразків Інтенсивність хемілюмінесценції (квант/с) 1700±48 1870±+49 1950±61 Вид зразка Водне середовище - контрольний зразок Екстракт картоплі - Приклад 1 Екстракт полуниці - Приклад 2 Таблиця 2 Інтенсивність хемілюмінесценції досліджуваних зразків у присутності патуліну, квант/с Вид зразка Екстракт картоплі - Приклад 3 Екстракт полуниці - Приклад 4 Комп’ютерна верстка М. Ломалова 0,001 2010 2150 Концентрація патуліну, мг/дм3 0,01 0,1 1,0 3075 3380 2850 3260 3610 2280 Підписне 10 Не визначено Не визначено Тираж 28 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601