Спосіб одержання бактеріального препарату “мкс” для виробництва ферментованих м’ясних продуктів

Спосіб одержання бактеріального препарату прямого внесення для виробництва ферментованих м'ясних продуктів включає приготування поживного середовища на основі пептону, окреме культивування інокулятів молочнокислих бактерій Lactobacillus plantarum IMB B-7058 та Lactobacillus C2 2 (19) 1 3 32±1 °C упродовж 14-15 год. за безперервного перемішування та нейтралізації виробничого середовища. Вихід сухого бакконцентрату становить 3 5,0±0,5 г/дм виробничого середовища, сухий концентрат нормалізують вуглеводами до остаточно10 го вмісту молочнокислих бактерій - 1,0-10 КУО/г, 8 мікрококів -1,010 КУО/г. Недоліком цього способу є те, що мікрококи за своєю природою є аеробними мікроорганізмами: в процесі дозрівання м'ясних виробів значно знижується рівень їх активності, що обумовлено нестачею кисню в товщі продукту. Основною задачею винаходу є розробка способу одержання бактеріального препарату "МКС" для виробництва ферментованих м'ясних продуктів посиленої біологічної активності, з вищим рівнем нітритредукувальної та протеолітичної дії, що забезпечить контрольований процес дозрівання сиров'ялених та сирокопчених м'ясних виробів, формування специфічного смако-ароматичного букету і структури, а також скорочення їх терміну виготовлення. В способі, що заявляється, пропонується нова триштамова композиція, до якої залучені Lactobacillus plantarum ІMB В-7058, Lactobacillus casei subsp. rhamnosus ІMB B-7060, штам стафілококів Staphylococcus simulans ІMB B7040, за співвідношення культур 1:1:1, які культивували за температури 32±1 °C з періодичною або безперервною нейтралізацією до pH 6,4±0,1 од. протягом 13±0,5 год., новий склад поживного середовища з урахуванням харчових потреб та вимог до режимів стерилізації для кожного з компонентів поживного середовища. Достатньо високий рівень метаболічної активності стафілококів за мікроаерофільних та анаеробних умов обумовлює їх функціонування у м'ясній сировині впродовж всього технологічного циклу виробництва. Ці заходи дозволяють підвищити біологічну активність препарату "МКС", чисельність життєздатних клітин молочнокислих бактерій та стафілококів, і як наслідок - прискорення процесу дозрівання м'ясної сировини та покращення санітарного стану готового продукту. Поставлена задача вирішується тим, що в способі одержання бактеріального препарату "МКС" для виробництва ферментованих м'ясних продуктів, який заявляється, передбачається цілеспрямований відбір мікроорганізмів за їх біологічною активністю, складанням ефективної композиції з числа найактивніших штамів, а саме Lactobacillus plantarum ІMB В-7058, Lactobacillus casei subsp. rhamnosus ІMB B-7060, Staphylococcus simulans ІMB B-7040 у співвідношенні 1:1:1, приготування поживного середовища, внесення посівного матеріалу, культивування за температури 32±1 °C з періодичною або безперервною нейтралізацією до pH 6,4±0,1 од. протягом 13±0,5 год., відокремлення біомаси, змішування її з захисним середовищем, заморожування та сушіння суспензії клітин, подрібнення бактеріального концентрату, нормалізація наповнювачем. Згідно з винаходом використовують поживне середовище на основі пептону з додаванням мінеральних компонентів та стимуляторів росту. 95422 4 Особливістю запропонованого способу є використання спеціально підібраної заквашувальної композиції, до складу якої залучено штами молочнокислих бактерій Lactobacillus plantarum ІMB В7058, Lactobacillus casei subsp. rhamnosus ІMB B7060 і Staphylococcus simulans ІMB B-7040 за співвідношення між культурами, відповідно, 1:1:1, підвищення чисельності життєздатних клітин в складі маси препарату, покращене поживне середовище. Штами молочнокислих бактерій є власними штамами ТІММ, виділеними з природних джерел, і задепонованими в Національній колекції промислових мікроорганізмів ІMB (Україна), так само як і штам S. simulans, який був вилучений з ферментованих м'ясних продуктів непромислового виробництва. Всі штами відібрано ретельними лабораторними дослідженнями з урахуванням вимог, що висуваються до штамів, які функціонують у м'ясній сировині, а саме: висока антагоністична, протеолітична, нітритредукувальна, каталазна, ароматоутворювальна активності, резистентність до високих концентрацій солей, жовчі, фенолу. Усі використані культури мікроорганізмів, які входять до складу препарату, є непатогенними, нетоксигенним і спроможні функціонувати в м'ясній сировині. Основні біологічні властивості відібраних штамів наведено в таблиці 1. Спеціально селекціоновані штами молочнокислих бактерій L. casei ssp. rhamnosus, L. plantarum поряд із значним кислотоутворенням та ароматоутворенням демонструють ще й антагоністичну активність до сторонньої мікрофлори, що забезпечує високий санітарно-епідемічний стан готового продукту, а залучення до складу бактеріального препарату стафілококів S. simulans забезпечує бажаний перебіг протеолітичних перетворень і завдяки своїй високій нітритредукувальній активності сприяють гарантованому формуванню червоного забарвлення та знижують залишковий вміст нітриту натрію у готовому м'ясному виробі. При складанні рецептури поживного середовища ураховано потреби у поживних речовинах кожної з культур бактеріального препарату. Рецептура поживного середовища: для приготування 1 3 дм основи розчиняють у воді 10 г пептону, 10 г тризаміщеного лимоннокислого натрію, 5 г оцтовокислого натрію, 0,5 г сірчанокислого 7-водного магнію, 0,05 г сірчанокислого 4-водного марганцю, 3 0,1 г сірчанокислого 7-водного заліза (III), 1 см 3 твін-80, 20 см екстракту кукурудзяного, розведе3 ного водою у співвідношенні 1:1, 10 см сусла, 5 г хлористого натрію, встановлюють активну кислотність pH 6,7±0,1 од. шляхом додавання 40 %-ого розчину гідроксиду натрію, стерилізують за 121±1 С упродовж 30 хв. і охолоджують до температури 55 °C; окремо готують розчини: глюкози - 10 г розчиняють в 100 см дистильованої води, аскорбіно3 вої кислоти - 0,1 г розчиняють в 50 см дистильованої води та стерилізують за 112±1 °C упродовж 15 хв., фосфорнокислого однозаміщеного калію 3 0,2 г розчиняють в 20 см дистильованої води, фосфорнокислого двозаміщеного амонію - 0,2 г роз3 чиняють в 20 см дистильованої води; та стерилізують за 121±1 °C упродовж 20±0,1 хв. 5 Інтенсифікацію росту молочнокислих бактерій та стафілококів забезпечують сусло, аскорбінова кислота, сульфат заліза, що є факторами росту, а також глюкоза та твін-80, який, окрім того, ще й виконує важливу технологічну функцію - запобігає піноутворенню під час культивування за температури 32±1 °C з періодичною або безперервною нейтралізацією до pH 6,4±0,1 од. протягом 13±0,5 год. та відокремлення біомаси. У період активного росту культур на 7-8 годину передбачено додаткове збагачення поживного середовища глюкозою. Розчин для додаткового збагачення - 10 г глюкози 3 розчиняють в 100 см дистильованої води та стерилізують за 112±1 °C упродовж 15 хв… Такий склад дозволяє отримати значну концентрацію молочнокислих бактерій у поживному середовищі перед центрифугуванням та, відповідно, високу їхню чисельність у готовому препараті "МКС". Спосіб здійснюють таким чином. Інокуляти кожного із штамів молочнокислих бактерій L. casei subsp. rhamnosus та L plcmtarum готують окремо шляхом внесення добових бульйонних культур в кількості 5 % до об'єму поживного середовища МРС і подальшого вирощування за температури 32±1 °C протягом 22±2 год. Інокулят S. simulans готують двома способами. За першим стафілококи, які вирощені за температури 32±1 °C протягом 46±2 год. на поверхні м'ясо-пептонного 2 3 агару площиною близько 800 см змивають в 1 дм м'ясо-пептонного бульйону. За іншим способом S. simulans змивають з поверхні скошеного м'ясопептонного агару в м'ясо-пептонний бульйон з мальтозою та культивують в колбах на качалках за температури 32±1 °C протягом 22±2 год. при 200 об/хв. Готують поживне середовище. Для приготу3 вання 1 дм основи розчиняють у воді 10 г пептону, 10 г тризаміщеного лимоннокислого натрію, 5 г оцтовокислого натрію, 0,5 г сірчанокислого 7водного магнію, 0,05 г сірчанокислого 4-водного марганцю, 0,1 г сірчанокислого 7-водного заліза 3 3 (III), 1 см твін-80, 20 см екстракту кукурудзяного, 3 розведеного водою у співвідношенні 1:1, 10 см сусла, 5 г хлористого натрію, встановлюють активну кислотність 6,7±0,1 од. pH шляхом додавання 40 %-ого розчину гідроксиду натрію, стерилізують за 121±1 °C протягом 30 хв. і охолоджують до температури 55 °C. Окремо готують розчини: глюкози 3 - 10 г розчиняють в 100 см дистильованої води, 3 аскорбінової кислоти - 0,1 г розчиняють в 50 см дистильованої води та стерилізують за 112±1 °C протягом 15 хв., фосфорнокислого однозаміщено3 го калію - 0,2 г розчиняють в 20 см дистильованої води, фосфорнокислого двозаміщеного амонію 3 0,2 г розчиняють в 20 см дистильованої води; та стерилізують за 121±1 °C протягом 20±0,1 хв. До основи вносять вищезазначені розчини, після чого встановлюють активну кислотність 6,4±0,1 од. pH шляхом додавання 25 % водного розчину аміаку. Для нагромадження біомаси у підготовлене таким чином поживне середовище вносять 6 об. % інокулятів у співвідношенні 1:1:1. Біомасу нагромаджують за температури 32±1 °C протягом 13±0,5 год. з періодичною або безпе 95422 6 рервною нейтралізацією культуральної рідини 25 %-ним водним розчином аміаку до активної кислотності 6,4±0,1 од. pH. У разі періодичного культивування першу нейтралізацію здійснюють при досягненні рівня активної кислотності 6,2±0,1 од. pH, а потім - через кожну годину. Розчин для додаткового збагачення - 10 г глюкози розчиняють у 100 3 см дистильованої води та стерилізують за 112±1 °C протягом 15 хв. У період активного росту культур на 7-8 годину передбачено додаткове збагачення поживного середовища глюкозою. Готують захисне середовище з окремих стерильних розчинів: цукрозу та желатин розчиняють у дистильованій воді та стерилізують за 105±1 °C протягом 15 хв., та сухе знежирене молоко розчиняють у водопровідній воді й стерилізують за 121±1 °C протягом 30 хв. Нагромаджену біомасу відокремлюють від культуральної рідини центрифугуванням та змішують її у співвідношенні 1:2 із захисним середовищем, яке було попередньо стерилізоване. Одержану таким чином суспензію бактеріальних клітин заморожують за мінус 40±2 °C протягом 16-18 год. і сушать у сублімаційній сушарці за таких режимів: температура на початку сушіння мінус 25±2 °C, в кінці - плюс 30±2 °C. Тривалість сушіння - 18-20 год. Застосування цих технологічних прийомів дозволяє за 13±0,5 год. культивування одержати з 1 3 дм культуральної рідини 4,7 г сухого концентрату, 10 1 г якого містить не менше ніж 6,0·10 життєздат9 них клітин молочнокислих бактерій та 4,0·10 клітин стафілококів. Стерилізують наповнювач - глюкозу або цукрозу за температури 80 °C протягом 2 год. Бактеріальний концентрат в асептичних умовах нормалізують наповнювачем в такому співвідношенні, щоб готовий до застосування бактеріальний препарат "МКС" містив кількість молочнокислих бактерій та стафілококів - не менше 3,0·10 КУО/г та 1,0·10 КУО/г, відповідно. Фасують препарат у боксі в поліетиленові пакети та запаюють. Готовий препарат не потребує активізації. Порівняльна характеристика поживного середовища і препаратів, одержаних відомим та заявленим способами, подана в таблиці 2. Приклад 1. Спосіб одержання бактеріального препарату "МКС" для виробництва ферментованих м'ясних продуктів. Інокуляти кожного із штамів молочнокислих бактерій L. casei subsp. rhamnosus та L. plantarum готують окремо шляхом внесення добових бульйонних культур в кількості 5 % до об'єму поживного середовища МРС і подальшого вирощування за температури 32±1 °C упродовж 22±2 год. Інокулят S. simulans готують наступним чином: культуру засівають на поверхню м'ясо-пептонного агару площиною близько 1600 см та культивують за температури 32±1 °C упродовж 46±2 год., після чого змивають 2 л м'ясо-пептонного бульйону. Приготування основи поживного середовища: 3 в 70 дм водопровідної води розчиняють 700 г пептону, 700 г тризаміщеного лимоннокислого натрію, 350 г оцтовокислого натрію, 35 г сірчанокис 7 лого 7-водного магнію, 7 г сірчанокислого 4водного марганцю, 7 г сірчанокислого 7-водного 3 3 заліза (III), 70 см твін-80, 1400 см екстракту кукурудзяного, розведеного водою у співвідношенні 3 1:1, 700 см сусла, 350 г хлористого натрію, встановлюють активну кислотність 6,7±0,1 шляхом додавання 40 %-ого розчину гідроксиду натрію, стерилізують за 121±1 С упродовж 30 хв. і охолоджують до температури 55 °C. Окремо готують 3 розчини: глюкози - 700 г розчиняють в 2 дм дистильованої води, аскорбінової кислоти - 7 г розчи3 няють в 200 см дистильованої води та стерилізують за 112±1 °C упродовж 15 хв., фосфорнокислого однозаміщеного калію - 14 г 3 розчиняють в 300 см дистильованої води, фосфорнокислого двозаміщеного амонію - 14 г розчи3 няють в 300 см дистильованої води; та стерилізують за 121±1 °C протягом 20±0,1 хв. Після стерилізації основи середовища та внесення всіх компонентів активна кислотність підготовленого поживного середовища має бути 6,4±0,1 од. pH. В підготовлене поживне середовище вносять 3 по 2 дм інокулятів культур L plantarum ІMB В7058, L. casei subsp. rhamnosus ІMB В-7060, S. simulans ІMB B-7040, з концентрацією клітин кожного не менше 10 КУО/см. Нагромадження бактеріальної маси проводять за температури 32±1 °C упродовж 13±0,5 год. з періодичною нейтралізацією середовища 25 %-им водним розчином аміаку до активної кислотності 6,4±0,1 од. pH. Готують розчин глюкози для додаткового зба3 гачення: 700 г глюкози розчиняють у 2 дм дистильованої води та стерилізують за 112±1 °C протягом 15 хв. На 7-8 годину культивування для додаткового збагачення середовища вносять розчин глюкози. Після закінчення процесу нагромадження біомаси культуральну рідину охолоджують і центрифугують на суперцентрифузі при 15000 об/хв. 3 Готують 2 дм захисного середовища з окремих стерильних розчинів із розрахунку: 500 г цук3 рози та 80-100 г желатину, розчинені в 1,5 дм дистильованої води і стерилізовані за 105±1 °C протягом 15 хв.; 50 г сухого знежиреного молока 3 у 0,5 дм водопровідної води, стерилізують за 121±1 °C протягом 30 хв. Одержану біомасу змішують у співвідношенні 1:2 зі стерильним захисним середовищем. Суспензію клітин розливають у стерильні кювети шаром не більше 6 мм, заморожують при мінус 40±1 °C протягом 16±0,5 год. і висушують у сублімаційній сушарці КС-30 за температури від - 25 °C до +30 °C з масовою часткою вологи в сухому концентраті не більше 5 %; тривалість сушіння становить 18±0,5 год. 3 З 1 дм культуральної рідини вихід сухого концентрату становить 4,7 г, 1 г якого містить не мен10 ше ніж 6,0·10 життєздатних клітин молочнокис9 лих бактерій та 4,0·10 клітин стафілококів. Висушений бактеріальний концентрат у асептичних умовах подрібнюють у дрібнодисперсний порошок в кульовому млині упродовж 20 хв. Наповнювач - глюкоза або цукроза попередньо стерилізують за температури 80 °C упродовж 2 95422 8 год. Бактеріальний концентрат нормалізують наповнювачем в такому співвідношенні, щоб готовий до застосування бактеріальний препарат "МКС" містив кількість молочнокислих бактерій та стафі10 8 лококів - не менше 3,0·10 КУО/г та 1,0·10 КУО/г відповідно. Фасують препарат у боксі в поліетиленові пакети та запаюють. Показники якості концентрату, отриманого за прикладом 1, наведено у табл. 3. Приклад 2. Спосіб одержання бактеріального концентрату "МКС" для виробництва ферментованих м'ясних продуктів. Технологічні операції ведуть аналогічно за прикладом 1. За винятком, приклад 2 демонструє іншій спосіб внесення посівного матеріалу у поживне середовище. В підготовлене поживне середо3 вище вносять 2 дм штаму S. simulans ІMB B-7040 та культивують протягом 3 год. з періодичним пе3 ремішуванням, і лише потім вносять по 2 дм завчасно приготованих інокулятів L. casei subsp. rhamnosus та L. plantarum з концентрацією клітин 8 3 кожного не менше 10 КУО/см , а також вносять 3 стерильний розчин глюкози 700 г в 2 дм дистильованої води. Нагромадження бактеріальної маси проводять за 32±1 °C ще упродовж 11±0,5 год. з періодичною нейтралізацією середовища 25 %-им водним розчином аміаку до активної кислотності 6,4±0,1 од. pH. Одержаний бактеріальний концентрат містить 10 9 6,0·10 КУО/г молочнокислих бактерій та 4,0·10 3 КУО/г стафілококів, з 1 дм культуральної рідини вихід сухого концентрату 4,7 г. Бактеріальний концентрат нормалізують наповнювачем - глюкозою або цукрозою в такому співвідношенні, щоб готовий до застосування бактеріальний препарат "МКС" містив кількість молочнокислих бактерій та стафілококів - не менше 3,0·10 КУО/г та 1,0·10 КУО/г, відповідно. Фасують препарат у боксі в поліетиленові пакети та запаюють. Показники якості концентрату, отриманого за прикладом 2, наведено у табл. 3. Приклад 3. Спосіб використання бактеріального препарату "МКС" для виробництва ферментованого м'ясного продукту. Одна порція препарату "МКС", одержаного за прикладами 1 або 2, складає 25 г на 50 кг сировини. Сухий бакпрепарат розчиняють у стерильній або кип'яченій воді, охолодженій до температури 30-35 °C у співвідношенні 1:5. Препарат вносять на початку кутерування яловичини, нежирної свинини - у разі виробництва ферментованих ковбас; а для виробництва цільном'язевих виробів - на етапі шприцювання разом з посолочними інгредієнтами. Щоб запобігти інактивації препарату, не допускається завчасне змішування бактеріального препарату з розчином нітриту натрію. Показники якості сиров'ялених цільном'язевих продуктів, отриманих за прикладом 3, наведено у табл. 4. Бактеріальний препарат "МКС", одержаний за прикладами 1 і 2 має однакові характеристики, розбіжності за кількісним вмістом життєздатних молочнокислих бактерій і стафілококів - незначні, але за прикладом 2 процес нарощування біомаси триваліший, а отже більш ресурсозатратний, саме 9 95422 тому доцільно виробляти препарат за прикладом 1. Отже, спосіб одержання бактеріального препарату "МКС" для виробництва ферментованих м'ясних продуктів, одержаний за прикладами 1 і 2 має високий індекс розчинності і значний ступінь виживання молочнокислих бактерій та стафілококів, що дозволяє застосовувати його без попередньої активізації прямим внесенням у м'ясну сировину при виробництві ферментованих м'ясних продуктів. Бактеріальний препарат "МКС", порівняно з прототипом відрізняється композиційним складом, скороченням тривалості культивування, та підви 10 щеною біохімічною активністю культур, зокрема протеолітичною та нітритредукувальною. Спосіб, що заявляється, дозволяє одержати біологічно активний бактеріальний препарат прямого внесення з високим вмістом заквашувальних культур для виробництва ферментованих м'ясних продуктів, який забезпечує гарантований перебіг біохімічних перетворень - зниження кислотності, зменшення вмісту нітриту натрію, сприяє формуванню та стабілізації червоного забарвлення м'яса, які забезпечать прискорення дозрівання м'ясних виробів та високий санітарно-епідемічний стан готової продукції. Таблиця 1 Основні фізіолого-біохімічні властивості штамів, які залучено до способу одержання бактеріального препарату "МКС" Показник Оптимальна температура росту, °C Межа кислотоутворення, °Т Розвиток у присутності: 40 % жовчі; 6,5 % NaCl; 10 % NaCl; при pH 9,6. Урожайність клітин упродовж 24 годин, 3 КУО/см Каталазна активність Нітритредукувальна активність Утворення диацетилу та ацетоїну L. casei ssp. rhamnosus 32 250 L. plantarum & simulans 32 200 32 ++ +++ ++ 8 8 7,9-10 8,5-10 6,0-10* + + + + + + Таблиця 2 Порівняльна характеристика бактеріальних препаратів, які одержано за відомим та заявленим способами Показники Препарат прототип "Лакмік" L. casei subsp. casei, L. casei subsp. rhamnosus, L. plantarum, Micrococcus varians Кількість інокуляту культур, % 6 Вода Пептон* Натрій лимоннокислий* Натрій оцтовокислий* MgSO4·7H2O * MnSO4·4H2O* Склад середовища для нагрома- Fe2(SO4)3·7H2O* дження біомаси Глюкоза *** NaCl* Екстракт кукурудзяний* Аскорбінова кислота*** Дріжджовий автолізат** Калій фосфорнокислий** Амоній фосфорнокислий** Твін-80 Видовий склад мікрофлори Препарат, що заявляється "МКС" L. casei subsp. rhamnosus, L. plantarum, S. simulans 6 Вода Пептон* Натрій лимоннокислий* Натрій оцтовокислий* MgSO4·7H2O * MnSO4·4H2O* Fe2(SO4)3 ·7H2O Глюкоза *** NaCl* Сусло* Екстракт кукурудзяний* Аскорбінова кислота*** Калій фосфорнокислий** Натрій фосфорнокислий** Твін-80 11 95422 12 Продовження таблиці 2 Доза бакконцентрату, г 5 Наповнювач Глюкоза або цукроза Число життєздатних клітин в 1 г пре10 парату, КУО: 2,0·10 8 - молочнокислих бактерій; 1,0·10 - мікрококу - стафілококу Спосіб використання Без активізації препарату 5 Глюкоза або цукроза 10 3,0·10 8 1,0·10 Без активізації Примітка: режим стерилізації: * - за температури 121 С упродовж 30 хв., ** - за температури 121 °C упродовж 10-15 хв., *** - за температури 112 °C упродовж 15 хв. Таблиця 3 Порівняльна характеристика бактеріального концентрату "МКС", отриманого за прикладами та бактеріального концентрату "Лакмік" Назва показника Кількість молочнокислих бактерій, КУО/г Кількість мікрококів, КУО/г Кількість стафілококів, КУО/г БГКП (коліформи), в 1 г Дріжджі та плісеневі гриби, в 1 г 3 Вихід біомаси з 1 дм , г Ступінь виживання мікроорганізмів, % • молочнокислих бактерій • мікрококів • стафілококів 3 Індекс розчинності концентрату, см сирого осаду *Нітритредукувальна активність, мг/кг Протеолітична активність за приростом вільних амінокислот, % Аналог Лакмік 11 1·10 9 1·10 – Не виявлені Не виявлені 5 Приклад 1 10 6,0·10 – 9 4,0·10 Не виявлені Не виявлені 4,7 Приклад 2 10 6,0·10 – 9 4,0·10 Не виявлені Не виявлені 4,7 98,2 98,7 97,8 98,4 96,5 94,8 1,8 28,5 1,7 1,8 22-20 40-50 ** * залишковий вміст нітритів у продукті на 14 добу, за умови внесення нітритів 100 мг/кг ** відсутні дані Таблиця 4 Характеристика готових сиров'ялених цільном'язевих продуктів Назва показника Вміст вільних циклічних амінокислот, мг/100 г Вміст вільних ациклічних амінокислот, мг/100 г Вміст нітриту натрію, мг % Кінцевий рівень pH Загальна оцінка за органолептичними показниками, бали Комп’ютерна верстка Г. Паяльніков Сиров'ялені цільном'язові продукти з яловичини зі свинини без препарату з "МКС" без препарату з "МКС" 314,64 452,95 381,84 562,54 222,77 237,80 231,19 260,85 3,1 2,2 2,8 2,0 5,34 4,98 5,66 5,12 4,0 4,7 4,2 4,8 Підписне Тираж 23 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601