Спосіб виготовлення сухого лактобактерину ацидофільного “наріне”

Спосіб виготовлення сухого лактобактерину ацидофільного, який включає приготування живильного середовища, засівання і вирощування біомаси лактобактерій, змішування цієї біомаси з 37714 Завдяки плавним та поступовим температурним переходам такий режим є найбільш щадящим, що дає змогу отримати біопродукт з високим вмістом живих клітин бактерій. При такому режимі приготування бактеріального препарату виключається перегрівання біоклітин, так як процес проходить повільно, виключається різкий температурний перепад, що дозволяє уникнути зруйнування клітин кристаликами льоду і досягається більш повна евакуація вологи з глибинних участков клітин при максимальному зберіганні субстанції біопродукту, чим підвищується його біологічна активність. Обгрунтування меж значень режимів відображено в таблиці. Спосіб виконується наступним чином. Живильне середовище для накопичення біомаси лактобактерій готується на основі освітленої молочної сироватки з додавання кукурудзяного екстракту, молока, екстракту пшеничних висівок і сірчанокислого марганцю (сульфату марганця), як стимуляторів росту, та буферних солей. В освітлену сироватку вводять розчини кукурудзяного екстракту, пшеничного екстракту, оцтовокислого натрію і сульфату марганцю згідно рецептури на (10 дм 3). Живильне середовище стерилізують протягом 60 хв. при 0,05 МПа, потім охолоджують. Посівний матеріал, який приготовлений на молоці вносять в живильне середовище і нарощують протягом 15... 16 год. Змішують біомасу лактобактерій з заздалегідь приготовленими компонентами захисного середовища. Потім виконують розлив у стерильні флакони і направляють на заморожування. Продукт заморожують при температурі (-35)...(-38)°С протягом 12 годин, потім продукт загартовується протягом 6 годин при тій же температурі. Сублімаційна сушка продукту в умовах глибокого вакууму включає нагрівання до 0°С протягом 35...40 годин і подальше підвищення температури до 30°...35°С протягом 5...6 годин з витримкою при тій же температурі 12 год. Отримують готовий продукт з залишковою масовою часткою вологи 0,8%...3,5%. Приклад конкретного виконання. Культивування лактобактерій: Для приготування рідкої закваски беруть штам лактобактерій Lactobacillus acidophilus Ер-2 штам 317/402. Готують живильне середовище наступного складу: кукурудзяний екстракт (розведений 1:6) 1,5 мл, екстракт з пшеничних висівок 1 мл, марга нець сірчанокислий 0,16 мл, натрій оцтовокислий 6,0 г (можливо натрій лимоннокислий), молоко знежирене - 0,01 л. Молочною сироваткою доводять до 1 л. Середовище стерилізують при 1 атм - 15 хвилин, охолоджують до температури (-37,6)°С і заквашують підготовленою чистою закваскою чистих культур лактобактерій зазначеного штаму, яка виготовлена на стерильному знежиреному молоці. Витримують при температурі (-37)°С протягом 16 годин, проводять скислення через 8 годин 20%вим водним розчином двовуглекислого натрію до вихідного значення рН середовища 6,2. Виготовлення сухого бактеріального препарату. Рідку закваску перемішують, добавляють захисне середовище в співвідношенні 1:1 і в стерильних умовах розливають в скляні флакони в кількості 5 мл.: склад захисного середовища: сахароза 35 г; молоко знежирене (8% сухи х речовин) 300 мл; цитрат натрію 18 г; глютамат натрію 35 г; желатин 35 г; вода питна до 1 л. Потім препарат заморожують та висушують. Заморожування виконують поступово до температури (-36)°С протягом 12 годин, далі здійснюють загартування витримкою при тій же температурі протягом 6 годин і процес сублімаційної сушки в сушильному апараті ТГ-50 в умовах глибокого вакуум у. Сублімаційна сушка включає поступове підвищення температури до 0°С протягом 5...6 годин з витримкою при цій же температурі 12 годин термін загального процесу висушування складає 58...60 годин, вологість сухого препарату 0,8...3,5%. Кількість лактобактерій в 1 г сухого препарату коливається в межах від 1,5...1,6 млрд. шт. В таблиці приводяться дані по вмісту життєспроможних клітин лактобактерій. Як видно з даних таблиці, кількість лактобактерій після сушки в 1 г препарату вище, ніж у раніше відомого. Після проведення досліджень присутніх клітин в заявленому препараті знайдено, що в них зберігається 80-85% життєспроможних клітин, які проявляють високу антимікробну активність по відношенню до тесткультур: Sh.fle xnerl, Sp.Sennel, Stap.aureus. 2 Таблиця Вплив режимів та часу заморожування, загартування, сушки на життєспроможність клітин лактобактерій штама Lactobacillus asidophilus Ер-2 штам 317/402 Приклади 2 3 4 5 Прототип -34 -35 -37 -38 -40 -30 Час охолодження, год. 9 10 12 14 15 0,5 Закалка, год. 4 5 6 7 8 12 Сушка, год., нагрівання до 0°С 34 35 37,5 40 41 8 Нагрівання до температури 28 30 33 35 37 37 9 10 12 14 15 16 1,43×1010 1,5×1010 1,56×1010 1,6×1010 1,52×1010 1,0×109 Температура заморожування, °С Витримка 3 Кількість живих кліток лактобактерій 37714 1 37714 __________________________________________________________ ДП "Український інститут промислової власності" (Укрпатент) Україна, 01133, Київ-133, бульв. Лесі Українки, 26 (044) 295-81-42, 295-61-97 __________________________________________________________ Підписано до друку ________ 2001 р. Формат 60х84 1/8. Обсяг ______ обл.-вид. арк. Тираж 50 прим. Зам._______ ____________________________________________________________ УкрІНТЕІ, 03680, Київ-39 МСП, вул. Горького, 180. (044) 268-25-22 ___________________________________________________________ 4