Спосіб одержання бактеріальної закваски “воакс” для профілактики дифтерії

Спосіб одержання бактеріальної закваски для профілактики дифтерії, який передбачає пастеризацію молока, внесення в нього закваски, яка виго Винахід відноситься до молочної промисловості і призначений для отримання бактеріальних заквасок у виробництві лікувально-профілактичних кисломолочних продуктів, зокрема для профілактики дифтерії Відомий спосіб отримання закваски «Стрептосан», отриманої шляхом культивування штаму S Faecium K-77, який має адгезивні властивості, і штамів S Therrmophilus 36-8 (неслизової раси) і Ш 24 (слизової раси, взятих у співвідношенні 8 1 1 / Авторське свідоцтво СРСР №1451901, кп А23 С9/12Д984, непубл/ Відомий спосіб отримання бактеріальної закваски, приготовлений на симбіозі Lactobacillus plantaram ВКМП В-5002, Streptococcus themophilus, Lactobacilms bulqancum ВКМП В 5003 при співвідношенні штамів рівним (5 - 7), (1 - 3), сквашування при температурі 28 - 38 градусів за Цельсієм «Геросан» /Опис до патенту на винахід UA 2815 С1, кл А23С9/12/ Недоліком прототипу, закваски, являється відсутність в ній противодифтерійної активності В основу винаходу поставлена задача створення способу отримання бактеріальної закваски «Воакс», для виробництва кисломолочних продуктів, з властивістю профілактики дифтерії, в яких в склад закваски на основі адгезивного штаму Laetobacillus plantarum і Lactobacillus bulqancum додатково вносять новий вид штаму Lactobacillus species «ВО» для профілактики дифтерії, /Реєстраційний номер IBM 7010 в Інституті мікро товлена на симбіозі адгезивного штаму Lactobacillus plantarum ВКМП В-5002, Streptococcus thermophilus ВКМП-3812, і Streptococcus thermophilus ВКМП В -3808, Lactobacillus bulqancum ВКМП В-5003, сквашування при температурі 33 - 38 градусів за Цельсієм, який відрізняється тим, що в склад закваски додатково вносять штам Lactobacillus species «ВО», при цьому співвідношення штамів які використовуються встановлюють рівним 5 1 1 1 2, із розрахунку суми складових 10 біологи і епідеміологи НАН України, Патент України на винахід від 22971, кп А 61 К 39/085 05 05 98р/, при іншому їх співвідношенні Поставлена задача вирішується тим, що в способі отримання бактеріальної закваски для виробництва кисломолочних продуктів, який передбачає пастеризацію молока, внесення в нього закваски, яка приготовлена на симбіозі адгезивного штаму Lactobacillus plantarum ВКМП В-5002, Streptococcus thermophilus ВКПМ-3812, Streptococcus mermophilus ВКПМ В -3808, Lactobacillus bulqancum ВКПМ В 5003, сквашування при температурі 28 - 38 градусів за Цельсієм, згідно за винаходом в склад закваски додатково вносять штам Lactobacillus species «ВО», при цьому співвідношення штамів які використовуються встановлюють рівним 5 1 1 1 2, із розрахунку суми складових 10 Штами які використовуються відібрані по ряду цінних фізюлого-бюхімічних властивостей, в тому числі по адгезивній властивості до буквального епітелію слизової ротоглотки, і антагоністичних властивостей до збудника дифтерії, до патогенної і умовно-патогенної мікрофлори Співвідношення між штамами, які використовуються в заквасці встановлюють виходячи із того, що для маніфестації лікувального і профілактичного ефекту масова доля адгезивного штаму повинна складати не менше 3 - 5 частин із 10 Обгрунтування використання штаму «ВО» основним фактором в епідеміологічному процесі О со ю 52723 при дифтерійній інфекції, являється здорове носійство Лікування здорового носійства являється дуже складним питанням, зниження його на протязі останніх десятиліть, йшло набагато повільніше, ніж зниження захворюваності (Возіанова Ж І і ІНШІ // Методические рекомендащжведение больных дифтерией, ангинами, носителей коринобактерий в условиях роста заболеваемости дифтерией Київ -1993 -38с) Шляхом виліковування здорового носійства може бути використання штаму лактобактерій «ВО» Штам «ВО», вегетативні форми якого в концентрації 1 10-9 мікробних тіл подавляють ріст корінебактерій дифтерії на 100% /Патент України №22970/ На середовищах із цукрами і без них лактобактерія плантарум ВКПМ В-5002 проявляє антагоністичну властивість по відношенню до гнилісних і ряду патогенних збудників Штам має високу молокозвертаючу дію В склад закваски входить L Bulgancus ВКМП В- 5003, штам має низьку кислотність і високу антагоністичну здатність В склад закваски входять Streptococcus thermophilus ВКПМ-3812, і Streptococcus thermophilus ВКПМ В -3808, активні кислотоутворювачі, які мають низьку кислотність, утворюють ЩІЛЬНІ, але не тягучі згустки з підвищеними вологоутримуючими і тиксотропними властивостями, які проявляються при температурі 28 - 38°С Закваску «Воакс» рекомендується застосовувати для профілактики дифтерії Кисломолочні продукти отримані з використанням закваски «Воакс» характеризуються високою і стабільною адгезивною активністю по відношенню до збудника дифтерії, і інших патогенних і умовно патогенних мікроорганізмів, стабільною помірною кислотністю, що дає можливість зберігати у в умовах нерегулююмих температур, з добрим смаком і щільною консистенцією Результати експериментального вивчення закваски Вивчення цілеспрямованності дії закваски «Воакс» на чашку Петрі із середовищем КТА наносили суспензію закваски петлею в діаметрі 6мм, концентрацією 1 10 9 мікробних тіл Безпосередньо, через 24год , через 48год перпендикулярно наносили суспензію еталонного штаму збудника дифтерії, а також 26 диких штамів збудників дифтерії в концентрації 110 мікробних тіл Відмічено затримку росту збудників дифтерії через 24год від 16 до28мм, через 48год від 20 до 32мм На чашку Петрі із середовищем МЛА в луночки діаметром 5мм вносили 0,1 мл суспензії закваски, в концентраціях штаму лактобацил від 1 10 до 3 10 мікробних тіл Через 2год інкубації, при температурі 37° по Цельсію чашки зверху заливали другим шаром середовища КТА, товщиною 4 5мм, після застигання агару проводився посів газоном суспензії збудника дифтерії в концентраціях 1 10 мікробних тіл /концентрація 1 10 мікробних тіл достатня для виникнення захворювання/, чашки витримували в термостаті при температурі 37° по Цельсію, на протязі 24год Найбільша затримка росту відмічена при концентрації препарату в дозі 1 10 9 і більше Вивчення адгезивних властивостей закваски до буккального епітелію Проводився забір епітелію із слизової оболонки щоки, з послідуючим відмиванням і осадженням В 5 пробірок добавляли по 2,0 відмитого епітелію і 2,0 препарату «Воакс», шкубували при температурі 22° за Цельсієм і 37° за Цельсієм від 1 до ЗОхв При температурі 22 градуси за 5хв адгезія наступила 10,0, за ЗОхв- 13,8 При температурі 37 градусів адгезія наступила за 5хв у 13,6 клітин за Юхв 17,4 клітин /Оптимальною рахується адгезія від 10 клітин і більше/ Таким чином, закваска «Воакс» має цілеспрямовану антагоністичну дію проти збудника дифтерії, Оптимальною концентрацією для лікувальної дії рахується 1 10 9 мікробних тіл Закваска має високоадгезивну властивість до епітелію слизової рота Приклади конкретного виконання способу отримання закваски «Воакс» Приклад 1 Для отримання закваски в 200мл стерилізованого, знежиреного молока вносять 5% добових культур Lactobacillus plantarum ВКПМ В5002, streptococcus thermophilus ВКПМ-3812, і streptococcus thermophilus ВКПМ В-3808, Lactobacillus bulqancum ВКПМ В 5003, Lactobacillus species «ВО», взятих у співвідношенні 5 1 1 1 2 Інкубування проводять при 38°С, на протязі бгод Через вказаний час утворюється щільний згусток, кислотністю 80Т, з рівною щільною консистенцією, кисломолочним присмаком Закваска відповідає вимогам, які пред'являються Для отримання закваски можна використовувати різні температури від 33 до 38 градусів за Цельсієм при різних часових витримках закваски, При цьому утворюється щільний згусток, кислотністю від 80 - 109Т , з рівною щільною консистенцією, кисломолочним присмаком, що відповідає вимогам, які пред'являються Таблиця Характеристика закваски, отриманої згідно винаходу 1 2 3 4 5 6 Межа кислотоутворення Час утворення згустку Антагоністина активність В'язкість Консистенція згустку Смак 99+-1 9+-0,2 при 33 С при 38 С 6+-0,2 109 20 +- 0,6 щільна, однорідна кисломолочний 52723 ТОВ "Міжнародний науковий комітет" вул Артема, 77, м Київ, 04050, Україна (044)236-47-24