Гібридний штам дріжджів sасснаrомyсеs сеrеvіsіае, який використовується для одержання хлібопекарських дріжджів

СОЮЗ СОВЕТСКИХ СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ РЕСПУБЛИК (19* (51)5 ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЬГГИЙМ ПРИ ГКНТ СССР (21) 4627879/31-13 (22) 28.12.88 6 ( 4 6 ; 0 7 . 1 1 . 4 0 . Бюл. К 41 ( 7 Ї ) Институт общей генетики им. Н.И. Вавилова, Всесоюзный научноисследовательский иьститут новых, пищевых продуктов и добавок Г о с а г р о прома СССР (72) К . Б . Косиков, О.И. Куренная, Л.Д. Ильина, А . * . Ткаченко, Е.А. Коваль, Л.А. Середа, Л.В. Рудниченко, В.Г. Мосендз, П.П. Гурмаза и М,С. Лисицина (53) 6 6 3 . 1 4 ( 0 3 8 . 8 ) (56) Авторское свидетельство СССР IP 1371969, к л . С 12 N 1/18, 1987. Авторское свидетельство СССР . № 658895, к л . С 12 N 1/18, 1977. (54) ГИБРИДНЫЙ Ш А М ЦРОЖЯЕР SACCHAТМ ROMYCES CEREVISIAE, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ ХЛЕБОПЕКАРНЫХ ДРОЖЖЕЙ (57) Изобретение относится к пищевой промышленности и микробиологическому с и н т е з у . Целью изобретения я в л я е т с я с о з д а н и е нового штамма хлебопекарных дрожжей, обладающего повышенной гене™ Изобретение относится к пищевой' промышленности и микробиологическому с и н т е з у и п р е д с т а в л я е т собой новый штамм дрожжей, который может быть исп о л ь з о в а н для лроизвоцства ; л е б с л с карных дрожжей из мелессы. Цель и з о б р е т е н и я ~ создание нового штамма хлебопекарных обладающего дрожжей, повышенной генеративной С 12 N 1/18, 15/00//(С 12 N С 12 R 1:865) 1/18, ративиои активностью и высокой э к о номичностью биосинтеза в сочетании с высокой млльтазной а к т и в н о с т ь ю . Гибридный триплоидный штамм дрожжей Saccharomyces c e r e v i s i a e ВКПМ-У-1037 получен методом популяции клеток с применением генетических маркеров и селективных с р е д . Родители - д и п л о идный высокопродуктивный осмофильный штамм S a c c h a r o m y c e s c e r e v i s i a e 1838 М-5*и гаплоидный штамм S a c c h a r o m y c e s c e r e v i s i a e 1109-22 с высокой м а л ь т а з ной активностью, сегрегированный из производственной линии хлебопекарных дрожжей. Новый штамм и с п о н ь э у е ^ с я для получения зчле&огтекарных дрожжей с высокой экономичностью биосинтеза и повышенной продуктивностью в с о четании с улучшением их к а ч е с т в а (высокая м а л ь т а з н а я а к т и в н о с т ь ) ,, что п о з в о л я е т и с п о л ь з о в а т ь их в н о вых ускоренньгх технологиях т с с т о п е дения.Штамм Saccharomyces c e r e v i s i a e х а р а к т е р и з у е т с я хорошей стойкостью при хранении, апробирован в лабораторных и производственных у с л о виях. 2 т а б л . активностью и высокой экономичностью биогинт еза в сочетании с высокой мальтазной активностью. Предлагаемый новый штамм дрожжей триплоиднын гибрид," относится к Saccharomyces c e r e v i s i a e Meyen 1838, выделен селекцией по комплексу ценных производственных признаков из серии гибридов, полученных методом к о п у л я ции клеток с применением г е н е т и ч е с З 1604845 ких маркеров и селективных с р е д . Р о дительскими культурами являются д и плоидн'лш осмофильный штамм , S a c c h a r o myces c e r e v i s i a e К-5, обладающий высокой удельной скоростью роста на мел а с с е и гаплоидный штамм Saccharomyc e s c e r e v i s i a e 1109-22 с высокой мальтазной активностью, сегрегированный из производственной линии хлебопекарных дрожжей. Гибридный штамм ВКПМ У-1037 имеет мутацию в пути биосинтеза гистидина в одном из гаплоидных геномов ( п р и з нак рецессивный). Штамм депонирован в В П ВНИИ генетики и селекции п р о К М мышленных микроорганизмов под коллекционным номером Й Г У-1037 и хранитКШ ся з лаборатории ИОГЕН под номером 867 К. Предлагаемый гибридный штамм о т личается повышенной генеративной а к тивностью - 0,29 по,модулю роста и экономичностью синтеза биомассы из мелассы ие менее 85%. Товарные п р е с сованные дрожжи, полученные при выращивании гибрида, имеют следующие п о к а з а т е л и : зимазиая активность 3 5 38 мин, мапътазная активность 5460 мин» подъемная сила 55-60 мин, стойкость при хранении 90 ч и более. Морфологические признаки. Размер вегетативных клеток при росте в жидком солодовом сусле 8°Клг в течение Клг 48 'Ї при ^0° П 7,8 к 5,3 мкм (средний), объем клеток 114,6 мкм 3 . клеток іфЄсОтіадаєт овальная. Вегетативное размножение - почкованием. На ацетатной среде па 3-4 сут обра™ зуется .более 90% аско.в с 1--4 спорами; асков с 4 спорами'более 50%; форма спор кругпая, оболочка гладкая s р а з мер 3,3x3,3 мкм. Культуральные признаки. Солодовое сусло 8° Блг клетки штамма активно сбражішают в первые сутки, к концу вторых суток на цне образуется плотный белый осадок, поверхность среды чистая) иа 4-5 день на поверхности среды образуется кольцо и островки пленки. Колонии на полной органической среде после 96 ч роста иря 30 С при плотности посева 50 колоний на чашку Петри круглые, чуть кремовые, середина сферически рыпуклая, диаметр 5-6 мм. Физиолого-биохкмические признаки. Факультативный анаэроб. Оптимум р о с та при 30-35°С. Жепатину не разжижа е т , крахмал не сбраживает. Сбраживает глюкозу, фруктозу, сахарозу, мальт о з у , г а л а к т о з у , раффинозу па 1/3, не сбраживает ксилозу, арабинозу, л а к т о з у . Усваивает уксусную и молочную кислоты, не усваивает янтарной, яблочной, винной и лимонной кислот. Без, источников азота в среде не р а з множается, усваивает неорганический 10 а з о т . Чувствителен к нистатину и цикл or ексимиду, практически не ч у в с т вителен к бактериальным антибиотикам. Непатпгеиен. Усваивает глицерин, этанол: не усваивает маннит, дульцит, 15 сорбит. 20 25 30 35 П р и м е р 1, В лабораторных условиях выращивание дрожжевых клеток" известных штаммов ЛК-14 и У-611 и предлагаемого штамма В П У-1037 К М для получения посевного инокулгама проводят газоном на агаризованном иеохмеленном солодовом сусле 8°Блг при 30°С в течение 24 ч . Далее выросшую биомассу смывают жидким с у с лом и инкубируют при 30 С в течение 6-8 ч . Выросшую биомассу вместе со средой (жидким суслом) переносят в мелассное сусло концентрации 6% CR, обогащенное солями и кукурузным экстрактом в соответствии с р е г л а ментными кормами для специализированных дрожжевых заводов. Этот п о севной материал выращивают в качапочных колбах с объемом среды 200 мл при 30°С в течение 24 ч при скорости вращения 240 об./мин. Полученный инокулюм используют для засева опытной среды - мелассы концентрации 4,5% СВ с солями и кукурузным экстрактом (по регламенту). Мелассу для приготовления основной питательной среды антисептируют вытяжкой хлорной извести из расчета І г/кг мелассы. Инокулюм задают из 45 расчета 7,5 г/л прессованных дрожжей 75%-ной влажности. Инкубация 24 ч при 30°С в условиях аэрации на к а чалке при 240 об/цин. Лабораторные исследования пока50 зывают, что в одинаковых условиях культивирования новый штамм дрожжей по сравнению с известными ЛК-14 и У-611 по экономичности биосинтеза не уступает и значительно превосходит 55 их. Экономичность биосинтеза из мелассы соответственно составляет 8 5 f 2 , 85,0 и 64,9%. Качество прессованных хлебопекарных дрожжей s полученных 1604845 Малый икокулятор (бесприточная стадия) 0,2 мэ Vp Стадні аппарат А (10 м3 ) бесприточная стадия £.^р - 4,5 и3 Стадия аппарат ' 40 м3 (приточная стадия) Стадия Б (накопительная стадия) Стадия Д (диспергатор, товарные др ожжи) Технологические показатели про- , цесса - з пределах технологических норм на всех стациях выращивания дрожжей. Расход сырья и вспомогательных материалов для контрольного и опытного выращивания - одинаков,, • Показатели аэробной ферментации мелассы с использованием штаммов ЛК-14, У-611 и предлагаемого гибрида В П У-1037 приведены в табл. Ї. КМ Данные табл. 2 свидетельствуют ' о том? что прессованные дрожжи чистой .культуры (ЧК) и товарные дрожжи Зо в контроле и опыте соответствуют стандарту. на этих штаммах, характеризуется следующими показателями: по показателю подъемной силы предлагаемый штамм и известные штаммы практически не отличаются. Главное отличие предлагаемого штамма от известного в высокой мальтазной активности: если у известного мальтазная активность, определенная газометрическим методом, составляет 300 мин, то у предлагаемого штамма - 25 мин (табл. 1), Таким образом, предлагаемый штамм сочетает высокую экономичность использования мелассы с улучшенным качеством прессованных хлебопекарных дрожжей, мальтазная активность которых Bb!uies "ем у известных штаммов. П р и м е р 2. В условиях специализированного дрожжевого завода 20 проводят производственную проверку нового триплоидного гибрида в сравнении с известным ЛК-14, , Выращивание дрожжей проводят на одной партии мелассы, характеризую- 25 щейся следующими средними показателями: СБ 77,4% ция 46,8% Прямая поляризаСумма сбраживаемых Сахаров Зола Азот общий Ачот усвояемый 47,1% 9,0% 1,73% 0,35% 3,8% 2 мн 6,9 Таким образом, предлагаемый штемм позволяет получить дрожжи улучшенного качества с экономичностью йспо•5 льзования сырья 85%. 3 Формула и з о б р е т е н и я Гибридный штамм дрожжей Saccharomyces c e r e v i s i a e В П У-1037, испольКМ зуемый для получения хлебопекарных Стадии выращивания дрожжей в опытном и контрольном периодах одинаковы: 40 дрожжей. Цветность рН 16O4R45 Т а б л и ц а ЛК-14 Мелассное сусло: СВ, % РН t°c Аэрация, об/мин Продолжительность культивирования, ч Синтезировано биомассы прессованных дрожжей в пересчете на 75%-ную влажность, г/л Выход из мелассы, % Качество прессованных хлебопекарных дрожжей: мальтазная активность, мин зимазная активность, мин подъемная сила, мин I УЧ 4,5 4,8 Показатели 1 Предлагаемый штамм 4, 4,5 4,8 і 30 240 30 240 30 240 24 24 24 47,0 85,0 36, 3 64, 9 48,8 85,2 300 ' 33 25 38 32 36 60 50 56 • Т а б' п и ца Показатели 2 Штаммь дрожжей ЛК-14 ЧК Предлагаемый штамм Товарные ЧК Товарные 25 49 25 35 240 38 * ззс 5£ 63 39 54 55 Ы 9С) 60 — 60 90 Зимазная активность, мин Мальтазная активность, мин Подъемная сила, мин Кислотность, в пересчете на уксусную кислоту, мг Стойкость, ч Редактор Н. Яцола 60 — Составитель В. Голнмбет Техред М.Ходанич Корректор А.Осауленко Заказ 3434 Тираж 51I Подписное В И П Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР НИИ 113035, Москва, Ж-35, Раушская ваб., д . 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г.Ужгород, ул. Гагарина,1Л