Спосіб виробництва бактеріального препарату для кисломолочних продуктів

1. Способ производства бактериального препарата для кисломолочных продуктов, предусматривающий культивирование: Lactobacillus acidophilus на питательной среде, содержащей молочную сыворотку, кукурузный экстракт, уксуснокислый натрий, сернокислый марганец, воду, при периодическом перемешивании, смешивание полученной бактериальной массы с защитной средой, содержащей желатозу, сахарозу, обезжиренное молоко с содержанием сухих веществ 16%, замораживание и сублимационную сушку полученной суспензии клеток, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что из Lactobacillus acidophilus используют штамм 317/402 "Наринз", культивирование проводят при 37-41 °С и рН 6,0-6,7 в течение 1824 ч до содержания 200 млн. бактериальных клеток в 1 мл, а смешивание бактериальной массы с защитной средой осуществляют в соотношении 1:1. 2. Способ по п. 1 , о т л и ч а ю щ и й с я тем, что в составе питательной среды дополнительно используют 0,5% экстракта из пшеничных отрубей. 3. Способ по п. 1 , о т л и ч а ю щ и й с я тем, что замораживание ведут при температуре не выше минус 40°С не более 30 мин с последующей выдержкой при температуре не выше минус 30°С не менее 12 ч, а сублимационную сушку ведут при давлении 5-Ю"1 5-Ю"2 мм рт. ст. Изобретение относится к молочной промышленности, в частности к микробиологии. Известен способ производства бактериального препарата для кисломолочных продуктов, предусматривающий куль™ ви рование Lactobacillus acidophilus на "питательной среде, содержащей молочную сыворотку, кукурузный экстракт, уксуснокислый натрий, сернокислый марганец, воду при периодическом перемешивании, смешивание полученной бактериальной массы с защит ной средой, содержащей желатозу, сахарозу, обезжиренное молоко с содержанием сухих веществ 16%, замораживание и сублимационную сушку. Недостаток способа в том, что рекомендуемые параметры культивирования - продолжительность 8 ч и узкий интервал значений активной кислотности среды - не позволяет накопить достаточного количества микробных клеток и в особенности их метаболитов, представляющих собой .био С > ю со О 11193 логически активные вещества, многие из которых обладают лечебным эффектом. Целью изобретения является повышение активности препарата и его лечебных свойств. 5 Сущность способа заключается в следующем: Lactobacillus acidophilus 317/402 "Наринэ" культивируют на питательной среде при 37-41°С и рН 6,0-6.7 в течение 23-25 ч 10 до содержания 500 млн бактериальных клеток в 1 мл. Творожную сыворотку подкисляют лимонной кислотой или подщелачивают углекислым натрием, едким натром до рН 4,5-4,6 и прогревают при температуре 90°С 15 в течение часа или 5-10 мин. Кипятят для денатурации белков, фильтруют, доводят рН до 6,0-6,5, прогревают, фильтруют и смешивают с кукурузным экстрактом, растворами уксуснокислого натрия, сернокислого 20 марганца семиводного, устанавливают рН 6,5-6,8 и стерилизуют 30 мин при 0,07 кПа. Рецептура питательной среды на 10 л молочная сыворотка осветленная 1,7-2,0 л 25 кукурузный экстракт, разведенный 1:6 0,10-0,15л уксуснокислый натрий 40%-ный раствор 0,15 кг сернокислый марганец 30 семиводный 1,65 г вода остальное. В стерильную питательную среду, подогаетую до (39±2°С). вносят закваску Lactobacterium acidophilum 317/402 в коли- 35 честве 10-15%. Посевы термостатируют при (39±2)°С в течение суток периодически - через 4-5 ч и в конце процесса восстанавливая исходное значение рН и перемешивая. Полученную бактериальную массу сме- 40 шивают в соотношении 1:1с защитной средой, содержащей желатозу, сахарозу, молоко обезжиренное, содержащее 18% сухих веществ. Устанавливают рН защитной среды в интервале 6,3-6,5, смешивая про- 45 стерилизованные в отдельности растворы желатозы и сахарозы с обезжиренным молоком. тивностью в отношении патогенной микрофлоры. Культивирование осуществляют при оптимальной для данного штамма температуре 37-41°С и значениях рН 6,0-6,7. В процессе выращивания в течение 2325 ч культуральную жидкость с культурой периодически - через 3-4 ч - перемешивают в течение 30-40 с и подщелачивают до исходных значений рН. Это позволяет снизить влияние молочной кислоты и этим продлить стационарную фазу роста, повысить выход бактериальной массы и содержание биологически ценных продуктов жизнедеятельности лактобацилл - полисахаридов, витаминов, аминокислот и др. Добавление экстракта из пшеничных отрубей обогащает питательную среду витаминами группы В, которые являются факторами роста лактобацилл. Соотношение суспензии и защитной среды в целях экономии последней берут 1:1. П р и м е р 1. Для приготовления питательной среды используют осветленную творожную сыворотку. Для этого устанавливают рН в зоне значений 4,5-4,6,оптимальной для денатурации белков, и прогревают при 100°С в течение (5±2) мин для более полного их удаления, затем фильтруют иди сепарируют. Кукурузный экстракт разводят водой в 6 раз, стерилизуют при 0,1 МПа 20 мин и удаляют осадок фильтрованием. Уксуснокислый натрий и сульфат марганца вносят в виде водных растворов. Подготовленные компоненты питательной среды смешивают согласно рецептуре, устанавливают рН 6,5+0,2, стерилизуют при 0,07 МПа в течение 60 мин и охлаждают до температуры (39±2)°С. В питательную среду вносят закваску ацидофильных палочек штамма 317/402 "Наринэ", выращенную на стерильном обезжиренном молоке в течение 5-7 ч при температуре (39±2)°С. Допускается хранение готовой закваски при (5±2)°С в течение 10-15ч. Культивирование осуществляют при Полученную суспензию расфасовывают 50 температуре (39±1)°С в течение 24 ч, периои подвергают лиофильной сушке. дически - через каждые 4-5 ч восстанавливая исходное значение рН среды с помощью В составе питательной среды можно исводных р-ров ЫагОз (насыщенный) или пользовать 0,5% экстракта из пшеничных NaOH с массовой долей 30%. При этом кульотрубей. Для достижения цели из ацидофильных 55 туральную жидкость перемешивают в течемолочнокислых палочек выбран штамм ние 20-30 с частотой вращения 3-5 с"1. Lactobacillus acidophilus 317/402 "Наринэ", Выращенную культуру лактобацилл способный лучше других ацидофильных смешивают в соотношении 1:1 с питательлактобацилл закрепляться в кишечнике и ной средой следующего состава на 10 л: обладающий большей антибиотической ак 1119:} Обезжиренное молоко, живают при температуре -40°С и подвергасодержащее 16% сухих ют сублимационной сушке при 1,0 Па и темвеществ 3л пературе -40°С. Досушивание производят Сахароза (25%-ный при температуре 40°С до остаточной влаж5 ности препарата не более 3% и не ниже 2 %. раствор) 1,4 л Мелатоза 5,6 л Вода Остальное П р и м е р 2. Согласно примеру 1, с той Для приготовления мелатозы навеску разницей, что для дополнительного обогажелатина (350 г) растворяют примерно в 5 л щения питательной среды ростовыми фактоводы, стерилизуют придавлений 1,5-2,0 МПа 10 рами в нее вносят5% экстракта из пшеничных в течение 3,0-2,5 ч, в зависимости от прибоотрубей. ра, фильтруют, если необходимо. Для приготовления экстракта 100 г Полученную смесь бактериальной масотрубей заливают 1 л водопроводной восы с защитной средой разливают по 5 мл во ды, выдерживают 15 мин при температуре флаконы вместимостью 10 мл или по 100 мл 15 90°С и фильтруют. Стерилизуют при 112°С во флаконы вместимостью 250 мл, замора20 мин. Упорядник Замовлення 4052 Техред М.Моргентал Коректор Л . Філь Тираж Підписне Державне патентне відомство України, 254655, ГСП, Київ-53. Львівська пл., 8 Відкрите акціонерне товариство "Патент", м. Ужгород, вул,Гагаріна, 101