Штамм enterovirus suis-3 уніві, який використовується для виготовлення вірусвакцини проти ентеровірусного гастроентериту свиней та діагностичних препаратів для реакції нейтралізації

Штамм Enterovirus suis r3 УНИВИ ( коллекция микроорганизмов Всесоюзного государственного научноконтрольного института ветеринарных препаратов МСХ СССР), используемый для изготовления вирусвакцнны против энтеровирусного гастроэнтерита свиней и диагностических препаратов для реакции нейтрализации. (Л 5 О СП 1 I Q25Q20 Изобретение относится к ветеринарной вирусологии и может быть использовано для приготовления живой вирусвакцнны против энтерови5 русного гастроэнтерита свиней и диагностических препаратов (антигена и имунной сьгооротки] для постановки реакции нейтрализации. Для профилактики трансмиссивного гастроэнтерита свиней в ст ране при- to меняется вакцина ГДР из штамма "Риме", инактивированная вакцина чехословацкого производства и вакцинный штамм ВГНК11 [П . Вакцины и диагностические препа- 15 раты против рота- и энтеровирусного гастроэнтеритов еще не созданы. Целью изобретения является создание штамма Enterovirus suis - З УНИВИ, пригодного для использования 20 при приготовлении вирусвакцины против энтеровирусного гастроэн герита свиней и диагностических препаратов для реакции нейтрализации. Полученный штамм Enterovirus 25 suis - 3 УНИВИ имеет следующие морфологическую и физиологическую характеристики. В прямой электронной микроскопии Зо при изучении неосветленной вирусосодержащей жидкости и осветленной вирусосодержащей жидкости, концентри рированной полиэтиленгликолем "ПЭГ6000"п обнаружены вирионы [одиночные и в виде скоплений ]. которые , представляют собой голые изометрические частицы формы икосаэдра диаметром 25-30 нм. Вирус термолабилен. Прогревание при 56 С в течение 40 мин приводит к полной потере инфекционной активности в культуре клеток. Хлористый магний оказывает стабилизирующее действие на вирус. Инфекционный титр вируса до и после прогревания при ,. 56 С с МдС 1 „ не меняется,Вирус устойчив к эфиру, хлороформу, трипсину и чувствителен к солянокислому гуанидину. Вирус легко адаптировался к пере- 50 виваемой культуре клеток IB-RS-2 и СПЭВ. В обеих культурах цитопатогенное действие проявляется постоянно и появляется, к!ак правило, через 18-24 ч после заражения в виде дезин - 55 теграпии клеточного монослоя, изменения светопреломляющих свойств клеток, формирования крупных, разме™ 2 ром до 200 мкм конгломератов, дистрофически измененных клеток, утратой межклеточных контактов , пикнозон, распадом и лизисом ядер отдельных клеток, плазмокоагуляцией и плазмолиз ис ом, появлением участков глыбчатого распада клотик, обусловленного декомпозицией и дезинтеграцией субклеточных элементов. Инфекционный титр вируса в культуре клеток I8-RS-2 и СПЭВ равен 6,07 5 ТПД В процессе аітенуацми инфекционный титр вируса в культуре клеток оставался на уровне 6,0-7,5 ТЦД^/1,0. Серологические свойства.Гипериммунная сыворотка к штамму УНИВИ нейтрализовала штамм Ш 72 знтеровируса 3 серотипа и не вызывала нейтрализацию штамма F 59 энтеровируса 9 серотипа и штамма "Пурдью" трансмиссивного гастроэнтерита свиней. Идентификация вируса УНИВИ в реакции нейтрализации представлена в таблице. Биологические свойства. Исходный штамм вируса УНИВИ (культурный вирус 5 пассажа) слабопатогенен для новорожденных поросят, вызывает кратковременную диарею, угнетение и отказ от сосания у 56% инфицированных перорально 5 мл вируса двухдневных поросят. Заболевание длится 1-2 суток с последующим выздоровлением. Вирус УНИВИ непатогенен для белых мышей, морских свинок и кроликов при внутримышечном, подкожном и внутрибрюшинном заражении. Реверсибильность. Аттенуировэнный вирус (70 пассажа] не обладает реверсибильностью в 6 последовательных пассажах на новорожденных поросятах при заряжении перорально, подкожно» внутримышечно и в венчик копытца. I Безвредность. Аттрнуированный вирус безвреден для новорожденных поросят при заражении их перорально, подкожно, внутримышечно и в венчик копытца, безвреден для супоросных свиноматок, которые после внутримышечного и перорального заряжения оставались здоровыми, поросились в срок и приносили здоровое потомство. Иммуногенность. При днукратном введении аттенуиро л лшю го ни рус я г у поросньгм свиноматкам зя 10 и 14 З 1025 020 < днсґі до опороса внутримышечно по к л е т о к ПОЧРК п о р о с е н к а с п р о я в п е н и е м 5 мл вируеиейтралпэугощие ан п п ела ц и т о п а т о г е н н о г о деист ви я на І паї.1 с а в сыворотках крови достигали титра ж е , с 4 - г о пассажа а д а п т и р о в а н к \ : 1024, при перопалыюм введении п е р е в и в а е м о й к у л ь т у р е клеток I B - R S - 2 , по !0 мл - 1:32, п молозиве * а т т е н у и р о в а н в культуре к л е т о к 1:2048 и выше. Поросята, полученные IB-RS-2 и СПЭВ в т е ч е н и е 70 последоваиз имункых1свиномаі ок, л 100% слутельных п а с с а ж е й . чаев защищены от гибели при наражений их высоковирулентным штаммом Получение имунньгх с ы в о р о т о к . Атте™ энтеровируса 3 серотипа. \Q нуированныи штамм УИИВИ с п о л о ж и т е л ь ными р е з у л ь т а т а м и использовали д л я И р и ч е р . Выдепение вируса. получения высокоиммунных сывороток Исходный штамм і и те рови рус а У Н В!! И ни супоросных свиноматках ( т и т р был выделен в августе 1977 года 1:1024) , п о д с в и н к а х ( т и т р 1 : 2 5 6 ) , к р о от вынужденного убитого больного 1:128) и морских с в и н гастроэнтеритом поросенка в одном j